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在育龄妇女健康体检中引入液基细胞涂片技术的实践探讨
宫颈癌是全球妇女恶性肿瘤中仅次于乳腺癌的第二个常见的恶性肿瘤.我国每年新增发病例数超过13万,约占总数的1/3.特别值得注意的是,由于环境污染加上生活中的不良卫生习惯,使原本多发于50岁左右的女性宫颈癌,有明显年轻化的趋势,严重威胁女性生殖健康.
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细针吸取微小组织学与涂片细胞学在颈淋巴结转移性肿瘤中的诊断价值
目的探讨微小组织学与涂片细胞学(FNAC)在淋巴结转移性肿瘤分型中的诊断价值.方法选取有术后病理组织学对比的168例颈部淋巴结转移病例,其中111例仅行FNAC检查,57例有微小切片与FNAC检查.结果微小切片加FNAC组诊断敏感性为96.5%,FNAC组为79.3%.淋巴结转移性肿瘤分型中微小切片组加FNAC组准确率为94.7%,涂片组分型准确率为82%,两者相比差异显著(P<0.05).高分化癌转移淋巴结时有较明显的细胞学特征,与同组微小切片相比差异不显著(P>0.05);淋巴结转移性低分化肿瘤中涂片组无明显细胞学特征,诊断准确率73%,微小切片与FNAC结合组诊断准确率93.6%,后者与前者相比差异显著(P<0.05).结论针吸细胞涂片检查在高分化转移性肿瘤中诊断正确性较高,淋巴结转移性低分化肿瘤可利用细胞涂片与微小组织学相结合的方法提高分型的准确率.
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肝穿细胞学涂片诊断不常见肿瘤4例报告
经B超或CT定位,皮肤消毒,用9号带槽套管针对肝脏肿块进行穿刺,穿出物立即涂片,固定于甲醇溶液中,常规HE染色,显微镜观察.现将肝穿细胞涂片中4例不常见的肿瘤类型介绍如下:
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新柏超薄细胞涂片技术的应用体会
新柏液基薄层细胞学技术(thinPrep cytologic test,TCT)是具有革命性的细胞学代表制作技术之一,该技术制作的涂片具有背景清晰、细胞平铺且随机选取的细胞有代表性等优点,与传统方法相比假阴性率减少50%以上.
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浆膜腔脱落细胞学制片方法质量控制的对比研究
细胞病理学自诞生以来,以其简单、易行、安全、经济、痛苦少、诊断快、准确率高[1]等优点,被广泛应用,现已成为一项重要的诊疗技术.对于细胞学诊断医师而言,优质的细胞学制片至关重要,是做出正确诊断的关键所在.但目前由于技术原因导致细胞学制片质量不佳,直接影响了细胞学诊断的开展.本实验主要对浆膜腔积液细胞学检查技术进行对比研究,从易出现问题的(标本保存、制片、固定)细节入手,探讨不同因素对细胞学及其细胞蜡块免疫组化检查质量的影响.
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细胞涂片免疫组化制片固定液固定效果的对比研究
细胞涂片免疫组化制片一般采用95%乙醇、乙醇和乙醚混合液、丙酮、甲醇、Bouin液、Zenker液等固定液,但标记阳性率并不高.本研究对几种常用固定液进行了对比研究,结果显示,4%中性甲醛组和未固定组较为理想,表达率较高,显色较清晰,值得推广应用.
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两种细胞学制片方法的免疫组化结果比较
目前,组织学样本免疫组化技术已经相当成熟,但有些病例因组织标本取材困难,只能用胸、腹水等细胞学方法协助诊断.细胞免疫组化快速、简便,但技术不够成熟,存在很多问题.我们将细胞制成细胞涂片和细胞蜡块进行免疫组化染色,并比较结果,希望有助于疑难细胞学的诊断.
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细胞涂片间期荧光原位杂交在血液系统疾病中的应用
本研究探讨细胞涂片间期荧光原位杂交(FISH)在血液系统疾病中的临床应用价值.以BCR/ABL双色双融合探针检测Ph染色体为例,同时应用了甲醇/冰醋酸处理的外周血、骨髓细胞涂片法间期FISH与常规细胞悬液滴片法间期FISH,检测20例经证实存在Ph染色体的慢性髓系白血病或急性淋巴细胞白血病患者.结果表明:与常规间期FISH相比,细胞涂片法间期FISH能够获得同样可靠的检测结果.结论:细胞涂片法间期FISH的检测结果可靠,检测周期短,易于进行回顾性研究,值得进一步开展.
