首页 > 文献资料
-
玉米赤霉烯酮对细胞间隙连接通讯的影响
目的了解真菌性雌激素玉米赤霉烯酮(ZEA)对细胞间隙连接通讯(GJIC)的影响.方法用荧光漂白后恢复(fluorescence redistribution after photobleaching,FRAP)技术,在激光扫描共聚焦显微镜下观察ZEA对HaCaT细胞GJIC功能的影响.结果ZEA在0.1 μmol/L对HaCaT细胞的GJIC没有明显影响,但在1~100 μmol/L浓度下都有明显的抑制作用.ZEA不能有效地拮抗TPA引起的GJIC抑制.结论ZEA在1 μmol/L以上就能抑制GJIC功能,提示它在一定条件下可能有促癌作用.
关键词: 玉米赤霉烯酮 细胞间隙连接通讯 激光扫描共聚焦显微镜 -
激光扫描共聚焦显微镜的选型评估
本文对激光扫描共聚焦显微镜的构成、工作原理及市场竞争环境进行了说明,并根据经验对该类型设备的选型评估方法提出自己的见解.
关键词: 激光扫描共聚焦显微镜 医疗设备选型 医用显微镜 -
激光扫描共聚焦显微镜的使用及维护
激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal micro-scope,LSCM)简称共聚焦显微镜,普遍用于荧光成像和细胞分析,它成像清晰、放大倍数大、分辨率高,是生物医学领域中强有力的研究工具[1-2]。本研究以日本的 Olympus FV1000为例,介绍激光共聚焦的基本使用及日常维护。
关键词: 激光扫描共聚焦显微镜 荧光 Olympus FV1000 -
激光扫描共聚焦显微镜在细胞凋亡检测中的应用
激光扫描共聚焦显微镜是先进的图像分析仪器之一.本文主要介绍几种应用激光扫描共聚焦显微镜进行细胞凋亡的常用方法.
关键词: 激光扫描共聚焦显微镜 细胞凋亡 检测 -
激光扫描共聚焦显微镜技术在针灸形态学研究中的应用
激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)应用于针灸形态学方面的研究已经有20多年,并成为从组织学角度探讨腧穴结构和针灸效应的重要工具之一.借助于LSCM的技术优势,针灸形态学研究水平得到进一步提升,使我们对腧穴和经络相关的组织结构以及针灸引起的组织化学变化有了更加深入的了解.为了让LSCM在针灸形态学研究方面更有效地发挥作用,本文将对以往有关方面的研究成果进行全面的梳理,同时结合自己的实际经验在技术层面上给出具体建议.期待LSCM技术能够被整合到更多的针灸实验研究中,为揭示针灸的作用机制提供更有力的形态学依据.
关键词: 激光扫描共聚焦显微镜 针灸 形态学 可视化 -
潜阳封髓丹加味治疗虚阳上浮型玫瑰痤疮疗效观察
目的:评价潜阳封髓丹加味治疗虚阳上浮型玫瑰痤疮的疗效.方法:采用随机对照的方法,将84例研究对象随机分入治疗组和对照组,分别给予潜阳封髓丹、盐酸多西环素片口服.治疗8周后比较临床疗效及激光扫描共聚焦显微镜检测结果.结果:治疗8周后,治疗组显效率为90.48%,对照组显效率为66.67%.两组患者治疗后红斑、灼热程度评分显著性降低,激光扫描共聚焦显微镜检测显示棘层灶状水肿评分及真皮乳头炎性细胞浸润评分较治疗前显著降低,且治疗组疗效优于对照组,以上比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:潜阳封髓丹加味温肾潜阳、活血消肿,可有效改善红斑、灼热以及棘层灶状水肿,是治疗虚阳上浮型玫瑰痤疮的有效方药之一,临床值得推广.
