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肿瘤特异性成像中分子探针验证模型的建立及评估
目的 建立同一个体裸鼠肿瘤受体阳性和阴性双瘤动物模型.方法 选取SSTR2阳性表达细胞系人BEL-7402细胞系和SSTR2阴性表达细胞系人A549细胞系,进行细胞培养,选取对数生长期细胞,消化和悬浮后,分别移植到同一裸鼠各一侧腋窝(移植细胞悬液浓度在5×106个/0.2 mL/侧以上),制作皮下移植瘤双瘤模型,观察成瘤效果,对成瘤效果进行分析和总结.结果 成功进行了2种细胞的细胞培养,采用腋窝作为注射部位,成功制造了BEL-7402/A549双瘤模型.其中BEL-7402成瘤率在80%以上(24/30),接种细胞的量足够即可很好地成瘤;A549细胞浓度在5×106个/0.2 mL以上成瘤率略低,约73%(22/30),增加细胞数量和补充注射可以部分提高成瘤率.终双侧成瘤大小相差在1 cm以内的占32%(8/22).组织学检查显示,与裸鼠正常肝脏相比,裸鼠肝脏移植肿瘤明显呈恶性形态,细胞核大,多见病理性核分裂像,双核或多核多见;肿瘤组织可见明显坏死区和大量血管分布,提示生长迅速和微血管较多.A549移植瘤和BEL-7402移植瘤大体形态不同,但微观形态同BEL-7402一样,与人肿瘤形态一致.结论 同一裸鼠个体可以成功接种不同肿瘤,掌握好两种肿瘤的生长差别,可以制作出大小相差在允许范围的合适的双瘤模型,为肿瘤特异性成像奠定基础.
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藏红花素对K562细胞株及裸鼠移植瘤的抑制作用的研究
目的 探讨藏红花素对K562细胞株及裸鼠移植瘤的作用.方法 利用MTT法检测不同浓度藏红花素对K562细胞的增殖抑制影响;Annexin V FITC标记法检测K562细胞凋亡;建立K562细胞Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,荷瘤小鼠随机分成4组,分别用10、50、100 mmol/L浓度的藏红花素和生理盐水对瘤体进行局部注射,每次0.1 ml,隔日1次,连续7次,观察瘤体变化.结果 不同浓度藏红花素对K562细胞均有抑制作用,呈明显的剂量依赖性,抑制率分别为21.5%、55.1%、81.6% (P＜0.05);浓度为0.003 2 mol/L的藏红花素诱导K562细胞凋亡作用显著,浓度为6.4 mmol/L的藏红花素使K562细胞呈中毒反应,凋亡作用不明显;藏红花素组瘤体生长较对照组明显受到抑制,不同浓度的藏红花素抑瘤率分别为18.5%、79.2%、91.6%.结论 藏红花素具有显著抑制K562细胞增殖及促凋亡的作用,能有效抑制K562细胞Balb/c裸鼠移植瘤的生长.
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金龙胶囊对荷人肺腺癌 A549裸鼠皮下移植瘤生长的影响
目的：探讨金龙胶囊对肺腺癌A549移植瘤生长的抑制作用。方法建立裸鼠移植瘤模型，随机分成阴性对照组（ A组）、单药金龙胶囊组（B组）、单药顺铂组（C组）和联合用药组（D组）4组，连续用药4周。观察肿瘤生长情况，计算抑瘤率；免疫组化法检测移植瘤微血管密度（microvessel density，MVD）；RT-PCR分析各组治疗后VEGF及凋亡基因Bcl-2mRNA表达情况。结果与阴性对照组比较，金龙胶囊治疗组（ B、D组）抑瘤率分别为26.94％、51.61％，联合用药组（ D组）效果佳。治疗组微血管密度分别为18.83±0.75、14.17±0.75，联合用药组为显著，而单药顺铂组与对照组在抑瘤率和微血管密度表达上均无差异（ P＞0.05）。金龙胶囊治疗组（B、D组）Bcl-2mRNA表达较对照组有显著差异（P＜0.001），但两组之间无差异（P＝0.369）；四组之间在VEGFmRNA表达上无明显差异（ P＞0.05）。结论金龙胶囊对荷A549裸鼠移植瘤有抑制作用，联合顺铂用药有显著协同作用，其作用机制可能与抑制肿瘤微血管形成、诱导细胞凋亡增加有关。
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青蒿琥酯对腺样囊性癌NACC细胞裸鼠移植瘤抑制效果的研究
