首页 > 文献资料
-
抗氧化基因在糖缺失诱导细胞死亡中的作用
目的:探讨不同能量代谢途径对细胞存活的影响以及抗氧化基因在葡萄糖缺失模型中导致细胞死亡的作用。方法:采用EBSS建立体外培养PC12细胞葡萄糖缺失模型,采用2-DG抑制糖酵解,Oligo抑制有氧氧化。 MTT法检测细胞生存率;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞术检测细胞死亡方式;Hoechst 33342染色观察细胞核形态;Western blot和real-time PCR检测凋亡及抗氧化相关基因的表达。结果:与对照组相比,EBSS( E)组、E+2-DG组、E+Oligo组以及E+2-DG+Oligo组PC12细胞的生存率均明显下降,以2-DG组下降显著。进一步证明细胞凋亡率及坏死率亦明显增加是生存率下降的主要因素,以凋亡率增加更为明显。抗氧化基因SOD2、HO-1和NQO-1在转录及翻译水平上均明显降低。在加入外源性抗氧化剂NAC后, PC12细胞的生存率明显升高。结论:PC12细胞在糖缺失时主要依靠糖酵解来维持细胞存活。干扰糖酵解和有氧氧化通过降低抗氧化基因的表达,降低PC12细胞抗氧化能力,促进PC12细胞凋亡。
-
血小板源miR-142-3 p对血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及机制
目的:探究血小板源微体介导的miR-142-3p转移对血管内皮细胞增殖和凋亡的影响。方法:芯片预测血小板中高表达而内皮细胞中低表达的miRNA;thrombin刺激SD大鼠源血小板, CD62P标记流式细胞术检测释放微体的数量, qPCR检测miR-142-3p和阳性对照miRNA-223的表达水平;荧光共聚焦显微镜观察血小板源微体黏附过程;Western blotting 和双萤光素酶报告实验验证miR-142-3p与靶基因的作用关系;ELISA BrdU试剂盒检测细胞增殖;cleaved caspase-9 ELISA试剂盒和annexin V/PI双标流式细胞术检测细胞凋亡;miR-142-3p inhibitor和mimics用于研究细胞功能和相关信号通路。结果:根据芯片预测结果筛选miR-142-3p为血小板中高表达、内皮细胞低表达的miRNA。血小板源微体刺激内皮细胞,通过黏附后融合将miR-142-3p转移入内皮细胞进而调控靶基因。通过miRNA靶基因预测软件和IPA筛选,预测BCLAF1为miR-142-3p的靶基因并通过双萤光素酶报告实验予以证实。血小板源微体以及miR-142-3p mimics刺激内皮细胞,BCLAF1蛋白表达显著降低,内皮细胞增殖明显增加,凋亡明显降低。结论:血小板源miR-142-3p可通过微体进入内皮细胞,调控内皮细胞增殖和凋亡,具有潜在临床应用前景。
-
SM22α通过调控血管平滑肌细胞PDGF受体再循环参与血管重构过程
目的:本研究拟探讨平滑肌蛋白22α( SM22α)对血管平滑肌细胞( VSMC)表面血小板源性生长因子受体β( PDGFR-β)胞吞的影响,进而揭示SM22α对PDGFR-β活性调控的关键步骤———胞吞和泛素化动态平衡的影响及其对血管重构过程的调控作用。方法:PDGF刺激体外培养大鼠VSMC,考察siRNA敲低SM22α蛋白后不同时点的细胞中,激光共聚焦显微镜观察PDGFR-β在细胞膜分布的异同;利用活细胞工作站实时观察SM22α的表达对PDGFR-β在细胞内内吞体和溶酶体分布的异同;SM22α对c-Cbl或TRAF6等E3泛素连接酶活性的影响;siRNA敲低早期内吞体标志蛋白Rab5、再循环内吞体标志蛋白Rab4和Rab11、多泡体( MVB)标志蛋白Rab7,观察SM22α对PDGFR-β亚细胞定位的变化及其与血管重构的关系。结果:研究发现,SM22α表达下调促进细胞表面的PDGFR-β的再循环过程,使PDGFR-β在细胞表面的分子数显著减少,激活信号分子Akt和p42/44磷酸化,促进PDGF诱导的VSMC生长、增殖和迁移过程,SM22α对PDGFR-β再循环的调控与血管重构过程密切相关。结论:PDGFR-β调控异常诱发的生物学行为改变是心血管疾病的主要细胞和分子生物学基础,我们的结果表明, SM22α可能通过影响PDGFR-β胞吞和泛素化动态平衡而影响其活性的调控,进而参与血管重构的病理生理过程,阐明其分
子机制可为发掘基于影响PDGFR-β功能的心血管疾病药物设计提供新靶点。 -
年青人冠心病危险因-子与显微镜观察到的冠脉动脉粥样硬化质量的关联