关键词: 玫瑰痤疮 虚阳上浮 潜阳封髓丹 激光扫描共聚焦显微镜 -
抗纤Ⅰ号复方药物血清对肝星状细胞内钙离子浓度的影响
目的:研究抗纤Ⅰ号方药防治肝纤维化的分子机制,并探讨该药预防、治疗门脉高压的可行性.方法:制备大鼠含抗纤Ⅰ号药物血清,分别用药物血清和四氯化碳(CCl4)处理大鼠肝星状细胞(HSCs),作用24h后,以Fluo-3AM为细胞内Ca2+荧光指示剂负载细胞,通过激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+的变化.采用正交设计方法,研究不同浓度CCl4、抗纤Ⅰ号方药物血清及其作用的先后顺序和二者作用的时间间隔对肝星状细胞内Ca2+浓度的影响.结果:不同浓度抗纤Ⅰ号方药物血清、CCl4及其作用的前后顺序对细胞内Ca2+浓度有显著影响,两因素作用的时间间隔对结果影响无显著性.CCl4在5mmol/L~15mmol/L范围内显著增加HSC内Ca2+浓度,5%~20%抗纤Ⅰ号方药物血清明显降低Ca2+浓度.结论:抗纤Ⅰ号方药物具有防治肝纤维化和门脉高压作用,其机理可能与其缓解细胞内钙超载有关.
关键词: 抗纤Ⅰ号方 肝星状细胞:钙离子 激光扫描共聚焦显微镜 -
激光共聚焦显微镜在肿瘤治疗研究中的应用
激光扫描共聚焦显微镜是一种新的分子细胞生物学分析仪器,因其能迅速、直观、定量的检测到细胞内部微细结构的荧光图像,已经广泛应用于肿瘤的相关研究中.本文综述了对激光共聚焦显微镜在肿瘤的治疗中的应用进展.
关键词: 激光扫描共聚焦显微镜 肿瘤 治疗 -
肥大细胞类过敏反应脱颗粒的实时动态检测方法
目的 建立实时、动态、直接的肥大细胞脱颗粒光学成像检测方法.方法 将囊泡表面特异性分子CD63与绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的基因融合后,通过质粒转染入细胞中,建立稳定表达CD63-GFP蛋白的鼠肥大细胞株(RBL-2H3细胞).之后利用激光扫描共聚焦显微镜及全内反射显微镜分别观察细胞内囊泡在过敏原刺激下脱颗粒时的运动状况.结果 成功建立稳定表达CID63-GFP的RBL-2H3细胞株;在类过敏原的刺激下,用激光扫描共聚焦显微镜观察到了细胞脱颗粒过程中,细胞内囊泡向细胞外脱出的过程,同时,用全内反射显微镜观察到了细胞内囊泡与细胞膜融合的过程.结论 本研究在活细胞状态下,实时、直观、灵敏、快速地观察到肥大细胞脱颗粒的过程,直接评估过敏原刺激肥大细胞脱颗粒的特性,为类过敏反应的检测提供了新的检测手段.
关键词: 肥大细胞 脱颗粒 类过敏反应 激光扫描共聚焦显微镜 全内反射显微镜 -
生脉散皂苷部位对大鼠培养心肌细胞内游离钙的调节作用
目的:研究生脉散皂苷部位对培养的大鼠单个心肌细胞内Ca2+浓度的影响.方法:以Fluo-3AM负载心肌细胞,采用激光扫描共聚焦显微镜检测单个细胞内Ca2+浓度的变化.结果:生脉散皂苷部位10μg/ml可明显增加心肌细胞内Ca2+浓度,并使其维持在高水平(P<0.01),随后加入高Ca2+和高K+对细胞内Ca2+浓度无明显影响.生脉散皂苷部位100μg/ml诱导心肌细胞内Ca2+浓度迅速明显增加后又迅速下降至静息水平(P<0.01),外加高Ca2+和高K+不能刺激细胞内Ca2+浓度明显增加.结论:生脉散皂苷部位对心肌细胞内Ca2+浓度变化的影响与其浓度有关.
关键词: 生脉散皂苷部位 心肌细胞 钙离子 激光扫描共聚焦显微镜 -
激光扫描共聚焦显微技术在中医药研究中的应用
激光扫描共聚焦显微镜(Laster Scanning Confocal Microscopy, LSCM)是上世纪80年代发展起来的一项具有划时代意义的高科技新产品,是当今世界上先进的分子细胞生物学分析仪器之一.它是在普遍荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置,并利用计算机的图象处理技术,使用紫外或可见激光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部细微结构的荧光图象.它采用了能达到高分辨率及重复性的无色差扫描技术,克服了普通偏轴镜扫描因色差造成的低分辨率的弱点,改进了定量采样时重复性差等缺点,从而不仅提高了光学成像的分辨率,而且能产生真正具有三维清晰度的图象,同时可在亚细胞水平上观察诸如Ca2+、pH值和膜电位等生理信号及细胞形态的实时动态变化,成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的研究工具(1).近几年来,激光扫描共聚焦显微技术这一先进的检测手段被引入中医药研究领域,并取得了有价值的研究成果,为中医药研究的现代化创造了条件.现将激光共聚焦显微镜技术在中医药研究中的应用情况汇总如下.