目的:观察青蒿琥酯(ART)对腺样囊性癌裸鼠移植瘤的治疗效果,并探讨其作用机制.方法:裸鼠背部皮下接种涎腺腺样囊性癌NACC细胞系,建立移植瘤模型,接种7天后始见成瘤时,随机将动物分为5组,即生理盐水对照组、ART 50.0 mg·kg-1组、ART 100.0 mg·kg-1组、ART 200.0 mg·kg-1组、DDP 2.0 mg·kg-1组.每组5只,隔天给药,称裸鼠体重,给药8次后取瘤称重,采用免疫组化法、Western blot法检测Bcl-2,ERK2,VEGF的表达.结果:ART 200.0 mg·kg-1组以及DDP 2.0 mg·kg-1组移植瘤瘤重较生理盐水对照组明显减轻(P<0.05).ART 200.0 mg·kg-1组与DDP 2.0 mg·kg-1组相比,抑瘤效果无显著性差异(P>0.05).DDP 2.0 mg·kg-1组体重减轻明显,极度瘦弱,其余各组体重及生活状态无明显改变.瘤体标本免疫组化及Western blot法检测均发现ART 100.0 mg·kg-1可引起细胞凋亡并下调Bcl-2、ERK2以及VEGF的表达,这种下调作用在ART 200.0 mg·kg-1组更为明显,其与DDP 2.0 mg·kg-1组效果相似.结论:青蒿琥酯可有效抑制腺样囊性癌裸鼠移植瘤的生长,且毒副作用小,其作用机制可能与下调肿瘤VEGF,Bcl-2,ERK2的表达相关.
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莪术醇对结直肠癌细胞裸鼠移植瘤生长及其VEGF和COX-2表达的影响
目的:观察莪术醇对人结直肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,探讨其可能的机制.方法:建立人结直肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤模型,成瘤后将其随机分为莪术醇高、中、低剂量(80,40,20 mg· kg-1)组,模型组,空白组,每天ig给药1次,给药21 d.用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫组化方法(IHC)检测瘤组织中血管生成因子(VEGF)、环氧合酶-2(COX-2)的表达.结果:与模型组比较,莪术醇高、中、低剂量组能明显降低肿瘤的瘤体积、瘤重及VEGF,COX-2的表达,均呈剂量依赖性.莪术醇高、中、低剂量组抑瘤率分别为66.88％,42.08％,25.73％;模型组VEGF表达量与莪术醇各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);模型组COX-2表达量与莪术醇中、高剂量组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),VEGF和COX-2表达具有明显相关性(r=0.874,P＜0.01).结论:莪术醇抑制结直肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤生长的机制可能与下调VEGF和COX-2表达有关,并且可能通过COX-2/前列腺素E2(PGE2)/VEGF信号通路发挥抑制结直肠癌生长的作用.
关键词： 莪术醇 结直肠癌LoVo细胞 裸鼠移植瘤 血管生成因子 环氧合酶-2 -
鳖甲煎丸对HepG2裸鼠移植瘤Wnt信号通路相关分子及靶基因的影响
目的:通过研究鳖甲煎丸对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关信号分子及靶基因表达的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝细胞癌的分子机制.方法:建立裸鼠移植瘤肝癌模型,随机分为鳖甲煎丸高、中、低剂量(2.2,1.1,0.55 g·kg-1)组,模型组,正常组,肉眼观察鳖甲煎丸对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长的抑制作用,免疫组化检测移植瘤组织中β-catenin和T-框蛋白3(TBX3)的表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测其移植瘤组织中p19ARF,双微基因2(MDM2),p53的表达水平.结果:鳖甲煎丸对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长具有明显的抑制作用,鳖甲煎丸能够抑制其移植瘤组织中β-catenin和TBX3的表达,和模型组比较,鳖甲煎丸高、中剂量组中β-catenin和TBX3表达均明显降低(P＜0.05).同时,鳖甲煎丸能够促进人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织p19ARF和p53表达,并抑制MDM2表达,鳖甲煎丸高、中剂量组p19ARF,p53,MDM2表达较模型组均有明显差异(P＜0.05).结论:鳖甲煎丸能通过影响Wnt/β-catenin通路,调控β-catenin 和TBX3的表达,继而通过调控TBX3/p19ARF /MDM2通路激活抑癌基因p53,终抑制肝癌细胞的增殖并诱导其出现凋亡,从而达到抗肝细胞癌的目的.
