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热疗联合化疗及放疗对人结肠癌裸鼠移植瘤E-cad与β-cat表达影响的研究
目的:探讨热疗、化疗、放疗、热化疗、热放疗及热放化疗对人结肠癌裸鼠移植瘤上皮细胞黏附因子表达的影响.方法:将人结肠癌细胞株HT-29移植在裸鼠后肢,于实验室模拟大肠癌临床热疗、化疗及放疗方案,对荷瘤裸鼠分别实施热疗、化疗、放疗、热化疗、热放疗及热放化疗.分别于治疗前和治疗后2、4、8、12、24、48和72h,处死裸鼠.利用免疫组化染色观察肿瘤细胞膜、细胞质及细胞核钙黏附蛋白(E-cad)及β-链蛋白(β-cat)表达的形态学变化.结果:治疗后8～72h,6种治疗方法均能不同程度上调人结肠癌细胞株HT-29裸鼠移植瘤中E-cad的表达(P<0.05),而对β-cat表达的影响均不明显,P>0.05;治疗后12～72h,E-cad在热化组、热放组及热放化组的表达明显高于热疗组、化疗组及放疗组.结论:热疗可能通过增强放化疗对人结肠癌细胞株HT-29裸鼠移植瘤中E-cad的表达的改变,发挥对放化疗的增敏作用.
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灭活肠球菌抗结肠肿瘤免疫效应
目的 研究灭活状态的肠球菌作用于结肠癌细胞HT-29后,HT-29表面HLA-Ⅰ类分子及协同刺激分子CD80和CD86的表达.方法 应用流式细胞检测技术分析了结肠癌细胞表面HLA-Ⅰ分子和协同刺激分子B7-1(CD80)、B7-2(CD86)分子表达的变化.结果 热灭活状态的肠球菌能够明显地提高结肠癌细胞表面HLA-Ⅰ类分子和共刺激分子CD80和CD86的表达,结肠癌细胞的存活率均＞90%.结论 灭活的肠球菌具有潜在的抗肿瘤效应.
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RNA干扰对HT29细胞PIDD蛋白表达及细胞耐药性影响的研究
目的 观察氟尿嘧啶(5-FU)刺激后PIDD蛋白在结肠癌HT29细胞中分布的改变,以及小干扰RNA(siRNA)干扰PIDD蛋白前后,HT29细胞耐药性的变化.方法 用siRNA干扰HT29细胞内PIDD蛋白的表达,用5-FU刺激HT-29细胞.Western blotting法检测干扰前后细胞PIDD的表达,并比较5-FU刺激后干扰与未干扰HT-29细胞内PIDD在细胞中分布的变化.MTT比色法检测siRNA干扰前后细胞对5-FU的敏感性,并计算各组细胞的IC50值.结果 未受5-FU刺激前,PIDD蛋白主要分布于细胞质中;受5-FU刺激后,PIDD蛋白迁移至细胞核.siRNA干扰后细胞中PIDD表达总量有所下降,胞质及胞核中的表达均降低,受5-FU刺激后PIDD的表达也未见升高,迁移至胞核的PIDD也未增加.MTT检测证明5-FU对转染组(PIDD-360转染12h后的HT29细胞)的IC50值为0.23±0.06μg/ml,与正常组(未作处理的HT29细胞,IC50为2.71±0.70μg/ml)和对照组(阴性对照试剂转染12h后的HT29细胞,IC50为2.78±1.03μg/ml)比较显著降低(P＜0.05).结论 经siRNA干扰PIDD蛋白后,HT29细胞的耐药性明显下降,推测其机制与胞核中PIDD降低导致的NF-κB活性降低,细胞凋亡增多有关.
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结直肠癌患者血清与LoVo细胞、HT29细胞培养液比较蛋白质组学研究
目的对LoVo细胞、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清中特异蛋白质组进行对比研究.方法应用美国CipherGen公司金属亲和表面(IMAC3)芯片和蛋白质芯片仪检测LoVo细胞培养液、HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清.结果结直肠癌患者血清与LoVo细胞培养液中都含有质荷比为11 731Da的蛋白质.HT29细胞培养液与结直肠癌患者血清中无相同的蛋白质.结论 LoVo细胞培养液与结直肠癌患者血清中有相同的蛋白质.
