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BrdU掺人文献资料
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磷脂酰肌醇-3激酶p55γ-N末端24个氨基酸抑制结肠癌细胞增殖的作用
背景与目的:p55γ是磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,P13K)的调节亚单位之一,在调节P13K活性上具有重要的作用.本研究旨在观察P13K的一个调节亚基p55γ-N末端24个氨基酸抑制结肠癌细胞增殖的作用.方法:构建含有P13K-p55γ-N末端24个氨基酸的腺病毒载体Ad-N24p55-GFP及对照病毒Ad-GFP,以其感染结肠癌HT29细胞.流式细胞仪检测细胞周期进程,应用BrdU掺入法检测其对细胞DNA合成的影响,通过建立体内肿瘤裸鼠移植瘤模型进一步证实Ad-N24p55-GFP的抗肿瘤作用.结果:对照腺病毒Ad-GFP感染的细胞中Go/G1期细胞为65.11%,S期和G2/M期细胞数分别为17.37%和17.51%;而带有插入目的基因的腺病毒Ad-N24p55-GFP感染后的细胞Co/G1期细胞增至73.39%,S期和C2/M期细胞减少至15.08%和11.13%.BrdU掺入法结果显示BrdU阳性的细胞数由24.82%降至9.27%(P＜0.05).HT29细胞裸鼠移植瘤模型局部应用Ad-N24p55-GFP后肿瘤生长显著减慢,其瘤重明显低于空白对照组和腺病毒对照组[(0.32±0.08)g vs.(0.67±0.30)g,(0.72±0.28)g,P＜0.05].结论:过表达P13K-p553γ-N末端24个氨基酸可有效阻滞HT29细胞周期进程,抑制细胞DNA合成;并可有效抑制结肠癌裸鼠移植瘤模型的肿瘤生长.
