088 细胞因子与细胞间隙连接通讯

细胞间隙连接通讯(GJIC)在细胞增殖、分化及肿瘤发生的过程中起重要作用。本文综述了与矽肺发病相关的细胞因子(包括TGF-β、PDGF、VEGF、EGF、FGF、HGF、TNF、IL-6等)对GJIC功能的影响，以及产生这种影响的分子机制的研究进展。

玉米赤霉烯酮对细胞间隙连接通讯的影响

目的了解真菌性雌激素玉米赤霉烯酮(ZEA)对细胞间隙连接通讯(GJIC)的影响.方法用荧光漂白后恢复(fluorescence redistribution after photobleaching,FRAP)技术,在激光扫描共聚焦显微镜下观察ZEA对HaCaT细胞GJIC功能的影响.结果ZEA在0.1 μmol/L对HaCaT细胞的GJIC没有明显影响,但在1～100 μmol/L浓度下都有明显的抑制作用.ZEA不能有效地拮抗TPA引起的GJIC抑制.结论ZEA在1 μmol/L以上就能抑制GJIC功能,提示它在一定条件下可能有促癌作用.

细胞间隙连接通讯与肿瘤关系的研究进展

细胞间隙连接通讯(gap junctional intercellular communication, GJIC)是细胞间一种普遍的通讯方式,传递生长抑制和(或)增殖信号,在调节细胞的生长、分化及凋亡中起重要作用.肿瘤是一种增殖失控和分化紊乱的疾病,自从发现肿瘤细胞间的电偶联丧失以来,许多学者相继发现肿瘤和转化细胞普遍存在细胞间隙连接通讯缺陷、间隙连接蛋白基因表达异常的现象,说明GJIC与肿瘤的发生和发展过程有密切关系.

甲基丙烯酸环氧丙酯对细胞间隙连接通讯的影响

为探讨甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导细胞转化的机理,选用划痕染料示踪技术(SLDT)初步研究了GMA对人胚肺成纤维细胞间隙连接通讯(GJIC)的影响.用0.5、2.5和5.0mg/L的GMA给细胞染毒12h,经划痕导入荧光黄染料并测定各组细胞中该荧光染料向其相邻细胞扩散的程度.结果表明,在染毒剂量及时间范围内,GMA对人胚肺成纤维细胞GJIC产生较强的抑制作用,呈良好的剂量-效应关系.其中,2.5和5.0mg/L剂量组细胞的GJIC明显降低.结果提示GMA对细胞间隙通讯的抑制作用可能是其导致细胞恶性转化的重要机制之一.

细胞间隙连接通讯与癌变关系的研究进展

细胞间隙连接通讯(gap iunctional intercellular communication,GJIC)是目前已知的相邻细胞间直接交流胞质的惟一膜通道结构.它广泛存在于哺乳动物组织和细胞中,在胚胎发育、细胞增殖分化的调控及维持内环境平衡等方面起重要作用.近几十年来,国内外学者对GJIC与癌变的关系进行了大量的研究,认为GJIC可能是癌变发生的重要机制之一.笔者就GJIC与癌变的关系作一综述.

细胞间隙连接通讯及其通路蛋白与大肠癌发生关系的研究进展

细胞间隙连接通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)是多细胞生物体内普遍存在的一种通讯方式,他参与离子和其他小分子信号物质的转运.GJIC对细胞的生长、增殖和分化起重要的调控作用,他的改变与肿瘤的发生密切相关.大肠癌是人类常见的恶性肿瘤之一,目前研究表明,大肠癌的发生是一个多步骤、多基因、多阶段的过程,包括癌基因激活、抑癌基因失活、DNA转录表达失控、DNA损伤等.不论何种原因的细胞转化,其终表现为细胞周期失控、细胞无限增殖.本文就GJIC及其通路蛋白、细胞因子与大肠癌的发生的研究进展作一综述.

