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苏木素作为外源性波谱标志物进行肿瘤MRS分子成像的初步研究
目的 探讨苏木素作为外源性波谱标志物进行肿瘤MRS分子成像的相关基础问题.方法 用高场MR检测不同浓度苏木素溶液,分别用点解析波普法(Point Resolved Spectroscopy,PRESS)和激励回波获取法(Stimulated Echo Acquisition Mode,STEAM)法进行MRS成像,分析不同扫描方法和浓度苏木素MRS信号特点.结果 无论PRESS和STEAM,苏木素均可检出特征性波谱谱线,峰位固定,但峰高和峰面积和浓度相关,浓度越高,谱线越清晰.结论 苏木素有特征性MRS信号,有可能为肿瘤分子成像提供合适的外源性靶标物质.
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一种简便的宫颈细胞学染色法
子宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤,尤其在经济落后及偏远地区,宫颈癌的发病率占女性肿瘤的较大比例.随着子宫颈癌预防普查工作的广泛开展,使许多无症状的子宫颈原位癌和早期癌能及时发现,提高了宫颈癌的五年治愈率.宫颈刮片检查是发现宫颈癌的有效方法之一,目前常用苏木素及伊红染色(HE)后进行细胞学检察.近来,我们改用美蓝(MB)染色观察了1 800张宫颈刮片,现将结果报道如下.
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苏木中高异黄酮类成分对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用
目的:研究苏木药材主要成分高异黄酮类成分对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用.方法:采用大鼠胸主动脉环张力测定法,观察苏木中4个高异黄酮类成分:巴西苏木素(brazlin,1)、(E)-3-(3,4-dihydroxybenzylidene)-7-hydroxychroman-4-one(2)、苏木酮B(sappanone B,3 )、去氧苏木酮B(3-deoxysappaJlone B,4)(50~1 000μmol·L~(-1))对由苯肾上腺素(PE)和氯化钾(KCl)预收缩的大鼠离体胸主动脉环的舒张作用.结果:4个高异黄酮类成分均能舒张由PE和KCl预收缩的内皮完整的血管环;除变异的高异黄酮类成分巴西苏木素(1)外,高异黄酮类成分(2,3,4)也可显著舒张由PE和Kcl预收缩的内皮去除的血管环;而内皮抑制剂(L-NNA)和亚甲蓝(MB)可以抑制变异高异黄酮类成分巴西苏木素的舒血管作用.结论:正常高异黄酮类成分的舒血管作用可能是非内皮依赖性的,而变异的高异黄酮类成分的舒血管作用是内皮依赖性的,并提示可能由一氧化氮-环磷酸鸟苷(NO-cGMP)通路介导.研究结果一定程度上解释了苏木的药理作用.
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Carazzi苏木素复染液的进一步改良
复染是骨髓细胞化学染色的一道重要程序.Carazzi苏木素复染液具有细胞核着色良好、低毒、复染时间过长细胞浆着色仍浅淡等优点.本人对其传统配方[1]作了进一步改进,在同样复染效果条件下,既使其配制简便快速,又节约了试剂.
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孤立性梅克尔憩室翻转伴不同部位血管畸形一例及文献复习
梅克尔憩室是常见的小肠畸形,常见的并发症有溃疡、出血、梗阻和套叠等并发症,梅克尔憩室翻转是较为罕见的并发症,如无明确症状术前常不易诊断。小肠血管畸形也是常见的小肠出血原因,随着手术和内镜技术的发展,多数引发出血的小肠血管畸形破裂可以得到救治。2010年收治1例下消化道出血患者,临床初步检查及对症治疗后手术探查,手术切除病变小肠,病理检查应用苏木素-伊红染色及免疫组织化学染色标记CD31、CD34抗体表达,终诊断为小肠血管畸形破裂伴发无症状梅克尔憩室翻转。本文回顾此例的临床病理特征,以期提高对此特殊情况的认识。
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肺原发性血管外皮细胞瘤一例
患者,女,30岁,已婚,农民,因咳嗽2个月,反复发热1个月于2000年5月11日入院。入院查体:体温39 ℃,呼吸20次/min,脉搏80次/min,血压90/69 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),浅表淋巴结不肿大,双肺散在干湿性音,左下肺呼吸音稍弱,心脏及腹部无异常。外院CT示:左下肺块影,并与胸壁粘连。纤维支气管镜检查可见左下叶粘膜充血,炎症改变,活检标本(苏木素-伊红染色)无异常。CT引导下行经皮肺活检术,病理切片(苏木素-伊红染色)结合免疫组化[波形蛋白(+)、神经元特异性烯醇化酶(-) 、嗜铬素A(-)、溶菌酶(-) 、角蛋白(-) 、Ⅷ因子(-) 、平滑肌肌动蛋白(-)],考虑为左下肺血管外皮细胞瘤(低度恶性)。经外科手术切除肿瘤,其大体标本示(肉眼观):离肺门残端3 cm处可见一7 cm×6 cm×3 cm结节状肿物,突出肺表面,无包膜,边界清楚,无明显粘连,质软,切面呈灰白色,鱼肉样,部分区有出血、坏死;病理切片(苏木素-伊红染色)示:瘤组织由梭形、椭圆形细胞构成,其内有薄壁血管腔隙,衬以单层内皮细胞,瘤细胞围绕血管周围,异型性显著,胞核大,不规则,核膜粗糙,核仁可见,核分裂像多见,并见病理性核分裂像(图1,2),结合网织染色(图3),诊断为肺血管外皮细胞瘤(低度恶性)。
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免疫组化标记切片褪色再行HE染色的方法介绍
在临床病理工作中,一些经过免疫组化标记的病理切片需要褪色后重新进行苏木素(HE)染色,以满足诊断、教学和学术交流的需要.我们经过长期摸索,建立了一种将免疫组化标记切片褪色后重新进行HE染色的病理技术方法,效果良好,现介绍如下.1 材料与方法1.1 材料收集近2年在我院病理科行病理学检查的子宫平滑肌瘤和结肠癌病例各10例,每例挑选1个组织蜡块,连续切片3张,厚度4 μm,分别行HE染色(HE组)、免疫组化标记(IHC组)和免疫组化标记褪色复染(IHC褪色复染组).其中HE组以普通载玻片捞片,IHC组和IHC褪色复染组以涂胶片捞片.
