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用激光扫描共聚焦显微镜观察吗啡成瘾对大鼠海马神经细胞内钙离子的影响
目的为了取得吗啡成瘾对神经细胞内钙离子([Ca2+]i)影响的直接证据,探索吗啡成瘾的神经生物学机制及对吗啡成瘾可能的治疗途径.方法根据新型荧光探针Fluo-3能与活细胞内[Ca2+]i特异性结合后发出荧光的特性,将19只新生SD大鼠随机分成吗啡成瘾组和对照组,给吗啡成瘾组动物腹腔注射吗啡使其成瘾,用Fluo-3荧光探针对两组动物的海马神经细胞分别进行染色,利用激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope, LSCM)技术对两组大鼠的海马神经细胞(主要是锥体细胞)内[Ca2+]i的变化进行了观察研究,并用图像分析技术进行处理.结果吗啡成瘾大鼠海马锥体神经细胞内Ca2+浓度的平均荧光像素是对照组的3.7倍.结论吗啡成瘾可能明显增高大鼠海马锥体神经细胞内Ca2+浓度.
关键词： 激光扫描共聚焦显微镜 吗啡成瘾 海马锥体细胞钙离子 -
电针对大鼠脑缺血6h及再灌注损伤时活体海马[Ca2+]i的实验研究
目的:研究大鼠脑缺血6h时间窗及不同时间再灌注损伤时活体海马片Ca2+的动态变化规律.探讨醒脑开窍针法对神经细胞内Ca2+的调控作用.方法:用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血6h/再灌模型,利用激光共聚焦扫描显微镜技术实时观察大鼠海马CAl区活体脑片中锥体细胞内[Ca2+]i的分布及动态变化.结果:脑缺血6h时大鼠海马CA1区活体脑片中锥体细胞内[Ca2+]i的分布及动态变化.结果:脑缺血6h时大鼠海马CA1区神经元的[Ca2+]i明显升高,再灌注后,神经元内[Ca2+]i随再灌注时间延长而进一步升高,到再灌注6h,达到高峰,此后虽有下降,但仍高于缺血前水平,再灌注24h时又出现第二次钙高峰.结论:在临床脑缺血迟6h有效治疗时间窗内,采取多靶点、多水平、多通道的干预措施,对脑损伤的转归至关重要,阻止缺血半暗区可存活组织发生进一步不可逆损害.针刺对脑缺血/再灌注大鼠的[Ca2+]i超载有明显抑制作用.但对其抑制程度,醒脑开窍针刺组明显优于传统针刺组,从而保护脑缺血/再灌注后继发神经元的损伤,维持钙稳态.
关键词： 电针 醒脑开窍 激光共聚焦扫描显微镜 脑缺血/再灌注 海马锥体细胞钙离子