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益气养阴解毒方对K562/A02裸鼠移植瘤逆转作用研究
目的:研究益气养阴解毒方对K562/A02多药耐药移植瘤的逆转作用.方法:建立K562/A02裸鼠移植瘤多药耐药模型；选用维拉帕米作阳性对照,用流式细胞仪(FCM)检测各组移植瘤耐药细胞P糖蛋白(P-gP)与bcl-2的表达情况和移植瘤细胞内注射用盐酸多柔比星(ADM)蓄积浓度及移植瘤耐药细胞的凋亡情况.结果:移植瘤P-gP表达与维托帕米组相比,生理盐水组与中药小剂量组有差异(P<0.05)；bcl-2的表达与维拉帕米组相比,中药大剂量组有差异(P<0.05)；益气养阴解毒方能使移植瘤耐药细胞内ADM的浓度升高.结论:益气养阴解毒方具有部份逆转白血病K562/A02移植瘤多药耐药性的作用,其逆转移植瘤裸鼠多药耐药性的机制不是通过下调肿瘤细胞膜上P-gP的表达实现的,而与降低bcl-2的表达、促进耐药细胞凋亡有关.
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小柴胡汤对鼻咽癌细胞生长的抑制作用
目的:探讨复方小柴胡汤对鼻咽癌高分化鳞癌细胞株1(nasopharyngeal carcinoma cell line,CNE-1)和鼻咽癌低分化鳞癌细胞株2(CNE-2)生长的抑制作用,试图为该药物的临床开发与应用提供实验数据.方法:按浓度梯度配置复方小柴胡汤,用MTT实验榆测不同浓度复方小柴胡汤对CNE-1/2细胞生长的影响,同时运用软琼脂克隆形成实验检测其对CNE-1/2细胞增殖能力的影响;在BALB/cA-nu裸鼠右背后皮下接种对数生长期细胞悬液(5×105个/mL)0.2 mL,成功复制肿瘤模型后随机分为5组,每组8只,于次日复方小柴胡汤按0.5,0.25,0.125 g·mL-1高、中、低3个剂量给药,同时设阳性对照组和阴性对照组,连续给药15 d后,测量肿瘤的体积和质量,计算体积抑制率和瘤重抑制率,研究复方小柴胡汤对CNE-2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用.结果:MTY法和克隆形成实验结果提示,与阴性对照组相比,不同浓度的复方小柴胡汤处理CNE-1和CNE-2细胞24,48,72 h,发现对两株的细胞生长和增殖能力均存在不同程度的抑制作用,并随药物浓度和作用时间的增加而增强,两者结果显示其半数抑制浓度约为2.5 g·L-1;与阴性对照组比较,裸鼠体内抑瘤实验发现给复方小柴胡汤治疗组裸鼠肿瘤生长速度明显减慢,阴性对照组(0.76±0.28)g,(962.88±245.96)mm3和复方小柴胡汤低浓度治疗组(0.88±0.40)g,(1 239.66±21.93)mm3肿瘤生长明显快于高、中浓度治疗组(0.22±0.14)g,(239.31±137.07)mm2;(0.20±0.16)g,(263.42±166.57)mm3及CTX阳性对照组(0.20±0.10)g,(246.72±194.6)mm3(P＜0.05).结论:复方小柴胡汤能抑制鼻咽癌CNE-1和CNE-2细胞的生长、增殖,对CNE-2裸鼠移植瘤的生长有抑制作用.
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丙戊酸钠对Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤细胞周期的影响
目的 观察丙戊酸钠(VPA)对急性髓性白血病(AML)Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤组织细胞周期的影响.方法 建立Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤模型,分为对照组和VPA治疗组,观察裸鼠移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率.用流式细胞仪检测细胞周期,用免疫组化及Western blot检测P21 WAFI/CIP和RB蛋白磷酸化(pRB)水平.结果 (1)VPA体内用药明显抑制裸鼠Kasumi-1细胞移植瘤的生长,瘤体积及重量明显小于对照组,肿瘤抑制率(IR%)为57.25%.(2)细胞周期阻滞于G0/G1期.(3)P21 WAFI/CIP蛋白表达水平(0.900 ±0.113)显著高于对照组(0.390 ±0.001)、pRB蛋白表达水平(0.340 ±0.620)显著低于对照组(0.810±0.420).结论 VPA可通过对Kasumi-1细胞周期蛋白及周期蛋白依赖性激酶抑制剂的影响,使细胞阻滞于G0/G1期.