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苏木素在结肠恶性肿瘤治疗中的应用
结肠癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,虽然我国曾经被认为是发病率较低的国家,但随着人民生活水平的不断提高及饮食结构的改变,结肠癌的发病率及死亡率有较明显的上升趋势[1]。目前对结肠癌的治疗是以外科手术为基础,化学治疗、放射治疗、免疫治疗、中医中药治疗等为辅助的综合治疗[2]。近年来随着分子生物学、实验动物学等研究方法的不断发展,发现从中药苏木中提取的苏木素对包括结肠癌在内的等多种恶性肿瘤有着较好的治疗作用。本文通过查阅近年来有关苏木素的文献,综述其在结肠癌治疗中发挥的疗效。
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眼表疾病行羊膜移植的抗感染效应
严重眼表疾病的治疗常因角膜或结膜上皮化延迟而变得复杂.上皮化延迟(PED)的治疗涉及导致PED的各种因素,包括异常眼睑重建、人工泪液、自体血清点眼和近期提倡的作为受损基底膜替代物的羊膜之应用.关于羊膜的报道多数集中于羊膜作为基底膜替代物,被认为是促进上皮生长的理想底物.此研究不同于以往的报道,即羊膜被用作遮盖再生上皮的暂时性植片,不包括其基底膜特性. 临床研究:患者20例20眼,分为两组,一组是PED患者接受羊膜移植,仅保守疗法治疗2周无效的患者方可进入此研究;另一组是行角膜缘干细胞移植术的患者,作为预防性措施接受这一疗法,因为此类患者角膜上皮化常很困难.疑有活动性炎症者除外,按常规方法施行羊膜移植,所有病例均为基底膜面向外,术后1周取下羊膜植片,行组织病理学检查,包括苏木素-伊红染色,及TUNEL染色.浸润细胞应用免疫细胞化学方法检测,用抗CD14,CD4,CD8和CD20单克隆抗体特征性标记受累细胞是T细胞或B细胞亚群. 体外研究:几种T细胞来源细胞系(Raji,Molt 4)和由Ficoll密度梯度离心分离出来的外周血单核细胞分别与保存的人羊膜共同培养,获取含有淋巴细胞的羊膜.每组事先用β1及β2整合蛋白的封闭抗体处理.羊膜行苏木素-伊红染色及TUNEL技术染色. 从临床研究获取的羊膜,其基质中大多有不同程度的淋巴细胞浸润,CD14染色阳性表明大多数属于单核细胞/巨噬细胞系.CD4、CD8阳性细胞所占比例几乎相等,说明两种类型T细胞均存在.另一方面,CD20抗体着染不明显,证明B细胞浸润很少.大多数浸润的淋巴细胞TUNEL(+),提示迁移到羊膜时多已凋亡.其凋亡过程是否是由羊膜所导致的主动效应还不很清楚,因为淋巴细胞在羊膜中可能仅进行了一次生理性凋亡过程.所有的组织学标本均表明浸润细胞没有侵犯基底膜,大多数细胞似乎都与紧邻于羊膜下的眼表面相隔开来.另有可能是羊膜作为一种生理性屏障,就像接触镜保护眼表那样,以防泪膜中的炎症细胞侵入.此研究中作者没有比较羊膜处于相反方向,即基质面向上时的结果. 体外研究结果发现Raji和外周血单核细胞都没有侵入羊膜,而Molt4粘附并浸润于羊膜基质中.这表明淋巴细胞的粘附和浸润是有选择性的,提示其粘附是通过有关的特定分子进行的.Molt4的粘附未被加入的主要粘附分子β1和β2整合素阻遏剂所阻断,提示其它分子可能参与此过程. 此研究表明羊膜在眼表作为暂时性植片能够促进眼表上皮化,羊膜使浸润于其中的淋巴细胞与眼表面相隔离,似乎在羊膜的抗感染机制中发挥一定作用,连同羊膜其它已公认的特性使羊膜在严重的眼表疾病治疗中成为一种有用的外科材料.
