首页 > 文献资料
-
Percoll及Ficoll分离纯化肝癌移植瘤肿瘤浸润淋巴细胞比较
目的：比较Percoll和Ficoll两种淋巴细胞分离液对肿瘤浸润淋巴细胞纯度及细胞增殖的影响。方法：用Per-coll及Ficoll两种淋巴细胞分离液分离H22肝癌小鼠皮下移植瘤内淋巴细胞，对细胞首先行锥虫蓝染色后在显微镜下计算细胞总数和存活率，后用流式细胞仪分析淋巴细胞纯度及分裂、增殖能力。结果：Percoll及Ficoll分离所得TIL总数分别为(3.28±0.78)×107和(2.02±0.76)×107；Percoll分离所得第3、5、7天的TIL增殖率分别为(22.8±2.31)%、(39.1±1.94)%、(69.85±1.68)%；Ficoll 分离所得第3、5、7天的 TIL 增殖率分别为(13.25±1.68)%、(23.7±5.31)%、(41.5±1.56)%。Percoll分离所得TIL中CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞分别为(73.2±6.8)%、(49.1±10.2)%、(22.0±1.4)%；Ficoll分离所得TIL中CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞分别为(47.9±5.0)%、(29.1±8.4)%、(19.7±5.0)%。结论：与Ficoll相比，Percoll分离所得H22肝癌小鼠皮下移植瘤TIL的细胞得率和纯度更高、增殖力较强，将更有利于后续研究。
-
肿瘤坏死因子α基因转导的疫苗对小鼠肝癌移植瘤的影响
应用我院已构建的肿瘤坏死因子基因转导的人肝癌细胞作为免疫原,进行小鼠免疫接种,观察接种后小鼠对移植的肿瘤细胞的免疫排斥作用,探索其能否作为一种肝癌疫苗.
-
中药扶正抗癌汤抗肿瘤血管形成治疗肝癌的实验研究
目的:探讨扶正抗癌汤对裸鼠肝癌移植瘤的血管生成抑制作用.方法:裸鼠32只,6周龄,随机分为对照组、中药低剂量组、中药高剂量组及阿霉素组,造模后定期测量肿瘤体积,40 d处死裸鼠,取肝癌组织,用免疫组化技术检测肿瘤微血管密度(MVD)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)的表达,并进行组间比较.结果:中药低剂量组、高剂量组和阿霉素组抑瘤率分别为37%,40%和34%,3个治疗组之间抑瘤率比较无显著性差异(P＞0.05).对照组40 d肿瘤体积(mm3)、MVD值及VEGF,b FGF阳性率依次为1 640.25±512.13、16.8±5.2、88%、75%;中药低剂量组1 032.75±570.01、10.6±2.7、38%、25%;高剂量组982.00±443.13、8.4±2.9、25%、25%;阿霉素组1 089.94±250.30、11.5±3.1、62%、50%.各治疗组肿瘤体积与对照组比较差别均有显著性(P＜0.05).中药低剂量组和高剂量组MVD值及VEGF,b FGF表达均明显低于对照组(P＜0.05).结论:扶正抗癌汤对裸鼠肝癌移植瘤有明显的抑制作用,可能通过抑制肿瘤血管内皮生长因子合成而抑制肿瘤血管生成达到抗癌效果.