关键词： 白血病 丙戊酸钠 细胞周期 裸鼠移植瘤 磷酸化的视网膜母细胞瘤蛋白 -
六味地黄丸联合5-Fu对抑制人胃癌裸鼠移植瘤的增效作用
目的 研究六味地黄丸对胃癌细胞及人胃癌裸鼠移植瘤的作用.方法 制备六味地黄丸含药血清,观察在含药血清作用下的BGC-823胃癌细胞生长情况,MTT法检测各组细胞增殖抑制率.建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,分为对照组、六味地黄丸低剂量组、中剂量组、高剂量组、5-Fu组、六味地黄丸低剂量+5-Fu组、中剂量+5-Fu组、高剂量+5-Fu组.六味地黄丸灌胃,观察裸鼠一般情况,1周后处死荷瘤鼠,称重瘤块并计算抑瘤率.HE染色,观察各组胃癌细胞坏死情况.结果 给药48 h后,六味地黄丸中剂量+5-Fu组的胃癌细胞存活率显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.01).药物作用后与对照组比较,5-Fu组、六味地黄丸低剂量+5-Fu组、中剂量+5-Fu组、高剂量+5-Fu组的抑瘤率分别为54.250％、57.873％、73.540％、72.625％;且该4组裸鼠体重均较对照组降低.单纯5-Fu组比六味地黄丸+5-Fu组腹泻严重,差别有统计学意义.结论 六味地黄丸联合5-Fu对抑制胃癌细胞增殖有协同作用,且增强裸鼠体质.
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RPL31-siRNA对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用
目的:研究siRNA沉默糖体蛋白L31 (ribosomal protein L31,RPL31)对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,探讨RPL31基因在胰腺癌中可能的作用机制.方法:设计合成靶向人PL31基因的siRNA及阴性对照siRNA;建立人胰腺癌BxPC-3细胞的Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,按照移植瘤体积随机化分为3组:溶剂对照组、阴性对照组及PL31-siRNA干预组;使用RNAi-Mate转染试剂将RPL 31-siRNA进行移植瘤瘤内注射,观察各组裸鼠体内瘤体生长速度,绘制肿瘤生长曲线；采用实时定量PCR及Western blot的方法检测移植瘤组织RPL31基因的表达;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测裸鼠皮下移植瘤Ki-67及CD31的表达;原位末端标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果:与溶剂对照组和阴性对照组相比,RPL31-siRNA注射组裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,移植瘤体积明显缩小,差异具有统计学意义(P＜0.05)；移植瘤组织中RPL31基因的mRNA水平和蛋白水平表达下调；另外,RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤中Ki-67表达下调(55.78％±4.63％、51.37％±5.05％ vs 11.08％±1.31％),CD31的表达下调(56.53％±6.03％、44.84％±5.24％ vs 9.67％±1.39％); RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤细胞凋亡增加(2.92％±0.54％、3.85％±0.87％ vs 39.58％±4.02％).结论:RPL31-siRNA可以下调胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤中RPL31基因的表达,抑制移植瘤的生长,并且还可以抑制移植瘤中Ki-677及CD31的表达,诱导移植瘤细胞的凋亡.以RPL31为靶点的基因治疗有潜在临床应用前景.
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白藜芦醇抗肝癌HepG2裸鼠移植瘤的活性
目的研究白藜芦醇对人肝癌的体内抗癌活性.方法建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型,采用瘤内注射的方法,用不同剂量的白藜芦醇进行治疗,并设对照.取裸鼠移植瘤制作光镜及电镜切片,观察肿瘤组织的病理变化.用免疫组织化学法检测瘤组织中PCNA及Bc1-2蛋白的表达.采用原位末端标记法检测瘤组织中的凋亡细胞.结果瘤内注射白藜芦醇能显著抑制鼠HepG2移植瘤的生长,抑制率达38%;瘤组织中PCNA的表达率(33%±6%)明显低于对照组(84%±7%);Bc1-2蛋白表达也降低,白藜芦醇治疗组、溶剂对照组、空白对照组图像分析结果A值分别为0.187±0.007,0.835±0.006,0.954±0.008.白藜芦醇作用导致瘤内大量细胞发生凋亡.结论白藜芦醇对人肝癌移植瘤的发展具有抑制作用,这种作用与白藜芦醇阻抑癌细胞增殖和减少细胞中Bc1-2蛋白的表达有关,细胞凋亡在其中也起着一定作用.