缺血再灌注对心肌细胞间隙连接通讯影响的研究

雌激素对间隙连接蛋白43表达调控机制的研究进展

间隙连接(gap junction, GJ)是哺乳动物细胞间普遍存在的一种信号传导方式，它存在于除血液细胞和骨骼肌细胞以外的所有细胞、组织中，其在胚胎发育、可兴奋细胞同步收缩、组织稳态及细胞生长、分化中发挥重要作用。雌激素可在转录、翻译后多个水平上调节靶器官中间隙连接的组成亚单位--间隙连接蛋白(connexin, Cx)的表达及磷酸化状态而影响细胞间隙连接通讯(gap junctional intracellular communica-tion，GJIC)，进而调节组织细胞群的信号传递及功能活动。本文重点关注近年来关于雌激素对间隙连接蛋白43（Cx43）表达调节的基因组及非基因组机制方面的研究。

连接蛋白基因Cx43抑制胶质瘤细胞增殖及其机理的初步探讨

目的探讨连接蛋白基因Cx43对胶质瘤细胞增殖的抑制及其可能的机理.方法将含Cx43cDNA的质粒以脂质体介导转染Cx43表达缺失的人和鼠的恶性胶质瘤细胞,通过Northern杂交、原位杂交及免疫组化染色检测Cx43mRNA及蛋白表达;MTT法测定细胞增殖率;核仁组成区嗜银蛋白染色检测细胞增殖活性;TUNEL法检测细胞凋亡;划痕标记荧光染料示踪技术检测细胞间隙连接通讯(GJIC);Western杂交及免疫组化染色检测bFGF、PDGF、EGFR、IGF-Ⅰ和IGFBP3的表达. 结果转染Cx43基因的胶质瘤细胞增殖下降,GJIC恢复,同时伴有bFGF、PDGF、IGF-Ⅰ和IGFBP3表达下降,而EGFR表达和细胞凋亡则无改变.结论 Cx43基因可能通过恢复GJIC功能及抑制某些重要生长因子的自分泌,实现对胶质瘤细胞增殖的抑制.

复方藤梨根制剂对荷人肺巨细胞癌裸鼠移植瘤生长及Cx43基因表达水平的影响

细胞间隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)是细胞间的一种重要连接方式,在细胞分化、生长控制和维持体内环境平衡等方面起重要作用.近年来研究表明,肿瘤和转化细胞中普遍存在GJIC的缺陷,GJIC在肿瘤的发生及转移过程中有着极为重要的作用.间隙连接蛋白是由许多同源性基因编码的多基因家族,它们的表达和分布异常与肿瘤的形成关系密切.在近的一些实验中,人们把野生型连接蛋白(connexin,Cx)基因转染到肿瘤细胞中,可见肿瘤的生长受到明显抑制,间隙连接通讯功能上调,细胞恢复正常生长,认为连接蛋白基因是一类肿瘤抑制基因家族[1].Cx43是一种主要的细胞间隙连接蛋白,在多种肿瘤细胞中都有Cx43表达的下降.为此,许多学者正在研究上调Cx43表达的药物,以此来实现其抑制肿瘤生长、分化、转移等作用.目前,对环磷酸腺苷(cAMP)、维甲酸、β-胡萝卜素上调Cx43表达的研究较多,中药提取物如姜黄素类似物、茶多酚等上调Cx43表达的研究已有报道.我们在体内观察复方藤梨根制剂(FFTLG)对荷人肺巨细胞癌(PG)裸鼠移植瘤的生长和瘤体组织Cx43表达的影响,并进一步探讨其作用机制.

转染连接蛋白基因对人脑胶质瘤细胞间隙连接通讯及其生长变化的研究

目的研究连接蛋白(Cx)基因对人脑胶质瘤细胞的细胞间隙连接通讯(GJIC)及其增殖的抑制作用,探索以Cx43基因治疗胶质瘤的可行性.方法将含Cx43cDNA的质粒,以脂质体介导转染Cx43表达缺失的TJ905人胶质母细胞瘤细胞,通过Northern印迹杂交、原位杂交及免疫组化染色检测Cx43mRNA及蛋白表达,划痕标记荧光染料示踪技术(SLDT)检测GJIC,MTT法测定细胞增殖率,核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)染色检测细胞增殖活性,TUNEL法检测细胞凋亡.结果转染后TJ905细胞有不同程度的Cx43mRNA和蛋白表达及GJIC恢复.Cx43表达水平高的克隆细胞增殖明显下降,细胞凋亡并未增加.结论 Cx43基因及GJIC在恶性胶质瘤的发生发展过程中起重要作用,可能成为恶性胶质瘤基因治疗的优选靶的之一.

