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PCR 荧光探针法与传统检测技术在结核病诊断中的比较
目的:通过与离心沉淀法、BD960液体培养法的比较来评价聚合酶链反应(PCR)荧光探针法这一检测手段的优缺点和可行性。方法275例痰液标本收集来自包括常州市第三人民医院2014年1—10月收治入院的结核病患者149例、常州市第二人民医院2014年1—10月收治入院的支气管肺炎患者51例、细菌性肺炎患者49例和肺部肿瘤患者26例。采用 PCR 荧光探针法检测275例临床标本,并与 BD960液体培养法和离心沉淀法的平行检测结果比较。结果PCR 荧光探针法检测的阳性率为23.3%,离心沉淀法和 BD960液体培养法的阳性率分别为14.5%和26.5%。PCR 荧光探针法和离心沉淀法仅需1 d 就可以得到结果,BD960液体培养法的阳性报告时间需要(14.37±2.93)d。结论PCR 荧光探针法不仅操作简便、快速,其阳性率高,与 BD960液体培养法有很高的可比性,适合结核病疫情严重的发展中国家推广使用。
关键词: 聚合酶链反应荧光探针法 BD960液体培养法 离心沉淀法 结核分枝杆菌 -
五种结核菌培养方法对照观察
90年代初BACTEC-460-TB自动检测技术从欧洲引进我国,通过几年检测,已有很多文章报道BACTEC法的优越性。本文报告对146例结核病人的痰标本分别作涂片、BACTEC法检测和2%NaOH碱处理后,吸取标本管内上清液体、中部液体、自沉淀液体和离心沉淀法后的标本,接种于酸性罗氏培养基几种方法分离对照结果。 方法:(1)将每份痰标本放于三支试管中,同时作涂片一张。一支试管中的痰液做BACTEC法,一张涂片做荧光染色镜检(按照全国结核细菌学检验规程操作)。
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高速离心去除残余消毒剂效果观察
利用高速离心沉淀法去除残留消毒剂,将高速离心机确定为佳操作条件,以此检测残余消毒剂去除效果.结果,用高速离心沉淀法,对常规试验标本,采用转速16 000 r/min离心1 min,对标本中细菌回收率可达99.13%;对设计的各组试验菌数符合中和效果要求,可达到去除残留消毒剂的目的.结论,以转速16 000 r/min,离心时间1 min的高速离心沉淀法可有效去除残留消毒剂.
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ELISA法检测不同方法浓缩样本HBsAg结果的比较
为提高ELISA法对采样液中HBsAg的检出率,将采样液浓缩.结果,用聚丙烯酰胺凝胶法浓缩的采样液,HBsAg检出率达8.33%~9.17%,明显高于用离心沉淀法浓缩者(5.83%)及浓缩前的采样液者(2.98%~3.33%).
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呼吸道患者痰液螨虫检测结果分析
肺螨病是某些螨类寄生于人体肺部所致的一种疾病,已证实在国内有一定的感染率[1]。由于该病无特异的临床表现,诊断困难,故临床报道尚少,作者自1993年起应用NaOH消化离心沉淀法对来本站门诊部就诊的部分呼吸道患者的痰液进行了螨虫检测并加以分析,现报道如下。1 资料与方法 共检测呼吸道患者126例,其中男89例,女37例,年龄6~54岁,平均年龄为41.5岁;病程0.5~21年,表现为不同程度的临床症状,抗菌素治疗无明显好转。 收集患者24 h痰液和清晨第一口痰液,加入痰液等量的5% NaOH于痰液中,随即搅拌混匀,消化时间为3 h~4 h,以痰液消化成无痰块和粘液为适宜,将消化后的痰液放入离心管中离心沉淀,离心速度为2 000 r/min,时间为10 min,倒出上清液,取沉渣涂片镜检螨虫,每例标本涂片3张。2 结果2.1 病患组螨虫的感染率、临床表现及治疗 126例患者的痰液中,检出痰螨阳性者48例,感染率为38.1%。阳性患者均具有不同程度的呼吸道症状,X线胸片有异常征象、嗜酸性粒细胞有不同程度的增高,均确定为肺螨病,用甲硝达唑治疗,每日剂量0.8 g,给药3个疗程,每疗程7 d,痰液复查45例转阴,转阴率为93.75%。
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磁珠法检测抗酸杆菌的方法建立与临床应用
目的 运用磁珠法检测痰液标本中的抗酸杆菌,探讨该技术在抗酸杆菌诊断中的临床应用价值.方法 采用磁珠法检测102份痰液标本中的抗酸杆菌,并与离心沉淀法平行检测结果相比较.结果 同一份标本经磁珠法处理后镜下视野更清晰,抗酸杆菌和背景对比更鲜明,102份痰液标本中离心沉淀法检测的阳性率为47.1%,磁珠法检测的阳性率为51.0%,54份离心沉淀法检测阴性的标本用磁珠法检测有4份阳性,平行检测同一份标本,磁珠法检测出的阳性等级更高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 磁珠检测方法操作简便、快速,其阳性率高,浓缩效果明显,适合结核病检测实验室的推广.