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何首乌R50部位诱导人结直肠癌细胞凋亡的作用机制
目的 考察何首乌R50部位对体外培养的人结直肠癌细胞活性的影响,探究其对人结直肠癌细胞周期和凋亡的作用.方法 体外培养人结直肠癌HT29和HCT116细胞24 h,加入何首乌R50部位50～300 mg·L-1继续培养24,48和72 h,MTT法检测细胞存活率;何首乌R50部位50,100和200 mg·L-1分别与HCT116和HT29细胞作用48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;何首乌R50部位100 mg·L-1与HCT116和HT29细胞作用48 h,Giemsa染色检测细胞及核的变化,Western蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白的表达.结果 何首乌R50部位对HCT116和HT29细胞存活抑制作用显著,呈时间和浓度依赖性;不同浓度何首乌R50部位与HCT116和HT29细胞作用48 h后,对细胞周期的影响均不显著;但随着何首乌R50部位浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,200 mg·L-1组HCT116细胞凋亡率由对照组的(5.85±0.35)%增加至(27.65±1.62)%(P<0.05),HT29细胞的凋亡率由(10.25±0.77)%增加至 (35.35±0.35)%(P<0.05);何首乌R50部位100 mg·L-1作用HCT116和HT29细胞48 h,Giemsa染色可见部分细胞出现细胞固缩、核染色质凝集、凋亡小体形成等细胞凋亡形态;胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白表达均下降.结论 何首乌R50部位主要通过诱导人结直肠癌HCT116和HT29细胞凋亡而使其存活率下降,并通过胱天蛋白酶依赖信号通路诱导人结直肠癌细胞凋亡,Pdcd4蛋白表达下调可能与其相关.
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脱氧紫色杆菌素抑制结肠癌TH29细胞增殖及诱导凋亡作用与机制
目的 探讨脱氧紫色杆菌素(Deoxyviolacein)对人结肠癌HT29细胞增殖抑制和诱导凋亡及其可能机制.方法 用不同浓度的脱氧紫色杆菌素处理HT29细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,检测脱氧紫色杆菌素对HT29细胞的抑制率;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase9表达的变化.结果 脱氧紫色杆菌素对HT29细胞有明显的增殖抑制作用;可提高G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例;细胞凋亡率升高,Bax和Caspase9蛋白表达升高,Bcl-2蛋白的表达降低.结论 脱氧紫色杆菌素抑制结肠癌HT29细胞增殖并诱导凋亡,其凋亡机制可能作用于线粒体介导的内源性通路.
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热疗对人类结肠癌细胞株细胞黏附因子表达的影响
目的探讨热疗对人类大肠癌细胞株细胞黏附因子表达的影响.方法采取体外实验方法,在实验室条件下模拟临床热疗条件对HT29细胞株加热43℃,60 min,借助PCR及免疫组化方法,分析热疗后不同时间内上皮黏附因子(E-cad)及α-,β-,γ-链蛋白(cat)表达的改变.结果热疗后24 h E-cad表达显著增强,动态分析显示,与未接受热疗的细胞比较,E-cad在热疗后24～72 h内呈现逐渐增强趋势;γ-cat的表达在热疗后8～72 h内也呈现增强趋势;经过43℃,60 min的热疗,β-cat的表达在4～72 h内呈现逐渐减弱趋势;α-cat的表达在热疗后未出现显著的改变.结论43℃,60 min的热疗可以上调人类大肠癌细胞株E-cad、γ-cat的表达;下调β-cat的表达;而对α-cat的表达未产生影响.