研究目的:了解年青人的动脉粥样硬化是否与临床冠心病的几种危险因子相关联。 方法及结果:760例15~34岁因意外事故、杀人、自杀死亡的尸体进行尸检。左前降支冠脉做组织学切片检查。按AHA系统和电脑形态测量分级。危险因子测于死后(脂质异常、吸烟、高血压、肥胖、葡萄糖耐量差)。结果:15~19岁男子中2%、30~34岁男子中20%有AHA 4-5级病变。15~19岁妇女中无4-5级病变;8%的30~34岁妇女有该种病变。近19%的30~34岁男子和8%30~40岁妇女LAD有>40%的动脉粥样硬化性狭窄。AHA 2或3级病变(脂纹)、4或5级病变和狭窄>40%见于非HDL脂蛋白≥4.14 mmol/L(160m/dl)者。2~3级病变亦见于HLD≤0.91 mmol/L(35 m/dL)和吸烟者。AHA 4-5级病变见于肥胖(BMI≥30 kg/m2)和高血压(平均动脉压>110 mmHg)者。 结论:年青的美国人,冠脉晚期动脉粥样硬化斑块的患病率高,它们的性质提示:易破、早期动脉粥样硬化受临床CHD危险因子的影响。应该从青少年或年青成人起开始远期的CHD预防。(转载自中国医科院医学信息研究所"心血病研究展望",第65期,余国膺摘译)
-
大肠黏膜放大内镜下pit分型及其临床意义
大肠黏膜腺管开口(pit)的形态与大肠病变性质密切相关.过去已有学者对此进行了初步研究并根据各自的观察对pit形态进行了多种分型,如Kosaka等通过277例大肠黏膜病变实体显微镜观察,将pit分为四型:单纯型(simple)、乳头型(papillary)、管状型(tubular)和沟槽型(sulcal).多田对此进行了改进,分成六型,增加了混合型和无结构型.另有Eto及Nishizawa的分型.以上分型均未形成标准.直到1996年,工藤通过1 676例实体显微镜结合放大内镜观察,提出了新的pit分型标准,这一分型被日本学者广泛接受,已成为目前通行的pit分型标准.以下将介绍此分型标准并结合放大内镜所见配合图片加以说明.
-
大肠粘膜的内镜下pit分型及其意义
大肠腺管开口(pit)的形态与大肠病变性质密切相关,在工藤之前,已有学者对此进行了初步研究并根据各自的观察对pit形态进行了多种分型,如Kosaka等通过277例大肠粘膜病变实体显微镜观察,将pit分为四型:1.单纯型(simple);2.乳头型(papillary)3.管状型(tubulAR);4.沟槽型(sulcal).多田对此进行改进,分成六型,增加了混合型和无结构型.另有Eto及Nishizawa的分型.以上分型均未形)成标准.直到1996年,工藤通过1676例实体显微镜结合放大内镜观察,提出了新的pit的分型标准,这一分型广泛被日本学者接受,已成为目前通行的pit分型标准.以下将介绍工藤的pit分型标准并结合放大内镜所见配合图片进行说明.
-
大鼠被动型Heymann肾炎早期足细胞相关蛋白表达的改变
特发性膜性肾病(IMN)是临床上成人肾病综合征常见的病理类型之一.但迄今发病机制仍不明.有关膜性肾病足细胞裂孔膜蛋白如nephrin、podocin、CD2AP以及骨架蛋白α-actinin-4表达的变化、特别是早期的改变及其在膜性肾病发生中的作用报道很少.大鼠Heymann肾炎(HN)模型的表现及病理改变与人类膜性肾病十分相似,已作为人类膜性肾病的动物模型广泛应用[1].我们通过建立大鼠被动型HN(PHN)模型,应用间接免疫荧光激光共聚焦显微镜观察肾小球足细胞nephrin、podocin、CD2AP以及α-actinin-4在PHN大鼠早期表达的变化,以探讨膜性肾病的发病机制.
-
蛋白激酶C亚型在高糖诱导肾系膜细胞中的表达
蛋白激酶C(PKC)激活在糖尿病肾病中的作用已受到广泛重视和研究[1].但不同的PKC亚型在糖尿病肾病发病作用还不清楚.我们采用多光子激光共聚焦显微镜观察高糖作用的肾系膜细胞中的PKC亚型α、β、ε表达和转位,以探讨这3种PKC亚型在糖尿病肾病中的作用.
-
细胞定量分析在头颈肿瘤临床诊断中的意义
目前,肿瘤性疾病确诊的依据主要靠病理组织切片光学显微镜观察形态的变化,带有一定的主观性.随着临床研究、计算机以及计量技术的发展,细胞定量分析技术可作为一种在细胞水平进行分析的较成熟的新技术应用于临床肿瘤的早期诊断,标准的定量指标使诊断更具客观性.
-
全自动尿沉渣分析仪与普通显微镜检查对血尿来源定位的意义
在泌尿系统疾病中,血尿是一种常见症状,它的来源不同,治疗原则也不同,因此,对血尿来源的鉴别具有重要的临床意义.我院对一组血尿患者进行全自动尿沉渣分析与普通显微镜观察红细胞形态以鉴别血尿的来源,现报告如下.