复方藤梨根制剂上调PG细胞间隙连接通讯功能的研究

目的:探讨复方藤梨根制剂对高转移性人肺癌细胞(PG)的生长及细胞间隙连接通讯功能的影响.方法:采用MTT法体外观察不同浓度复方藤梨根制剂对PG细胞的杀伤作用;应用激光共聚焦显微镜检测用药后细胞间隙连接通讯功能(GJIC)的变化.结果:4个浓度的复方藤梨根制剂对pG细胞均有杀伤作用,呈剂量依赖关系.与空白对照组相比,一定浓度的复方藤梨根制剂能上调GJIC.结论:复方藤梨根制对PG细胞具有生长抑制作用,其机制可能与上调细胞间隙连接通讯功能有关.

细胞间隙连接通讯、连接蛋白与肿瘤的抑制

细胞间隙连接通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)是多细胞生物体内普遍存在的一种通讯方式,在肿瘤的发生、发展和组织自身稳定的维持中具有重要作用.近年的研究显示,肿瘤和转化细胞中普遍存在GJIC的缺陷.本文通过对GJIC的生物学特性及GJIC、连接蛋白基因家族抑瘤作用的文献回顾,旨在探讨细胞间隙连接通讯、连接蛋白在肿瘤抑制中的重要作用.

茶多酚对高转移性人肺癌细胞间隙连接通讯功能的上调研究

应用MTT法体外观察不同浓度茶多酚对PG细胞的杀伤作用,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测用药后PG细胞内Ca2+浓度、细胞间隙连接通讯(GJIC)、Cx43表达和细胞增殖周期分布的变化.结果显示,4个浓度的茶多酚对PG细胞均有杀伤作用,呈剂量依赖关系.细胞增殖受到明显抑制,使细胞阻滞于G0/G1期,不能进入S期及G2/M期,细胞增殖指数明显下降.与对照组相比,随着茶多酚浓度的增加,细胞内Ca2+浓度、GJIC和Cx43表达水平逐渐上升.提示茶多酚对PG细胞具有生长抑制作用,其机制可能与上调细胞间隙连接通讯功能有关.

双环醇拮抗DDT引起的细胞间隙连接通讯功能抑制研究

目的 研究治肝炎药物双环醇对促癌剂滴滴涕(DDT)引起细胞间隙连接通讯(GJIC)功能抑制的拮抗作用及作用机制.方法 划痕标记染料示踪技术直接观察DDT引起的大鼠肝上皮WB-F344细胞GJIC功能抑制并分析双环醇的作用.利用Western blot方法检测间隙连接蛋白43(Cx43)、磷酸化Cx43、E-cadherin及β-Catenin的表达和活性.细胞免疫荧光技术考察WB-F344细胞Cx43蛋白亚细胞定位、间隙连接的形成及E-cadherin和β-Catenin在细胞内的表达.结果 DDT能剂量依赖性的抑制WB-F344细胞GJIC功能,20μM浓度时小分子荧光染料Lucifer yellow CH仅能从伤沿细胞向后传递1-2列细胞.双环醇能部分恢复DDT引起的GJIC功能抑制,且具有一定剂量依赖关系,其作用机制与抑制DDT引起的磷酸化Cx43蛋白表达量升高,进而恢复DDT损伤的间隙连接形成有关.DDT和双环醇对与Cx43蛋白功能密切相关的E-cadherin及β-Catenin的表达、活性及细胞内定位均无明显影响.结论 双环醇能通过影响Cx43蛋白的磷酸化水平,部分恢复环境促癌剂DDT引起的WB-F344细胞间隙连接的形成,改善GJIC功能.对GJIC的功能抑制是多种促癌剂诱发肿瘤发生的重要原因,前期研究显示双环醇具预防二甲基亚硝胺/苯巴比妥诱发肝癌发生的作用,本文研究结果进一步提示,双环醇在预防杀虫剂DDT(一种主要的环境致癌物)诱发的肿瘤方面亦具有一定潜能.

皮肤瘢痕癌与细胞间隙连接通讯的研究现状

皮肤瘢痕癌是指发生于各种原因所致的皮肤瘢痕基础上的癌变.皮肤瘢痕的癌变率为 1%～2%,癌变潜伏期为3个月至数年,组织学类型以鳞状细胞癌为主,预后较差,发病机制目前还不甚明确.细胞间隙连接通讯(GJIC)是细胞间的一种重要连接方式,肿瘤和转化细胞普遍存在GJIC的缺陷.皮肤瘢痕癌变的分子机制研究以及它与GJIC的相关性目前是肿瘤研究领域的新课题.