-
激光扫描共聚焦显微镜研究APOBEC3G蛋白的亚细胞定位
采用RT-PCR技术,从HIV的非允许性H9细胞中获得载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3G(APOBEC3G)的全长cDNA.APOBEC3G cDNA全长1 155nt,编码384个氨基酸.将APOBEC3G克隆到真核表达载体pEGFP-C3上,转染CD4+ HeLa细胞,激光扫描共聚焦显微镜下可观察到表达的GFP-APOBEC3G融合蛋白定位于细胞质.
-
探索双重荧光染色并利用两种不同显微镜在Hep-2细胞上观察抗核抗体荧光模式的临床价值
目的 探索荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜以及双重荧光染色法在Hep-2细胞上观察抗核抗体荧光模式的临床价值.方法 选取临床上抗核抗体呈阳性的血清样本结合到抗原片上,先后用异硫氰酸荧光素(FITC)和4 ',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)两种荧光染料孵育,之后在两种不同的显微镜下观察.结果 FITC荧光出现的部位是抗原抗体结合处,DAPI荧光出现的部位为细胞核,当通过DAPI荧光对细胞核定位后,可使得FITC的荧光模式更易于观察.本实验通过利用两种荧光标记的方法在两种显微镜上分别观察了斑点型、均质型、着丝点型、核点型、核膜型、胞浆颗粒型——抗高尔基体抗体.结论 综合各种因素,利用双荧光染色法染色,并在激光扫描共聚焦显微镜下观察,对于在Hep-2细胞上观察抗核抗体荧光模式具临床价值.
关键词: 激光扫描共聚焦显微镜 荧光显微镜 抗核抗体 -
热休克蛋白在涎腺肿瘤中的表达
P<0.01),同时HSP70、HSP86(90α)在恶性肿瘤中的表达显著增加,尤其HSP70/HSP86(90α)在恶性肿瘤中双阳性表达率高达100%(Fisher's exact P<0.05).结论 (1)HSPs共同参与了涎腺肿瘤的发生,但存在表达种类和率的差异.(2)HSP27表达减弱可能是涎腺肿瘤分化降低的标志.(3)HSP70、HSP90,尤其HSP86(90α)可能通过致瘤顾客蛋白的持续活化促使恶性肿瘤发生发展,以HSP86(90α)为主的Hsp90可能是涎腺恶性肿瘤治疗的靶点.
关键词: 涎腺肿瘤 热休克蛋白 免疫组化 免疫荧光双标记 激光扫描共聚焦显微镜 -
双氢麦角毒碱对血管性痴呆小鼠海马神经细胞[Ca2+]i的影响
血管性痴呆(vascular dementia,VD)出现学习和记忆智能障碍的确切发病机制尚不十分清楚,但由于生理浓度的Ca2+作为神经细胞内第二信使,参与了学习和记忆过程.本文利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察了该病小鼠海马神经细胞[Ca2+];变化特征,以及双氢麦角毒大碱的影响.
-
2.126芍药甙对胃肠平滑肌细胞动力的影响及其信号转导途径的研究
目的探讨芍药甙对胃肠平滑肌细胞的作用及其发挥作用的机制和信号转导途径.方法采用平滑肌细胞长度测定和激光扫描共聚焦显微镜细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)测定技术,观测芍药甙对胃肠平滑肌细胞的平均长度的变化;选择性PKA抑制剂和选择性PKG抑制剂对芍药甙舒张平滑肌细胞作用以及[Ca2+]i的影响;一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂对芍药甙舒张平滑肌细胞作用的影响.