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哺乳动物雷帕霉素靶蛋白在人结肠癌中的表达及其对HT-29细胞增殖凋亡的影响
目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mTOR)基因在人结肠癌组织中的表达及其对HT-29细胞增殖与凋亡的影响.方法 免疫组织化学方法检测磷酸化mTOR (p-mTOR),在郑州大学第一附属医院普通外科2009年10月至2010年6月50例结肠癌组织和50例正常结肠组织中的表达情况.体外合成mTOR小干扰RNA(siRNA),转染人结肠癌HT-29细胞为实验组,同时设空白对照组(不转染)及无义对照组(转染无义siRNA),Western印迹法检测各组HT-29细胞的mTOR蛋白表达；四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖；原位末端标记法检测细胞凋亡.结果 结肠癌组织中p-mTOR的表达高于对照组[60％(30例)比14％(7例),P＜0.05],mTOR的表达和淋巴结转移、肿瘤的分化程度相关(r=0.311、0.427,均P＜0.05).实验组HT-29细胞mTOR的表达和细胞增殖均低于空白对照组和无义对照组(0.39±0.25比1.18±0.05、1.46±0.09,0.275±0.033比0.460±0.028、0.450±0.037,均P＜0.05)；细胞凋亡指数则均高于空白对照组和无义对照组(12.33±1.53比0.33±0.31、1.67±0.58,均P＜0.05).结论 在结肠癌组织中存在mTOR高表达,mTOR siRNA对HT-29细胞mTOR基因的表达有抑制作用,能抑制HT-29细胞的增殖并促进其凋亡.
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山羊脾脏来源多肽对HT29细胞作用的研究
目的:探讨山羊脾脏来源多肽(PGS)在体外对HT29细胞集落生成及细胞周期的影响.方法:首先,培养HT29细胞.采用体外双层软琼脂细胞培养方法,观察PGS对细胞集落生成的影响,然后选择合适剂量的PGS对HT29细胞作用一定时间,用流式细胞术分析细胞周期各时相的含量以测定PGS对HT29细胞周期的影响.利用SAS软件对以上数据进行分析比较.结果:体外培养条件下PGS对HT29细胞系有抑制集落生成作用,并与浓度呈正相关;细胞周期分析显示PGS可使S期细胞含量明显下降.结论:PGS中含有对HT29细胞起抑制作用的物质.
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吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞端粒酶活性的影响
目的:探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞凋亡及端粒酶催化亚基(hTERT)表达的影响,为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据.方法:体外培养人结肠癌HT29细胞,加入不同浓度的吴茱萸碱及盐酸小檗碱进行培养,采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,TRAP法检测端粒酶活性,RT-PCR法检测hTERT的表达.结果:吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后,增殖明显受到抑制,呈剂量和时间依赖性;能够降低HT29端粒酶活性,但二者无协同作用;并且端粒酶hTERT表达降低,具有剂量依赖关系.结论:吴茱萸碱和盐酸小檗碱对结肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用,该抑制作用可能通过下调端粒酶hTERT基因表达,降低端粒酶的活性,为临床治疗大肠癌提供实验依据.
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肠复康抑制人大肠癌 HT29裸小鼠移植瘤细胞增殖的机制
目的探讨肠复康抑制人大肠癌 HT29裸小鼠移植瘤细胞增殖的机制.方法建立人大肠癌 HT29癌细胞株裸小鼠皮下移植瘤模型,免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测移植瘤细胞 KI- 67阳性细胞数、血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor ,VEGF)、血管内皮生长因子受体( fetal liver kinase- 1,FLK- 1)和转化生长因子β 1( transforming growth factor beta 1,TGF-β 1)的积分光密度( integra optical densit,IOD) ,并使用逐步引入剔出模型进行多元线性回归分析.结果与模型组比,肠复康组和西药组均使移植瘤 KI- 67阳性细胞数明显减少 (P< 0.001),同时能显著降低瘤细胞 VEGF、FLK- 1和 TGF-β 1 的含量 (P< 0.05～ 0.001);回归分析结果 ,移植瘤 KI- 67阳性细胞数与瘤细胞 VEGF和 FLK- 1含量呈明显正相关 (前者 r=0.802,P< 0.001;后者 r=0.668,P< 0.001).结论肠复康能抑制人大肠癌 HT29裸小鼠移植瘤细胞增殖 ,其机制之一可能是减少瘤细胞的 VEGF、FLK- 1和 TGF-β 1 的生成,特别是减少 VEGF和 FLK- 1的生成.