间隙连接基因Cx32在肝细胞癌中的表达意义

目的:探讨肝细胞癌(HCC)、癌旁组织及正常肝组织中细胞间隙连接Cx32mRNA与Cx32蛋白的表达及其在HCC发生中的意义和机制.方法:应用Western blot和RT-PCR分别检测Cx32蛋白和Cx32mRNA在26例HCC组织、22例癌旁组织和9例正常肝组织中的表达.结果:Cx32蛋白在HCC中的表达明显低于正常肝组织和癌旁肝组织(P＜0.01);Cx32mRNA在HCC、癌旁肝组织和正常肝组织均有一定水平,但三者之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:Cx32蛋白在肝癌中的表达下调可能是肝癌发生的重要环节,Cx32蛋白的减少与该基因在翻译或蛋白质的加工修饰过程中调控异常有关.

GJIC与中枢神经系统疾病的研究

中枢神经系统的结构和功能虽然极具独特性，但其细胞和组织的基本特性与其他部位也是大同小异的，比如说细胞间缝隙连接（gap junction intercellular，GJ），而作为一种通讯方式细胞间隙连接通讯（gap junction intercellular communication，GJIC）普遍存在于多细胞生物体内，该研究在中外已经成为了炙手可热的研究对象，指明了很多疾病可能的发病和治疗机制，尤其是在中枢神经系统疾病方面，本文针对GJIC在中枢神经系统相关疾病发病机制中所起的作用作简要综述。

庚醇/甘草次酸对大鼠心肌缺氧复氧再灌注细胞凋亡的影响

目的:研究细胞间隙连接通讯(GJIC)抑制剂庚醇/甘草次酸可否减少大鼠心肌缺氧复氧再灌注诱发的心肌细胞凋亡,探讨心肌GJIC在心肌细胞凋亡中的作用.方法:制作Langendorf心脏灌流模型,随机分为正常灌注(SO)组、缺氧复氧再灌注(IR)组、缺氧复氧再灌注庚醇(HT)组和缺氧复氧再灌注甘草次酸(GA)组.于整体缺氧30min再灌注2h末测定心肌梗死面积.应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术检测心肌细胞凋亡;于整体缺氧30min末用改良的划痕标记染料示踪技术测定心肌GJIC.结果:与SO组相比,IR组心肌梗死面积和凋亡细胞数明显增加,但GJIC无明显变化.与IR组比较,HT组和GA组心肌梗死面积和凋亡细胞数显著减少,伴GJIC明显受抑.结论:缺氧复氧再灌注所诱发的心肌细胞凋亡与心肌GJIC密切相关,GJIC抑制剂庚醇/甘草次酸可减少心肌细胞凋亡,进而防止心肌缺氧复氧再灌注损伤.

甲基对硫磷对小鼠黄体细胞的细胞间隙连接通讯和孕酮分泌的影响

目的 探索甲基对硫磷(methyl parathion,MP)对小鼠黄体细胞的细胞间隙连接通讯(gapjunctional intercellularcommunication,GJIC)和孕酮分泌的影响.方法 体外培养5周龄SPF级BALB/c小鼠黄体细胞,分别设MP暴露组(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mmol/L的MP处理3h)和GJIC促进剂——1 μmol/L异丙肾上腺素预处理组及蛋白激酶A(PKA)专一抑制剂——10 μmol/L H89预处理组与蛋白激酶C(PKC)专一抑制剂——10 μmol/L恩扎妥林预处理组(预处理5 min,0.8 mmol/L MP处理3h).采用ELISA法检测培养液中孕酮含量,划痕标记染料转移法测定贴壁细胞的GJIC.结果 高浓度(0.2～1.6 mmol/L)MP可明显抑制小鼠黄体细胞的GJIC和孕酮分泌(P＜0.05);异丙肾上腺素、H89和恩扎妥林均能缓解MP对体外小鼠黄体细胞的GJIC和孕酮分泌的抑制作用(P＜0.05).结论 MP可通过抑制小鼠黄体细胞的GJIC导致孕酮分泌受抑制,而PKA与PKC参与该过程.