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脑脊液嗜酸性粒细胞检查对小儿脑囊虫病的诊断价值
脑脊液(CSF)嗜酸性粒细胞检查及其对小儿脑囊虫病的诊断价值的研究,国内报道罕见,1994年1月~1998年10月我院应用CSF细胞学方法,即侯氏CSF玻片离心沉淀法及侯氏CSF细胞分类法对18例小儿脑囊虫病检查结果表明,CSF嗜酸性粒细胞明显高于对照组,对小儿脑囊虫病的诊断有较肯定的价值,现报告分析如下.
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恶性肿瘤胸腹水细胞学检验探讨
我院采用离心沉淀法和瑞姬氏染色,对61例恶性肿瘤患者胸水腹水进行了细胞学检查.我们在实践工作中发现肿瘤患者胸腹水细胞成份的改变与疾病的发展有关.因此,开展胸水细胞学检查有非常重要的意义.同时对探讨恶性肿瘤血性胸腹水和非血性胸腹水细胞出现率指标提供理论依据.现将结果报告如下:
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离心沉淀法检测结核分枝杆菌临床研究
目的:加强痰涂片检测结核分枝杆菌的质量控制,提高阳性检出率。方法确诊肺结核患者346例,分别采用直接涂片法、离心沉淀涂片法检测结核分枝杆菌,并进行比较。结果离心沉淀涂片法阳性率41.3%,直接涂片法阳性率25.7%,离心沉淀涂片法阳性率高于直接涂片法,两者阳性率比较差别有统计学意义(P<0.005)。
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痰涂片检查结核分枝杆菌三种方法的比较
基层单位一般采用直接涂片法检查痰内结核分枝杆菌,检出率较低,特别是痰标本为唾液痰时,检出率更低.我们在78例本站临床确诊的肺结核患者中采用直接涂片法、漂浮集菌法、离心沉淀法等三种方法检查痰内结核分枝杆菌,并进行比较.结果直接涂片法检出率为44.9%,漂浮集菌法检出率为42.3%,离心沉淀法为64.1%.
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正交试验法优选镇咳饮口服液的佳工艺条件
镇咳饮口服液是由荆芥、黄芩、紫苏叶、桔梗、甘草等12味中药组成的复方制剂,具有疏风散寒,宣肺止咳,兼清内热之功效.临床上主要适用于外寒内热型外感咳嗽.该方原为汤剂,经多年临床应用证明,疗效确切.为了临床服用方便,减少服用量,把汤剂改为口服液剂型.关于口服液制备工艺已进行水提醇沉法与高速离心沉淀法两种工艺比较[1].结果高速离心法制备工艺较佳,成本低,疗效高,质量好.为了更好地保证质量,扩大生产,本文用正交试验法对该口服液加水量、煎煮时间、离心时间进行考察优选.
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磁珠法在抗酸杆菌快速检测中可行性的研究
目的 通过与BD960快速液体培养法、离心沉淀法的比较来评价磁珠法这一检测手段的优缺点和可行性.方法 采用磁珠法检测108例痰液标本,并与BD960快速液体培养法和离心沉淀法的平行检测结果相比较.结果 1)磁珠法和离心沉淀法仅需1天就可以得出结果,BD960快速液体培养法的阳性报告时间需要10.72±4.49天.2)磁珠法阳性占BD960快速液体培养法的88.8%(71/80).3)离心沉淀法阴性的43例标本中磁珠法有6例标本为阳性,占离心沉淀法阴性标本的14.0%(6/43),且磁珠法的浓集效果更好.结论 磁珠法不仅操作简便、快速,其阳性率高,与BD960快速液体培养法有很高的可比性,适合结核诊断实验室的开展.
关键词: 磁珠法 BD960快速液体培养法 离心沉淀法 结核分枝杆菌 -
肥达氏-外斐氏试验3种测定方法的比较
目前国内检测肥达氏-外斐氏试验都采用直接凝集法(试管法)、微量法(塑料盘微量法).以上2种方法需时较长,报告结果较慢.我们依据抗原、抗体的特异性结合反应可在1~2min内完成的机理,对常规肥达氏、外斐氏试验采用了离心沉淀法,取得了满意的效果.我们用3种方法对伤寒疫区(红卫街管理区)含伤寒病人11人,疑似病人、接触者计300份血清进行了伤寒、副伤寒、OX1の抗体水平调查,并做对比试验,现将结果报告如下:
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关于开展玻片离心沉淀法进行临床脑脊液细胞学检查的呼吁
脑脊液细胞学的检查和临床应用虽已开展了百余年,由于一般脑脊液中的细胞数量很少,以及细胞收集器械的制作和检查方法上的滞后,前半个世纪一直停滞在应用古老的血细胞计数板进行简单而不精确的检查方法,严重地影响了该项检查的发展和临床应用.