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免疫细胞化学在细胞病理学中的应用
免疫细胞化学(ICC)在细胞病理学中是一很有用的辅助诊断方法.目前在甲醛固定的石蜡包埋切片和冷冻组织切片中应用的抗体也多数能应用于乙醇或甲醛固定的细胞涂片[1-3].免疫细胞化学常用的标本制备方法有4种:直接涂片(CS)法、细胞离心涂片法(cytospin)、细胞块石蜡包埋(CB)法和液基薄层制片法.
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制备硅化玻片技术方法的改进
防止组织切片或细胞涂片在染色过程中组织或细胞脱落(简称脱片)是免疫组织化学及原位分子杂交技术中的重要环节.为此,通常采用载玻片涂胶或硅化处理后再裱贴组织切片的方法来防止脱片.在众多的玻片涂胶和硅化方法当中,我们对一些方法进行了改进和探讨,总结出一种使玻片处理的操作更加简单,防止脱片效果更好的方法.
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薄片技术在体腔积液诊断中的应用
体腔积液是许多癌症患者的常见并发症,积液的细胞学检查有助于良恶性的诊断.多年来应用的传统制片方法存在着一些不利因素,如背景不清晰、常有大量红细胞、炎性渗出物及黏液;细胞涂片厚、面积过大、敏感性低等.细胞学工作者一直在探讨新的制片技术.
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胸(腹)水免疫细胞化学方法改进
免疫组织化学技术,已成为组织学诊断中不可缺少的辅助手段,特别是在肿瘤的组织学诊断、鉴别诊断中发挥了重要的作用.但在细胞学诊断中,特别是浆膜腔积液标本,却因易脱片、细胞涂片面积大,耗费试剂多、标本制作重复性差等方面的原因,不能像病理组织学作免疫组织化学那样常规开展.我们在临床细胞学检验中,对浆膜腔积液标本在做免疫细胞化学(ICC)前,进行必要的处理,克服以上影响其开展的因素,使之能像病理组织学作免疫组织化学一样成为病理科的常规工作,并获得了满意的结果.
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介绍一种细针吸取标本的细胞块制作方法
随着细针穿刺吸取(FNA)标本采集技术的发展,采用持笔姿势及持续负压等技术已经可以获取较多量的穿刺样本[1].现在此类标本不仅可以满足细胞涂片的基本需要,而且剩余的标本还可以进一步制成细胞块,用于对其组织结构的进一步观察分析,并进行免疫组织化学标记及其他分子生物学方面的辅助检查.我们介绍一种简便实用的细胞块制作方法.
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脱落细胞免疫细胞化学技术
在脱落细胞学诊断中免疫细胞化学技术是一项很重要的内容,随着新的抗体在识别抗原的特异性和多价性上日益完善,这项技术在临床病理诊断中的应用也越来越广泛.但在常规的脱落细胞学检查中,常因细胞涂片免疫细胞化学染色不够理想而未能充分展示出其应有的优势.因此,建立免疫细胞化学质控标准(质量保证和质量控制)对提高脱落细胞诊断准确率具有重要意义.本研究室接受了英国国际免疫组织化学质量评估中心的细胞学免疫组织化学技术评估,以下将我们的一些工作积累和参加评估学习过程中的一些体会介绍给大家.
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骨髓同种异体干细胞移植后淋巴组织增殖性疾病
1.病例简介:患者男,34岁.无明显诱因出现活动后乏力、气短,自觉头晕、头痛9个月入院.体检无明显异常.血常规示红细胞及白细胞减少,分片偶见原始细胞.骨髓穿刺示原始+幼稚淋巴细胞占59%.流式细胞学免疫分型CD33、CD7、CD11b、CD19、CD5、CD2、CD3阳性.染色体未见异常.临床诊断为急性淋巴细胞性白血病,双表型.于确诊后7个月进行骨髓同种异体干细胞移植.移植后给予环孢酰胺免疫抑制剂治疗,病情平稳.于移植后第55天检查发现患者右颈后可触及肿大淋巴结2枚,大小均约1.5 cm×1.0 cm×1.0 cm.临床考虑:(1)白血病髓外复发;(2)病毒感染;(3)淋巴瘤.因患者移植术后2个月,尚未出无菌舱,不宜手术摘取淋巴结送检,因此于无菌舱内应用"友谊式穿刺针"[1]穿刺肿大淋巴结获取尽可能多标本,除制成1张细胞涂片外,剩余组织全部制成细胞块,常规切片,HE染色、免疫细胞化学染色及EB病毒原位杂交染色.