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丁酸钠和1,25-(OH)2D3对人结肠癌细胞增殖和hTERT表达的影响
背景:端粒酶在肿瘤细胞永生化过程中起重要作用,人端粒酶逆转录酶(hTERT)是调节端粒酶活性的关键因素.有研究发现生物活性制剂丁酸钠和1α,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D31具有潜在抗肿瘤效应.目的:观察丁酸钠和1,25-(OH)2D3对人结肠癌细胞增殖的影响及其可能机制.方法:以不同浓度丁酸钠(0.5～2.0 mmol/L)、1,25-(OH)2D3(10-8～10-6mol/L)或两者联合[1.0 mmol/L丁酸钠+10-7mol/L 1,25-(OH)2D3]诱导人结肠癌细胞株HT29,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,RT-PCR检测hTERT mRNA表达.结果:丁酸钠和1,25-(OH)2D3能剂量和时间依赖性地抑制HT29细胞生长;1.0 mmol/L丁酸钠和10-7mol.L 1,25-(OH)2D3能诱导HT29细胞G0/G1期阻滞和细胞凋亡,抑制hTERT mRNA表达.联合用药组的上述作用较两者单用更为明显(P＜0.05).结论:丁酸钠和1,25-(OH)2D3抑制人结肠癌细胞增殖的作用与其通过下调hTERT基因表达而抑制端粒酶活性、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡有关:两者联合可产生协同作用.
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5-氨基水杨酸联合尼美舒利对结肠癌细胞株HT-29增殖的影响
背景:研究表明5-氨基水杨酸(5-ASA)和非甾体抗炎药(NSAIDs)对结直肠癌具有化学预防作用,但目前关于两类药物联合应用对结直肠癌影响的文献较少.目的:研究5-ASA联合选择性环氧合酶-2抑制剂尼美舒利对人结肠癌细胞株HT-29的增殖抑制作用及其可能机制.方法:采用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法测定5-ASA、尼美舒利单独以及联合应用抑制HT-29细胞增殖的作用,分别采用原位末端标记(TUNEL)和免疫细胞化学方法检测细胞凋亡和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:1～1000 μmol/L 5-ASA或尼美舒利单独应用对体外培养的HT-29细胞具有明显增殖抑制作用,呈剂量依赖性;两者在100 μmol/L剂量下分别作用12～96 h,抑制率逐渐增高,呈时间依赖性.20～2000 μmol/L 5-ASA与尼美舒利联合应用能明显抑制HT-29细胞增殖,呈剂量和时间依赖性,且优于单独应用5-ASA或尼美舒利(P＜0.05).10～500 μmol/L 5-ASA和尼美舒利单独或联合作用于HT-29细胞,细胞凋亡率逐渐增高,PCNA表达逐渐降低,与单独应用相比,联合用药作用更强(P＜0.05).结论:5-ASA联合尼美舒利具有抗HT-29细胞增殖的作用,其作用优于单独应用5-ASA或尼美舒利.
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hCaMKⅡNα对结肠肿瘤分泌免疫抑制因子的抑制作用
目的:探讨钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制蛋白α(human calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ inhibitory alpha,hCaMKⅡNα)对结肠肿瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响及其作用机制.方法:将hCaMKⅡNα基因表达载体(pKⅡNα)或siRNA(si-KⅡNα)转染至结肠肿瘤细胞(LoVo细胞、SW620细胞和HT29细胞),形成过表达或干扰表达细胞.RT-PCR检测结肠癌LoVo细胞过表达hCaMKⅡα后白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)mRNA表达水平,ELISA法检测转染pKⅡNα或si-KⅡNα对SW620和LoVo细胞中VEGF、PGE2、IL-8和IL-10分泌的影响.为观测细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)在hCaMKⅡNα介导的细胞因子调控中的作用,利用U0126抑制HT-29细胞中ERK1/2活性后,检测hCaMKⅡNα表达下调对VEGF和IL-8分泌的影响.结果:hCaMKⅡ可显著抑制结肠癌LoVo细胞中VEGF、IL-8和IL-10mRNA水平的表达;可抑制SW620和LoVo细胞中IL-8和VEGF蛋白的分泌,但对PGE2和IL-10的分泌没有影响.相应地,利用RNA干扰技术下调hCaMKⅡNα表达可显著上调HT29细胞中IL-8和VEGF的分泌;并且发现MEK1/2活性的抑制可完全阻断hCaMKⅡNα对IL-8的影响,但只能部分阻断对VEGF的影响.结论:hCaMKⅡNα通过抑制ERK活性下调结肠肿瘤细胞VEGF和IL-8的分泌,在结肠肿瘤免疫逃逸中起到负相调控作用.