-
白藜芦醇合用5-FU对小鼠移植肝癌H22生长的影响
目的:测定白藜芦醇合用5-FU对小鼠移植肝癌H22生长及其毒性的影响方法:将含1.0×109的肝癌细胞悬液0.2mL,接种在6只Balb/c小鼠腹腔.5d-7d后,抽取小鼠腹水离心计数后,将2 0×109的肝癌细胞悬液0.2mL注射到70只Balb/c小鼠腹股沟皮下,于接种第二天,随机分为7组,瘤旁分别注射白藜芦醇500mg·kg-1,1000mg·kg-1,1500mg·kg-1,5-FUmg·kg-1,白藜芦醇+5-FU(1000mg·kg-1+1000mg·kg-1),白藜芦醇+5-FU(1500mg·kg-1+1000mg·kg-1)及等量的生理盐水,连续10d,观察毒性反应,停药后2d,称质量,同时处死小鼠,采血计白细胞数,切除肿瘤、胸腺及脾脏,称取质量,计算抑瘤率;同时检测巨噬细胞吞噬功能.显微镜及透射电镜下观察肝癌细胞病理变化及凋亡情况.结果:白藜芦醇500mg·kg-1,1000mg·kg-1,1500mug·kg-1,5-FU1000mg·kg-1,白藜芦醇+5-FU(1000mg·kg-1+1000rmg·kg-1),白藜芦醇+5-FU(1500mg·kg-1+1000mg·kg-1)可抑制Balb/c小鼠肝癌移植瘤的生长,其抑瘤率分别为31 5%,45.6%,48.7%,78.1%,90.0%和97.2%,与对照组比较差异显著(P<0.05),与5-FU合用可显著增加其抑瘤率(P<0.05).不同剂量白藜芦醇与5-FU配伍合用,白细胞数提高30.8%(P<0.01);胸腺重量提高35.4%(P<0.01);脾脏重量提高28 1%(P<0.01),与对照组比较差异显著(P<0.01);吞噬率及吞噬指数分别提高84.1%和36.5%(P<0.05).透射电镜下白藜芦醇体内可诱导鼠肝癌细胞H22的凋亡,有典型的细胞凋亡形态学特征.结论:不同剂量的白藜芦醇与5-FU配伍,能显著增强5-FU对小鼠移植瘤H22的抑瘤率,且对5-FU具有一定的增效减毒作用.
-
三氧化二砷抗肿瘤血管形成研究
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)注射液抗肿瘤血管形成的作用及其相关机制.方法:采用MTT比色法、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管形成实验和免疫组化等方法观察As2O3对内皮细胞株ECV304增生、CAM血管形成以及对裸鼠肝癌移植瘤LCI-D20表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.结果:As2O3有显著抑制内皮细胞增生作用;能抑制CAM血管形成,其机制与损伤形成血管的原始间充质细胞、破坏血管形成中的内皮细胞的结构和功能有关;As2O3并能降低裸鼠人肝癌转移模型肝移植瘤VEGF的表达.结论:As2O3注射液有明显的抗肿瘤血管形成作用,其机制可能与破坏内皮细胞结构和功能、抑制内皮细胞增生以及抑制肿瘤组织表达VEGF有关.
-
LHRH类似物对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响
目的:观察LHRH类似物的体内抗肝癌细胞增生活性,为LHRH类似物用于肝癌的内分泌治疗提供实验依据.方法:实验选用5-7周龄♂BALB/c裸鼠20只,分治疗组(丙氨瑞林瘤内注射组)和对照组(生理盐水瘤内注射组),用人肝癌hHCC细胞系建立肝癌荷瘤裸鼠模型,观察LHRH类似物丙氨瑞林(LHRH-A)对裸鼠移植瘤生长的影响;并分别用H-E染色和免疫细胞化学技术检测瘤组织的病理组织学改变和GnRH受体及凋亡蛋白Bax表达的变化.结果:LHRH-A瘤内注射(剂量为75 μg/d)可显著抑制肝癌移植瘤的生长.治疗3 wk后治疗组裸鼠肿瘤体积(1885.9±738.3mm3)明显小于对照组裸鼠的肿瘤体积(4223.4±1027.6mm3),两组间有统计学差异(P＜0.005);LHRH-A治疗3wk后的抑瘤率可达58%;治疗组裸鼠存活期(87.8±5.3d)较对照组(64.6±6.8d)显著延长(P＜0.05);治疗3wk后病理组织学发现治疗组瘤组织中癌细胞核分裂象减少,腺样癌组织、凋亡细胞数增多;治疗组瘤组织中表达GnRH受体的癌细胞数增加(72.5% vs 56.4%,P＜0.05),Bax阳性细胞比率增加(53.8% vs 41.5%,P＜0.05).结论:LHRH-A具有显著抑制肝癌裸鼠移植瘤细胞增生的活性,LHRH受体和凋亡蛋白Bax可能参与了LHRH-A对肝癌细胞增生的抑制作用.