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复方中药99-克星超声介入治疗肝癌裸鼠移植瘤凋亡与增生
目的:探讨超声引导瘤内注射复方中药99-克星治疗肝癌SMMC-7721裸鼠移植瘤的抗癌作用.方法:取人肝癌SMMC-7721裸鼠皮下移植模型28只,随机分为99-克星中药治疗组14只,无水乙醇与生理盐水治疗组各7只.全部裸鼠在接种10 d后每隔5 d向肿瘤内注入治疗药物共4次,治疗20 d后处死.应用免疫组织化学方法检测移植瘤细胞Ki-67抗原的表达并行流式细胞仪(FCM)DNA分析以及采用TUNEL方法对移植瘤细胞凋亡现象进行观察.结果:中药99克星组与乙醇组的Ki-67指数分别为17±9%、21±11%,均显著低于盐水组的32±13%(P＜0.05);克星组凋亡指数高达49±5%,显著高于乙醇组的12±2%和盐水组的10±4%(均P<0.01);FCM DNA分析显示盐水组的异倍体峰出现率高达57%,明显高于克星组的7%与乙醇组的0%(P均<0.05),而克星组的凋亡峰出现率高达93%,明显高于乙醇组的14%与盐水组的0%(P均<0.01).结论:复方中药99克星能显著抑制裸鼠移植瘤细胞的增生,并诱发其凋亡.研究结果表明复方中药99克星具有强大的破坏与抑制肿瘤细胞生长的作用,其疗效不亚于无水乙醇,其主要机制可能有:(1)抑制癌细胞的增生,(2)诱导癌细胞凋亡.复方中药99-克星抗肿瘤的作用机制不同于无水乙醇,尤其以抑制癌细胞增生和诱导癌细胞凋亡的作用机制在抗肿瘤中具有重要的意义.本研究为传统中药治疗肝癌提供了一个新的给药途径与理论依据,其在肿瘤治疗研究中具有重要的意义和良好的发展前景.
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LHRH类似物对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响
目的:观察LHRH类似物的体内抗肝癌细胞增生活性,为LHRH类似物用于肝癌的内分泌治疗提供实验依据.方法:实验选用5-7周龄♂BALB/c裸鼠20只,分治疗组(丙氨瑞林瘤内注射组)和对照组(生理盐水瘤内注射组),用人肝癌hHCC细胞系建立肝癌荷瘤裸鼠模型,观察LHRH类似物丙氨瑞林(LHRH-A)对裸鼠移植瘤生长的影响;并分别用H-E染色和免疫细胞化学技术检测瘤组织的病理组织学改变和GnRH受体及凋亡蛋白Bax表达的变化.结果:LHRH-A瘤内注射(剂量为75 μg/d)可显著抑制肝癌移植瘤的生长.治疗3 wk后治疗组裸鼠肿瘤体积(1885.9±738.3mm3)明显小于对照组裸鼠的肿瘤体积(4223.4±1027.6mm3),两组间有统计学差异(P＜0.005);LHRH-A治疗3wk后的抑瘤率可达58%;治疗组裸鼠存活期(87.8±5.3d)较对照组(64.6±6.8d)显著延长(P＜0.05);治疗3wk后病理组织学发现治疗组瘤组织中癌细胞核分裂象减少,腺样癌组织、凋亡细胞数增多;治疗组瘤组织中表达GnRH受体的癌细胞数增加(72.5% vs 56.4%,P＜0.05),Bax阳性细胞比率增加(53.8% vs 41.5%,P＜0.05).结论:LHRH-A具有显著抑制肝癌裸鼠移植瘤细胞增生的活性,LHRH受体和凋亡蛋白Bax可能参与了LHRH-A对肝癌细胞增生的抑制作用.