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PPARγ活化诱导细胞凋亡和周期阻滞来抑制结肠癌细胞生长
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ)在结肠癌细胞株HT-29中的表达及其活化后对结肠癌细胞生长的影响.方法:通过RT-PCR和Western blot检测HT-29中PPARγ mRNA及蛋白质的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法检测PPARγ配体罗格列酮(rosiglitazone,Rosi)和15d-PGJ 2对HT-29细胞生长的影响,荧光显微镜、TUNEL法观察Rosi和15d-PGJ2激活PPARγ后诱导HT-29细胞凋亡形态和生化改变,流式细胞仪(FCM)以碘化丙啶(PI)单染法检测细胞周期.结果:RT-PCR及Western blot检测结果表明结肠癌细胞HT-29中存在PPARγ mRNA及蛋白质的表达.MTT结果显示Rosi和15d-PGJ2可抑制HT-29细胞生长,且具有时间、剂量依赖效应.荧光显微镜、TUNEL检测显示PPARγ活化后HT-29细胞出现典型的凋亡现象,10μmol/L Rosi或15d-PGJ2作用48 h后的细胞凋亡率分别为(17.3±1.9)%及(20.8±2.9)%,与对照组(3.86±0.49)%相比差异均具有统计学意义(P＜0.05).FCM结果显示Rosi和15d-PGJ2激活PPARγ后诱导细胞周期阻滞于Go/G1期,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:结肠癌细胞HT 29表达PPARγ,其活化可通过诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,抑制结肠癌细胞增长.因此,PPARγ可能为结肠癌治疗的一个新靶点.
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慢病毒载体介导RNA干扰抑制大肠癌细胞HT29的酪氨酸激酶受体RON基因的表达
目的 研究慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)对大肠癌细胞RON基因的干扰效率,构建RON基因稳定沉默的大肠癌细胞株.方法 应用实时聚合酶链反应(PCR)检测大肠癌细胞DLD-1、HCT116、LOVO、RKO、SW480、HT29的RON mRNA表达情况,筛选出表达丰度能满足RNAi的大肠癌靶细胞HT29.根据人RON基因序列,构建4种慢病毒载体质粒pGCSIL/RON-短发夹RNA(shRNA),转染包装细胞293T,获得4种重组慢病毒pGCSIL/RON-shRNA,分别感染HT29细胞.应用实时PCR检测各组HT29细胞RON mRNA表达情况,筛选出RON干扰效率高的一种shRNA慢病毒载体质粒,构建RON基因稳定沉默的大肠癌细胞株HT29/RON-shRNA.结果 DLD-1、HCT116、RKO、SW480、HT29细胞RON表达丰度能满足RNAi的需要,选择HT29细胞作为RNAi的靶细胞.阴性对照病毒感染的细胞样品相对正常未感染病毒的细胞目的基因的相对表达水平为(94±5)％,RON shRNA-1靶点病毒感染的细胞为(86±5)％,RONshRNA-2靶点病毒感染的细胞为(67±6)％,RONshRNA-3靶点病毒感染的细胞为(63±6)％,RONshRNA-4靶点病毒感染的细胞为(30±8)％,RONshRNA-4靶点病毒感染的细胞的表达水平显著低于其他细胞(P值均＜0.01),其对目的基因的沉默效果达到(70±8)％.结论 慢病毒介导RNAi能显著抑制大肠癌细胞HT29的RON基因的表达,慢病毒载体介导的RNAi是一种高效的“基因沉默”的手段.