-
尿沉渣分析和尿液自动分析仪的应用价值比较
在肾脏及泌尿系统疾病的诊断中,尿常规及尿沉渣的检测占有极其重要的地位.针对尿液自动生化分析仪在干扰因素较多,尤其是临床对RBC检测反应较大,再者尚有WBC假阳性,在一定程度上影响了检验结果的可靠性.尿液沉渣镜的不规范化,是当前检验工作急待解决的问题.多年来,一直将尿沉渣直接尖载波上用显微镜观察,其尿滴大小,厚度无一固定标准,直接影响结果的准确性和重复性;即使有用离心沉淀镜检的方法,因离心速度,离心时间,浓缩倍数不同,使结果差异很大;我们用FAST-READ10R定量尿沉渣分析板(尿板)辅助干化学联合测定尿液中RBC、WBC、管型等成分,以求更好地为临床服务.
-
《实验诊断学》实验教学中显微数码互动系统的应用评价
实验诊断学是基础医学向临床医学过渡的桥梁学科,是一门以检验项目的临床应用为目的,使学生掌握临床思维,运用实验结果服务临床的综合性学科.其中血液及骨髓细胞形态学是教学中公认的重点与难点,必须借助光学显微镜观察细胞的形态、并对细胞进行分类和计数.由于细胞形态学标准和判定水平不一,主观性较强,结果辩认差异大,影响结果判断.
-
32例肝脏细针穿刺细胞学诊断分析
细针穿刺细胞学是早期诊断肝癌的有效方法之一。现将本院1999年32例肝脏穿刺涂片介绍如下。 1. 资料与方法:我院1999年间行细针穿刺而且有病理学诊断的病例32例。均经B超或CT定位,皮肤消毒,用9号带槽套管针对肝脏肿块进行穿刺,穿出物立即涂片,固定于甲醇溶液中,常规HE染色,显微镜观察。
-
Caveolin-1的生物学结构及在肿瘤研究中的进展
上个世纪50年代,Yamada用电子显微镜观察到细胞膜上存在许多烧瓶状的小凹结构,并命名为细胞质膜微囊(Caveolae).在随后的几十年中,这个囊泡样的结构虽然引起了许多学者极大的兴趣,但对其构成成分以及功能的研究仍然不深入;
-
尿液沉渣检查
现将尿沉渣实验室检查相关内容综述如下. 1 显微镜镜检 1. 1 显微镜尿沉渣检查方法: 1. 1. 1 离心沉淀法: 1997版<全国统一操作规程>对此做了明确规定.取尿液离心,尿沉渣,混匀,在载玻片上用显微镜观察.以高倍视野所见低、高数字或以每微升 xx细胞( xx/μ l)报告,该法需要离心,但离心时间过长易使细胞聚集包绕或变形破坏,离心时间不足,管型等成分沉淀不完全,离心用尿量及所剩沉渣尿量不同,计数差异显著.
-
UF-50全自动尿沉渣分析仪及优利特-200尿液干化学分析仪测定尿液隐血的结果分析
当前,在尿液红细胞的检查中,通常采用显微镜计数与干化学法相结合检查.但在显微镜检查中,因受诸如涂片厚薄、离心情况、检验者主观判断等因素影响较多,难以得到规范统一的检查结果,UF-50尿液流式细胞计数仪的使用较好的解决了这一问题.而面对此两种方法检查结果出现差异时的临床意义的分析,一方面,须结合测定原理进行分析,针对各检查方法的影响因素采取校正措施,在排除影响因素后,检查结果的差异在疾病的定位中有参考意义;另外,在尿隐血的检查中,须结合显微镜观察.
-
中等职业《组织学》教学浅谈
<组织学>是研究机体微细结构及其相关功能的科学,它是以显微镜观察组织切片为基本方法的,故又称显微解剖学.传统的组织学教学是教师利用组织的挂图演示各组织细胞的形态结构,或者是教师在黑板上画图演示与讲解,然后学生在实验室观看组织学切片,以此来掌握个组织细胞的形态结构特点.在2000年以前中等专业学校的招生是通过考试录取的,学生的理解相对强,且学生数量少,教学资源还相对能满足教学使用,取得良好的教学效果.
-
对组胚实习课教学的一点看法
组织胚胎学是一门重要的形态学基础课,它涵盖组织学与胚胎学两门学科,内容多,知识而广,专业性强.我校组胚课的传统教学法主要是通过理论课讲授基本理论和实习课利用光学显微镜观察切片来完成的.
-
浅谈如何加强组织学与胚胎学实验教学
<组织学与胚胎学>是一门重要的专业基础课程,它包含组织学与胚胎学两门学科,内容多,知识面广,专业性强.组胚课的传统教学法主要是先通过理论课讲授基本理论,然后通过实验课利用光学显微镜观察组织切片两步骤来完成.
-
注重专业素质教育,加强实验教学的能力培养
组织学是研究机体微细结构及其相关功能的医学基础课.它以显微镜观察组织切片为基本方法.因此,在教学过程中,实验教学占有举足轻重的重要地位.