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DiI在人体神经解剖学中的应用
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光标记抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体).在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光,可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术测定含量.
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细胞角蛋白20对膀胱癌早期诊断的前瞻性研究
新近研究发现,细胞角蛋白20(cytokeratin 20,CK20)是一种极有可能成为诊断膀胱癌及其随访的特异性生物标记物[1,2]。为此,我们对CK20在膀胱癌的早期诊断中的应用进行了初步探讨。 1.资料与方法:62例肉眼血尿患者,其中膀胱肿瘤术后随访发现血尿42例作前瞻性分析。所有患者进行膀胱镜检查及尿脱落细胞学和CK20检测。分析参数包括肿瘤数目、大小及WHO分级,术前或活检前留取尿液行脱落细胞学和CK20标志物免疫荧光检测。 收集晨起第1次新鲜尿100 ml。尿脱落细胞学检查按常规方式进行。将收集的尿液用Hanks液洗涤2次,1?500 r/min,5 min,收集沉淀细胞,以完全RPMI 1640培养基将沉淀细胞制成细胞悬液(2×105/ml),37 ℃温箱中贴壁孵育6 h。原位冷丙酮固定10~15 min,用PBS洗涤3×3 min后,滴加抗CK20单抗,置湿盒内4 ℃过夜;PBS洗涤3×3 min后滴加荧光标记抗体羊抗鼠IgG-FITC 1∶10,37 ℃,40 min;PBS洗涤3×3 min后,荧光显微镜下观察并摄片。细胞浆和细胞膜发黄绿色的荧光为阳性反应。
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中药小分子单克隆抗体技术平台的构建
抗体是现代生命科学研究中极其重要的工具,小分子抗体技术在中医药研究领域具有广阔的应用前景.结合创新团队开展的研究工作,介绍了中药小分子单克隆抗体技术平台建立的背景和抗体制备的技术难点,针对基于中药小分子单克隆抗体的技术产品,如ELISA检测试剂盒、免疫亲和色谱柱、胶体金试纸、荧光标记抗体和抗体芯片等,探索实践了其在中医药研究领域中的多种应用,并对中药小分子单克隆抗体技术的科学意义和应用价值进行了展望.
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抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步鉴定
目的建立抗狂犬病毒(RV)核蛋白(NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定.方法采用两种方法制备该试剂:1.从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白(RNP)作抗原,免疫动物然后制备荧光标记抗体;2.直接用本室原制备的4株抗 RV NP的单克隆抗体混合进行标记.结果制备的试剂有较高的敏感性和特异性,经与法国巴斯德诊断用品公司的相应产品进行比较,所得结果的符合率为100 %.特别是用后一种方法制备的试剂优点更多.结论该制品可替代进口产品,能用于狂犬病毒的快速检测.
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系统性红斑狼疮患者外周血T细胞亚群的检测
系统性红斑狼疮(SLE)存在多种免疫功能异常,致使B细胞活化而产生大量自身抗体,导致全身多种组织器官受累.但对SLE免疫功能失调的原因尚未完全了解.为此,我们应用双色荧光标记抗体、流式细胞仪对SLE外周血CD45RA、CD45RO亚群进行了检测.