-
超声造影剂联合超声介导耐药基因反义寡脱氧核苷酸转染裸鼠肝癌细胞逆转多药耐药效应的研究
肝癌是常见的恶性肿瘤之一,严重危害人类的健康.研究肝癌多药耐药(multi-drug resistance,MDR)是肝癌临床治疗迫切需要解决的问题,肝癌MDR与耐药基因mdr-1、mrp和相应表达蛋白P-gp、MRP(P190)密切相关[1].本研究以mdr1、mrp-反义寡脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)+超声造影剂+超声转染裸鼠QGY/CDDP肝癌移植瘤,以期实现在体对瘤细胞MDR的逆转并探讨其效应和作用机制.
-
反义端粒酶RNA基因对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用
目的: 研究反义人端粒酶RNA基因(human telomerase RNA ,hTR)在裸鼠体内对肝癌移植瘤的抑制作用.方法: BALB/c裸鼠前肢腋窝皮下注射HepG2肝癌细胞构建移植瘤模型,以携反义hTR逆转录病毒质粒PLXSN-hTR-BamHⅠ瘤体内注射治疗(每次0.2 ml,共5次),以注射正义hTR逆转录病毒质粒PLXSN-hTR-EcoRⅠ和生理盐水为对照,测量肿瘤体积,计算抑瘤率;H-E染色观察瘤组织病理变化;TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡.结果:反义hTR治疗组肿瘤生长较正义hTR治疗组及生理盐水组明显减慢,反义hTR组抑瘤率为26.78%,明显高于正义hTR组的1.93%(P< 0.01).反义hTR治疗组较正义hTR治疗组及生理盐水组瘤组织坏死面积、肿瘤细胞凋亡率均明显增加(均P< 0.01).结论:反义hTR在裸鼠体内能够显著抑制肝癌移植瘤的生长,促进肿瘤细胞的凋亡.
-
血管生成抑制素基因对裸鼠人肝癌移植瘤的治疗作用
肿瘤血管的快速生成是原发性肝癌生长和转移的前提,肿瘤血管一直作为抗肿瘤的研究对象而倍受关注[1].本研究旨在观察血管生成抑制素(As)基因对人原发性肝癌裸小鼠皮下移植瘤的治疗作用.
-
超声靶向微泡破碎联合半乳糖聚乙烯亚胺促凋亡素基因治疗肝癌移植瘤的实验
目的 探讨超声靶向微泡破碎(UTMD)联合半乳糖聚乙烯亚胺(PEI-Gal)介导凋亡素基因对小鼠肝癌移植瘤的抑制作用.方法 建立c57BL/6小鼠皮下肝癌移植瘤模型,随机分为4组:对照组；PEI-Gal+质粒组;PEI-Gal+超声+质粒组；PEI-Gal+ UTMD+质粒组.对组织行冰冻切片采用免疫荧光法检测转染率、Tunel检测凋亡率.观察肿瘤的体积和组织学变化,同时计算抑瘤率.采用免疫组织化学法检测移植瘤Bcl-2及Caspase-3蛋白在各组肿瘤标本中的表达.结果 PEI-Gal+ UTMD+ pEG-FP-N3组基因转染效率明显高于对照组、PEI-Gal+质粒组与PEI-Gal+超声+质粒组(P均＜0.01且对组织无明显损伤.治疗12天后PEI-Gal+ UTMD+ pCDNA-VP3组肿瘤凋亡率(34.57％±3.56％)、抑瘤率(56.6％)均显著高于对照组和PEI-Gal+质粒组(P均＜0.01).肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达明显下降,Caspase3蛋白表达增加与其他各组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 超声靶向微泡破碎联合半乳糖聚乙烯亚胺能显著增强基因转染效率,且对组织无明显影响.联合凋亡素基因能通过诱导凋亡抑制肿瘤生长发挥抗瘤作用.