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shRNA抑制CD147基因表达对HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响
目的 用RNA干扰(RNAi)技术抑制CD147基因的表达,检测其对人结直肠癌细胞系HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响.方法 设计合成CD147特异性的RNA干扰表达质粒pYr-mir30-shRNA,稳定转染HT29细胞,分别获得HT29/shR-NA-control和HT29/shRNA细胞;RT-PCR和western blot分别检测CD147、MCT1、MCT4 mRNA和蛋白质的表达;明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性;CCK8法分析细胞的增殖能力;Transwell小室检测细胞的侵袭能力;观察结直肠癌裸鼠皮下移植瘤的致瘤能力.结果 与空白组比较,RNA干扰后的细胞中CD147、MCT1 mRNA(F分别为99.645和84.985)及蛋白质(F分别为73.675和19.842)的表达水平均降低(P均＜0.01);MMP-2和MMP-9的活性均降低(P均＜0.01);细胞增殖(t分别为7.491、15.023、14.584、6.637和11.211,P均＜0.01)和侵袭(F=330.443,P＜0.01)能力均降低,使裸鼠荷瘤能力下降(F=365.679,P＜0.01).结论 RNA干扰能有效抑制CD147基因的表达,抑制HT29细胞的增殖和侵袭能力.
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NDRG1基因转染对HT-29人结肠癌细胞株增殖、侵袭和迁移能力的影响
目的 研究NDRG1基因转染对HT-29人结肠癌细胞株体外增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 将重组真核表达质粒pEGFP-NDRG1-N3 和空载体pEGFP-N3采用阳离子脂质体Lipofectamine转染HT-29人结肠癌细胞株,通过荧光倒置显微镜检测绿色荧光蛋白的表达.免疫组织化学染色检测转染前后HT-29细胞NDRG1的表达.并通过多种体外实验(流式细胞术法、24-transwell法、扫描电镜和透射电镜等)研究NDRG1对HT-29人结肠癌细胞株体外增殖、侵袭和迁移能力及表面和超微结构的影响.结果 流式细胞术结果显示,与未转染组和转染pEGFP-N3 空载体组比较,pEGFP-NDRG1-N3组细胞生长周期G0/G1 期比例增高,S 期明显减低,差异有统计学意义( P <0.05).细胞侵袭和迁移实验的结果显示,转染pEGFP-NDRG1-N3 组细胞与空载体和空白对照组比较,穿过微孔膜的细胞数均明显减少,差异有统计学意义( P <0.05).扫描和透射电镜结果显示,转染pEGFP-NDRG1-N3 组HT-29细胞生长增殖受抑制,细胞分化程度有增高趋势.结论 NDRG1基因可明显抑制HT-29人结肠癌细胞的体外增殖活性,降低其侵袭和迁移能力,促进其分化,提示其可作为一种候选的肿瘤转移抑制基因.
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IL-18联合IL-2促进外周血NK细胞杀伤活性和NKG2D表达
目的：观察IL-18与IL-2联合诱导的人外周血NK细胞对结肠癌HT29细胞的杀伤活性及其NKG2D表达，探究IL-18联合IL-2在抗肿瘤免疫中的作用及其机制。方法：IL-18和IL-2体外联合诱导新鲜分离的人PBMCs，流式细胞术分析CD107a阳性NK细胞比率以评估NK细胞对HT29细胞的杀伤活性，同样方法检测活化性受体NKG2D在NK细胞上的表达水平。结果：与单一应用IL-18或IL-2相比，IL-18和IL-2联合应用显著提高了CD107a阳性NK细胞比率，同时两者联合处理组NK细胞表面NKG2D表达水平也相应升高。结论：IL-18联合IL-2增强人外周血NK细胞对结肠癌HT29细胞的杀伤作用，该效应可能与活化性受体NKG2D表达水平上调有关。
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β1整合素反义寡核苷酸对人结肠癌细胞黏附和侵袭抑制作用
目的 研究β1整合素反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌HT-29细胞侵袭的抑制作用.方法 以脂质体为载体将硫代磷酸修饰的β1整合素ASODN及无义寡核苷酸(NSODN)转染人结肠癌HT-29细胞,通过RT-PCR及Western-Blot试验,分别测定ASODN组、NSODN组和空白对照组β1整合素mRNA和蛋白的表达,MTT法和Transwell小室法分别测定其黏附力和侵袭力.结果 与NSODN组和空白对照组相比较,ASODN 组中β1整合素 mRNA 和蛋白表达强度明显降低;ASODN组和NSODN组转染的人结肠癌HT-29细胞侵袭力均下降,但前者下降较为明显.结论β1整合素ASODN转染HT-29细胞后,通过降低其β1整合素mRNA和蛋白表达水平,从而抑制其对细胞外基质的侵袭.