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消炎痛片及氯唑沙宗片中大肠杆菌的检查
本文介绍了有抑菌作用口服药物消炎痛片及氯唑沙宗片中大肠杆菌的检查,采用离心沉淀法,结果重现性好,效果满意.
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如意金黄软膏的微生物限度检查方法的验证
目的 建立如意金黄软膏的微生物限度检查方法.方法 采用<中华人民共和国药典>2010年一部规定的离心沉淀法,对细菌,霉菌及酵母菌的计数方法以及控制菌检查方法进行验证.结果 根据回收率试验结果,3次平行试验3种细菌及两种霉菌的菌回收率试验均高于70%,稀释剂对照组菌回收率也高于70%.控制菌的检查方法的验证也符合规定.结论 如意金黄软膏可用离心沉淀法进行微生物限度检查.
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几种特殊标本的染色前处理
在临床检验中,胸腹水,脑脊液的细胞学检验比较常见.但由于采集标本时的技术问题或标本本身原因,使标本内含的非病理细胞成分或物质较多,如采用常规的离心沉淀法,制片染色会给细胞学检验带来一定的影响,如造成细胞之间相互遮盖,或染色不良等,导致检测假阴性我们经过试验对比,发现了几种比较实用的改进方法.
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肠康片控制菌检方法的研究
肠康片是治疗肠道疾病的中药制剂,其主要成分为盐酸小檗碱、木香、吴茱萸(制)等.其中盐酸小檗碱具有较强的抑制大肠杆菌生长作用.笔者曾用常规方法检验,但大肠杆菌阳性对照未生长,因此进行如下方法的研究.1.实验仪器、材料 800型离心机,减压抽滤器(微孔滤膜45μm),隔水式恒温培养箱.肠康片(市售,山海关制药厂生产,批号:000602 010112 010608).实验菌种为大肠杆菌[CMCC(B)44102]用前制成每1ml含大肠杆菌50~100个的菌液.MUG培养基等.2.实验方法2.1取本品10g,用灭菌研钵研细置100ml生理盐水中,使成1∶10供试液.2.2使用离心沉淀法、稀释法、薄膜过滤、沉降法分别处理1∶10供试液.分别取经四种方法去除抑菌作用处理的供试液10ml分别加入备好的胆盐乳糖增菌液中,同时作阳性对照、阴性对照.
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利用离心沉淀法移植恒河猴血管内皮细胞替代角膜内皮的可行性分析
目的 分析利用离心沉淀法移植体外培养的恒河猴血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VEC)替代角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CEC)的可行性.方法 将恒河猴9只随机分为2组:实验组(6只)、对照组(3只).实验组:角膜环钻取下中央角膜组织,显微镜下撕除后弹力层,将角膜植片形成约45°倾斜、内表面向上方置于0.6 mL EP管中,再向管中加入配置好的密度为40×106L-1的恒河猴VEC悬液0.5 mL,管中形成棉球在下、角膜植片在中间、细胞悬液在上面的三明治结构,盖紧EP管,放置于离心机中,以400r·min-1、800 r· min-1、1200 r·min-1的转速各离心4 min后将植片原位缝回植床;对照组:将撕除后弹力层的术眼角膜植片原位缝回植床.术后1个月、2个月、3个月分别摘取术眼,行扫描电镜观察移植的VEC在角膜植片内表面的分布情况.结果 离心沉淀后倒置显微镜观察,可见移植的类圆形细胞均匀贴附于角膜植片内表面;术后1个月扫描电镜显示种植的VEC贴附于角膜内表面,细胞表面积较大,呈长梭形,细胞间连接不紧密,可见细胞间隙及少量裸露的胶原纤维区;随着时间推移,术后2个月时,可见植片内表面的VEC密度逐渐增大,细胞间出现紧密连接;术后3个月时,可见细胞密度进一步增大,大片状均匀贴附于角膜植片内表面,细胞呈不规则多边形,高倍镜下,细胞表面可见典型的长短不一微绒毛.对照组未见纤维裸露区,胶原前表面偶见白细胞及变形红细胞.结论 离心沉淀法可以将VEC成功移植于角膜内表面并均匀分布,移植后的VEC可异位生长并大量分裂增殖.
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离心沉淀法在乳核内消液生产中的应用研究
目的:解决乳核内消液的沉淀超标问题.方法:离心分法除去沉淀.结果:离心分离法除去乳核内消液中的沉淀,效果可靠.结论:离心分离法除去沉淀,用于乳核内消液的生产切实可行.