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反义端粒酶RNA对肝癌细胞黏附和侵袭的影响
目的:探讨人反义端粒酶RNA(human telomerase RNA,hTR)对肝癌细胞系BEL-7402黏附和侵袭的影响及其机制.方法:利用前期实验成功转染端粒酶正、反义RNA基因的肝癌细胞,分为正义转染组(BEL-7402-hTR-EcoR Ⅰ细胞)、反义转染组(BEL-7402-hTR-BamH Ⅰ细胞),空白对照组(BEL-7402细胞).黏附实验和侵袭实验检测反义hTR转染后BEL-7402细胞的黏附和侵袭能力,免疫细胞化学检测整合素β1(integrin β1,INTβ1)、上皮钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cad)的表达水平,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、-9的活性变化.结果:与空白对照组和正义hTR转染组相比,反义hTR转染组BEL-7402-hTR-BamH Ⅰ细胞的黏附、侵袭能力明显减低(0.204±0.029 vs 0.505±0.037、0.465±0.029,34.80±3.19 vs 71.47±5.15、69.87±3.11,均P＜0.05),INTβ1表达降低(0.153±0.016 vs 0.385±0.008、0.375±0.014,P＜0.05),E-cad表达增强(0.209±0.020 vs 0.124±0.018、0.134±0.016,P＜0.05),MMP-2和MMP-9的活性受到明显抑制(2 054.22±138.52 vs 3 105.56±329.60、2 923.22±269.08,846.33±104.66 vs 1 538.89±122.85、1 453.33±126.35,均P＜0.05).结论:人反义端粒酶RNA能明显减低肝癌BEL-7402细胞的黏附、侵袭能力,其机制可能与上调E-cad的表达、下调INTβ1的表达,并抑制MMP-2和MMP-9的活性有关.
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反义端粒酶RNA基因对裸鼠肝癌移植瘤的抑制作用
目的: 研究反义人端粒酶RNA基因(human telomerase RNA ,hTR)在裸鼠体内对肝癌移植瘤的抑制作用.方法: BALB/c裸鼠前肢腋窝皮下注射HepG2肝癌细胞构建移植瘤模型,以携反义hTR逆转录病毒质粒PLXSN-hTR-BamHⅠ瘤体内注射治疗(每次0.2 ml,共5次),以注射正义hTR逆转录病毒质粒PLXSN-hTR-EcoRⅠ和生理盐水为对照,测量肿瘤体积,计算抑瘤率;H-E染色观察瘤组织病理变化;TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡.结果:反义hTR治疗组肿瘤生长较正义hTR治疗组及生理盐水组明显减慢,反义hTR组抑瘤率为26.78%,明显高于正义hTR组的1.93%(P< 0.01).反义hTR治疗组较正义hTR治疗组及生理盐水组瘤组织坏死面积、肿瘤细胞凋亡率均明显增加(均P< 0.01).结论:反义hTR在裸鼠体内能够显著抑制肝癌移植瘤的生长,促进肿瘤细胞的凋亡.