-
大鼠三叉神经脊束间质核内内脏神经初级传入终末与NOS阳性投射神经元的联系
目的探查间质核(INV)内内脏传入终末与向臂旁核(PBN)投射的NOS阳性神经元之间的联系.方法逆行、跨神经节追踪以及免疫荧光组织化学方法,结合激光共聚焦扫描显微镜观察.结果PBN内注射四甲基罗丹明(TMR)后,逆行标记细胞主要位于注射侧的INV,大多属20μm以下的中、小型细胞.NOS阳性细胞与TMR逆行标记细胞分布区域重叠.NOS/TMR双标记细胞分别占NOS阳性细胞总数的54.8%(17/31)和TMR逆行标记细胞总数的34%(17/49).舌咽和迷走神经内注射生物素化葡聚糖胺(BDA)跨神经节标记的内脏神经初级传入终末点状膨体贴近双标记细胞胞体,呈紧密接触状.结论可能存在经INV向PBN投射的内脏伤害性信息传导通路,作为神经递质和神经信息分子的NO可能参与其内脏伤害性信息的传递和调控.
-
利用激光扫描共聚焦显微镜实时监测体外诱导分化的人骨髓间充质干细胞内游离Ca2+浓度动态变化
目的 利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)实时监测由人骨髓间充质干细胞(hMSC)诱导分化的心肌样细胞内游离Ca2+浓度的动态变化.方法 体外分离培养hMSC,5-氮胞苷诱导向心肌样细胞分化.分别以体外分离培养的原代搏动的出生2 d SD大鼠乳鼠心肌细胞(CM)和同代次的hMSC为阳性对照和阴性对照.Fluo-3/AM荧光探针分别标记hMSC、由hMSC诱导的心肌样细胞及CM,利用LSCM实时监测单细胞内Ca2+动态变化的优势,观察加入心脏正性肌力药物后的细胞反应及细胞内Ca2+水平的动态变化.结果 静息状态下(给药前),搏动的CM荧光强度有变化,而hMSC及心肌样细胞Ca2+的荧光强度保持在稳定的波动水平内,两者差异无统计学意义.给药后,hMSC的Ca2+离子流没有改变,与静息状态下趋于一致;而心肌样细胞则表现出一个明显的Ca2+离子流,且下降后细胞内Ca2+水平明显高于加药前静息钙水平,其Ca2+离子流的表现趋势与搏动的CM基本一致.比较给药后hMSC与心肌样细胞的Ca2+荧光强度落差值,差异具有统计学意义(64.04 ±22.68比180.75 ±34.04,P<0.01).结论 hMSC经5-氮胞苷诱导后,在电学特性方面具有向CM分化的趋势,心肌样细胞与CM具有某些相同的电生理特性.
-
陡脉冲电场对体外人肝癌细胞内钙离子浓度的影响
为研究陡脉冲电场的凋亡效应,以人肝癌细胞系为实验对象,采用激光扫描共聚焦显微镜观察陡脉冲电场作用下细胞内钙离子浓度的变化,采用流式细胞术Annexin V检测陡脉冲电场诱导细胞凋亡.结果发现,陡脉冲电场能使肝癌细胞内钙离子浓度发生变化,变化的程度与陡脉冲电场的参数和胞外是否有钙有关,使得细胞内钙离子浓度稳态失调或大幅度振荡;流式细胞检测结果证实了陡脉冲电场能有效诱导肝癌细胞凋亡(与对照组比较,P<0.01),并且较低的电压峰值、较宽的脉冲宽度(200V/1.3μs)比较高的电压峰值、较窄的脉冲宽度(600V/100ns)能更有效地(P<0.01)诱导肝癌细胞凋亡.实验结果为陡脉冲杀伤肿瘤细胞的机制和参数选择提供了依据.
关键词: 陡脉冲电场 细胞凋亡 细胞内钙离子浓度 流式细胞术 激光扫描共聚焦显微镜 -
海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(ACA)微胶囊的蛋白质通透性研究
本研究用激光共聚焦扫描显微镜CLSM观察荧光标记蛋白在微胶珠/囊上的吸附和渗透现象.考察了微胶囊类型、海藻酸钠粘度和壳聚糖分子量对微胶珠/囊通透性的影响.结果表明,蛋白质在膜上是先吸附后渗透的过程;AC膜具有不对称性;不同类型微胶珠/囊的通透性依次为海藻酸钠(A)微胶珠>海藻酸钠-壳聚糖(AC)微胶囊>海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(ACA)微胶囊;海藻酸钠粘度越高,壳聚糖分子量越大,微胶珠/囊的通透性越低.为制备低通透率即具有较好酶屏障功能的ACA蛋白质口服控释载体提供了直观的实验依据.
关键词: 微胶囊 蛋白质 通透性 激光扫描共聚焦显微镜