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罕见乳腺病变的细胞学特点
细针吸取细胞活检是良性及恶性乳腺病变手术前的主要检查方法.相对于带芯针穿组织活检,细针吸取细胞活检具更快速、更经济、痛楚少和基本无合并症的优点.但在另一方面,由于直接细胞涂片和离心细胞涂片在保持组织结构方面逊于组织活检,要减少假阳性和假阴性,诊断者的经验就成为准确诊断的关键.细胞学诊断低分化的乳腺导管癌,一般不难.但要正确诊断良恶交界或是罕见的乳腺病变,就要在熟悉常见病变细胞学特点的基础上,留意罕见病变独特的、有时可能是非常细微的变化.这些罕见病变都有各自的细胞学特征.认识这些细微又独特的细胞学形态,加以其他辅助的检测手段,包括细胞蜡块、免疫组织化学和电镜检查,正确的手术前诊断是可以做到的.
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基因工程表达的EB病毒抗原在鼻咽癌及高危人群诊断中的应用
1967年Henle证明在鼻咽癌病人的血清中存在EB病毒特异性的IgA抗体,近30年来,检测EB病毒壳抗原的IgA抗体是鼻咽癌血清学诊断和高危人群筛查的主要方法,广泛地用于临床诊断和前瞻性血清流行病学研究,在早期发现、早期治疗、提高生存率上起了重要作用(2)。但是,至今仍使用B95-8细胞涂片,以间接免疫荧光或免疫酶方法检查血清中的抗体。检测方法繁琐,细胞中EB病毒其他相关抗原的干扰,影响检测的特异性和敏感性。Luka等人1984年建立了ELISA检测血清中抗体,其敏感性较细胞涂片检测方法提高100~1 000倍(3),但是,从B95-8细胞中提取病毒壳蛋白作为诊断抗原,受细胞中自然表达的EB病毒壳抗原(VCA)量的限制,不可能实际应用,但向人们揭示了以基因工程表达的蛋白作为诊断抗原的
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早期胃癌的临床筛选研究
胃癌是严重威胁人类健康的恶性疾病.对胃癌疾病演进过程的研究表明,癌细胞仅浸润至胃黏膜层和黏膜下层,无论有无淋巴结转移的早期胃癌患者的预后明显优于进展期胃癌患者.所以筛选早期胃癌具有重要的价值.临床筛选早期胃癌的对象包括自然人群,门诊患者,高危人群.筛选方法包括对血液,胃液及组织中胃癌标志物,相关癌基因的测定;胃癌特异抗原的检测;潜血珠法;胃癌概率计算机模型筛选法;放射影像学检查;普通内镜检查结合色素染色,多点黏膜活检,细胞刷活细胞涂片等检查;超声内镜检查可明确胃癌浸润深度.
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抗肝癌人源化单链抗体hscFv25的体外亲和力成熟
目的:提高人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的亲和力.方法:设计并合成人源化抗肝癌单链抗体hscFv25重链及轻链CDR3的半随机突变引物,构建突变体抗体库,竞争筛选亲和力更高的突变体抗体,对所得到的高亲和力的候选抗体,在大肠杆菌中进行可溶性表达,并采用细胞ELISA、细胞涂片免疫组织化学染色的方法,对该抗体进行初步的活性鉴定.结果:得到了3株候选高亲和力突变体抗体,其中的一株在大肠杆菌中获得了可溶性表达后,进一步的活性检测结果表明,该抗体的相对亲和力比亲本单链抗体提高了60倍左右,同时该抗体对肝癌细胞(SMMC-7721)的免疫组织化学染色呈强阳性,着色情况与亲本抗体相一致,而对正常肝细胞(HL-02)染色呈阴性.结论:成功地构建了人源化抗肝癌单链抗体hscFv25的突变体抗体库,并筛选到了一株亲和力更高的突变体抗体.
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食管上皮癌变过程中环氧化酶-2表达上调
目的:探讨环氧化酶-2基因在食管上皮癌变进程中的作用及细胞周期相关基因表达的改变,为环氧化酶-2抑制剂进行食管癌化学预防提供理论依据.方法:自食管癌高发区采集食管脱落上皮细胞,对细胞涂片进行病理诊断,应用流式细胞仪对环氧化酶-2、p53、p21/WAF1及CDK4等基因在食管上皮细胞中的表达进行定量检测.结果:环氧化酶-2的表达随食管上皮细胞异型性的增高而逐渐增高,在可疑癌及癌细胞中FI=1.54±0.27,100%阳性表达.突变型p53蛋白及CDK4的表达也随细胞异型性的增高而明显增高,而抑癌基因p21/WAF1的表达则相反,其表达在重度增生及可疑癌和癌细胞中明显缺失.结论:环氧化酶-2在食管上皮癌变进程中表达升高,并同时伴有细胞周期相关基因表达异常.