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胃癌细胞系幽门螺杆菌感染对金属蛋白酶表达的影响
目的:建立胃癌细胞系H.pylori感染动物转移体外模型,初步探讨H.pylori感染在胃癌转移过程中的可能作用及其机制.方法:将H.pylori活菌与胃癌细胞系BGC-823低转移细胞株C8细胞共培养后,行裸鼠接种,观察H.pylori感染组与未感染组移植瘤生长情况及裸鼠肝、肺转移情况,免疫组化检测两组移植瘤中MMP-2,MMP-3,TIMP-2及TIMP-3蛋白的表达.结果:H.pylori感染组移植瘤重量与未感染组比较有差异(P＜0.05),病理检查示感染组2个肺转移,而未感染组无转移.免疫组化结果示感染组MMP-2,MMP-3,TIMP-2,TIMP-3蛋白的表达阳性率分别为:77.8±9.6%,64.5±6.9%,57.6±12.2%,40.0±9.2%;而未感染组分别为61.2±9.7%,53.1±5.8%,54.3±10.9%,53.0±6.6%,二者比较除TIMP-3蛋白的表达无显著性差异外,MMP-2、MMP-3、TIMP-2蛋白的表达均有显著性差异(P＜0.05).结论:H.pylori感染能促使裸鼠移植瘤的生长及肺转移,建立了H.pylori感染与胃癌的动物转移体外模型;H.pylori感染可能通过促使转移正相关因子MMP-2、MMP-3表达增高,转移负相关因子TIMP-2蛋白表达降低,而在胃癌转移过程中发挥重要作用.
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尼美舒利对人肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用及其机制
近几年来,虽然治疗肺癌的新药及新方法不断增多,但肺癌仍是我国病死率较高的恶性肿瘤之一, 其主要原因为肺癌早期诊断困难,1/3以上的患者确诊时已发生了远处转移,其中淋巴结转移是预后不良的重要因素之一.动物实验结果表明环氧化酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2) 抑制剂可抑制肿瘤生长及肿瘤淋巴管的生成,预防淋巴结转移[1].
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EphA7基因沉默对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤生长的影响
目的 探讨RNA干扰抑制EphA7基因对人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤生长的影响.方法 EphA7小干扰RNA (siRNA)重组质粒采用脂质体介导法转染肝癌细胞SMMC-7721,同时设空载体转染组、未转染组和对照组.对照组不注射细胞,仅注入磷酸盐缓冲液(PBS)做对照.裸鼠移植瘤模型采用左上肢皮下注射的方法建立.应用实时PCR、免疫组化和蛋白印迹方法检测移植瘤组织中EphA7基因和蛋白的表达情况,同时比较成瘤时间、肿瘤体积和重量等.结果 注射细胞后9 ～12天,除对照组外其余各组均可在注射部位发现肝癌移植瘤形成.移植瘤形成后第35天,与未转染组和空载体转染组比较,转染组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低(P＜0.05).转染干扰载体pRNA-siEphA7对裸鼠肝癌移植瘤的的抑瘤率为55％.免疫组化结果显示,与未转染组和空载体转染组比较,转染组移植瘤组织中EphA7蛋白阳性染色的细胞较少,染色较浅,呈浅黄色.实时PCR和蛋白印迹结果显示,与未转染组和空载体转染组比较,转染组移植瘤组织中EphA7基因和蛋白的表达明显低于未转染组和空载体转染组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 利用siRNA抑制EphA7的表达可减缓肝癌细胞SMMC-7721在活体动物体内的生长,有望成为肝癌基因治疗的靶点.
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survivin反义寡核苷酸对人胆管癌裸鼠移植瘤及c-myc和cyclin D1表达的影响
survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAP)家族的新成员[1],除了在胸腺和胚胎组织中有微量表达外,在终末分化的组织中不表达或极少表达,但可过度地表达于多种人类恶性肿瘤组织中.
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MDA-7联合内皮抑素对肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用
内皮抑素抗肿瘤作用已得到证实,但单独应用抗肿瘤效果尚不够理想.黑色素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation-associated gene-7,MDA-7)不但可抑制多种肿瘤细胞的增殖,且与部分抗肿瘤药物存在协同作用.我们研究MDA-7联合内皮抑素对肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤的作用.
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砷对人乳腺癌移植瘤血管内皮细胞的影响
三氧化二砷(As2O3)对血液性肿瘤疾病、某些实体瘤有肯定疗效[1],本实验探讨As2O3对荷人乳腺癌裸鼠移植瘤血管内皮细胞生长的影响,研究其作用机制.