-
靶向PEG10的siRNA真核表达载体对裸鼠肝癌移植瘤生长的影响
目的 探讨靶向PEG10的siRNA真核表达载体(psiRNA-PEG10)对裸鼠人肝癌移植瘤生长的影响.方法 建立人肝癌细胞HepG2的荷瘤裸鼠模型,在接种后第14天分别将ps/RNA空载体和psR-NA-PEG10瘤内多点注射进行治疗,观察肿瘤大小变化、组织形态学及超微病理改变.结果 psIKNA-PEG10治疗组肿瘤生长受到明显抑制,与生理盐水组和psiRNA组比较差异有显著性(P＜0.001),抑瘤率明显高于其他两组,电镜下可见明显的细胞凋亡.结论 靶向PEG10的siKNA真核表达载体对裸鼠肝癌移植瘤生长有抑制作用.
-
PLGA纳米载体介导的端粒酶hTERT反义核酸对裸鼠肝癌移植瘤的影响
目的通过以PLGA纳米粒作为端粒酶hTERT反义核酸的载体,促进反义核酸对肝癌瘤组织的抑制.方法以HepG-2肝癌细胞和裸鼠建立肝癌移植瘤实验模型;观测瘤重和成瘤率;流式细胞仪检侧肿瘤细胞凋亡及细胞周期的特点.结果与对照组相比,治疗组肿瘤细胞凋亡数明显增加,细胞增殖受到抑制,肿瘤生长缓慢,出瘤时间推迟.结论以PLGA纳米粒作为端粒酶反义核酸的载体,能显著延缓裸鼠肝癌移植瘤的发展,产生明显的疗效.
关键词： 纳米载体 端粒酶hTERT反义核酸 肝癌移植瘤 -
蛇毒多肽和蝎毒多肽对小鼠肝癌移植瘤的抑制作用和Caspase-3表达的影响
目的:检测蛇毒多肽(卡迪,KD)和蝎毒多肽(polypeptide from Buthus martensii venom,PBMV)对肝癌移植瘤(H22)带瘤小鼠瘤重的抑制作用,并观察肿瘤细胞Caspase-3表达,初步探讨其作用机理.方法:昆明种系近交小白鼠,60只,复制肝癌移植瘤模型,随机分为6组:阴性对照组(生理盐水),阳性对照组(环磷酰胺0.010 mg/mL),KD 0.016、0.010 mg/mL组和PBMV 0.016、0.010 mg/mL组,分别注射KD、PBMV和阳性药物10 d后,分析统计带瘤小鼠的体重变化、脾指数和肿瘤生长抑制率;并采用免疫组织化学方法,观察治疗后Caspase-3表达的改变.结果:KD 0.016、0.010 mg/mL组和PBMV 0.016、0.010 mg/mL组的平均瘤重显著地减小,均具有明显的肿瘤生长抑制率,与阴性对照组相比有显著差异(P＜0.05),而与阳性对照组相比没有显著差别(P＞0.05).免疫组化显示:阴性对照组胞浆无着色或着色很浅;阳性对照组胞浆浅红棕色,着色胞浆分布较集中;两组待测组胞浆均显红棕色,分布面积广,而且随着用药浓度的增加而增多.结论:KD和PBMV对H22生长和增殖具有抑制作用,其抑制作用的机制可能是通过增强Caspase-3蛋白的表达而促使肿瘤细胞的凋亡.
-
中药提取物对小鼠肝癌移植瘤作用研究
目的 探讨大黄素、苦参素、黄连素和黄芩苷中药提取物对小鼠肝癌移植瘤的作用.方法 选用BALB/c小鼠,构建肝癌移植瘤.随机抽取肝癌模型小鼠共105只,用沸水溶解大黄素等中药提取物为不同浓度的药液,隔天对模型小鼠灌胃给药,连续灌胃15次,每种药物每个浓度单独给药.末次灌胃后7d,分别随机抽取小鼠(每组2只),颈椎脱臼处死,取肝组织,苏木精-伊红染色后观察肝组织病理变化.结果 大黄素、苦参素、黄连素和黄芩苷组在浓度128μg/mL时,肝组织癌变明显减少,而五味子组变化不大.结论 大黄素、苦参素、黄连素和黄芩苷对肝癌移植瘤有明显的抑制作用.