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苏木素碱性复红-苦味酸染色法的改进及在缺氧骨骼肌和平滑肌染色中的应用
目的:显示止血带结扎后缺氧骨骼肌.方法:改进显示缺氧心肌的碱性复红法,即延长苏木素染色时间并增加盐酸酒精分化的步骤.结果:缺氧骨骼肌纤维呈艳红色,正常骨骼肌纤维呈黄色,细胞核呈蓝黑色;平滑肌着色不规律;实验各组均见艳红色肌纤维 ,且2?h组较1?h组明显,老式止血带组较卡式止血带组明显.结论:改进后的方法各种着色清晰度增加,色彩对比明显,染色效果更佳.此法不仅应用于传统的心肌缺氧染色,而且还可应用于缺氧骨骼肌的染色,扩大了应用范围.
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改良三重染色法在幽门螺杆菌检测中的应用
幽门螺杆菌是存在于胃幽门等部位的一种革兰阴性杆菌.其形态特点是短杆状、两端微弯,与慢性胃炎和消化性溃疡以及胃癌的发生有关.目前,对幽门螺杆菌的染色多选用Warthin-starry银染法[1],但该法存在着配制染液的方法较烦琐,染色过程中需在水浴箱中孵育,导致染色时间较长等缺点.改良三重染色法[2](苯酚品红/阿辛蓝/苏木素-伊红)有着价格低廉,试剂配制简单,操作简便,诊断迅速等特点.它可以在自动染色机上完成染色的全过程,并且在一张染色切片中既可看到HE的染色效果,又能观察到幽门螺杆菌的感染程度以及肠上皮化生等病理改变.而且,该种染色方法在一般实验室即可开展.
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微波炉替代电炉在苏木素染液配制中的应用
目的 探讨Harrys苏木素染液配制的方法.方法 采用微波炉加热的方法进行Harrys苏木素染液的配制.结果 微波炉加热配置苏木素方法简便,安全,效果好.结论 现在微波炉比较便宜,完全可以用它代替电炉进行Harrys苏木素染液的配置,且染色效果丝毫不逊色.
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人脑出血周围组织星形胶质细胞反应与细胞周期蛋白D1相关性的研究
关于星形胶质细胞对中枢神经系统内环境稳定和可塑性的影响,及对神经元微环境的调控、再生的作用日益受到学者们的重视.但目前对星形胶质细胞在脑出血后的活化机制研究较少.本研究应用人脑出血后的尸检标本,采用苏木素-伊红(HE)形态学观察和免疫组织化学方法,对脑出血周围组织进行研究,观察神经胶原纤维酸性蛋白(GFAP)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的动态变化,进一步探索星形胶质细胞在脑出血后的变化规律及机制,为临床治疗和新药的开发研制提供新的思路.
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用微波辐射进行新法苏木素的速染
在病理组织切片的HE染色中, 多数采用哈瑞氏苏木素液. 但由于其配制时需要煮沸和加氧化汞的缺点, 我科改用配制安全而污染少的新法苏木素液并结合微波辐射加快新法的染色速度, 获得了与哈瑞氏相当的染色效果. 现将方法简介如下. 临床护理
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制备HE染色切片易出现的问题、原因及解决方法
HE染色法是常规的染色方法.任何固定方法所固定的组织标本,以任何包埋方法所制成的组织切片,均可进行此种染色.组织经过这一染色法,其形态结构可以全部显示,一般的组织变化和组织产物都可以通过这一染色显现出来[1].这种方法染色的组织切片,不易褪色,可以长期保存,因此,在临床,非常有利于以后的科研工作和患者的检索.
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3种苏木素染液的染色效果比较
在HE染色中,细胞核的着色情况直接影响着病理切片的质量。而苏木素染液又是细胞核染色的关键,苏木素染色的好坏决定着细胞核的着色深浅,也决定了一张切片的质量[1]。所以选择合适的苏木素染液十分重要。我们对3种常用的苏木素染液的染色效果进行分析和比较,寻找更为稳定可靠的苏木素染色液。
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血管内皮生长因子基质金属蛋白酶-2和-9在胸腔积液检测中的临床意义
本文探讨胸腔积液中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9的表达,明确其在良、恶性胸腔积液中的鉴别作用,以期为临床工作提供必要的理论支持.1 资料和方法1.1 临床资料:收集我院2007年1月至2008年12月恶性胸腔积液患者75例作为实验组,临床随访资料均完整,年龄35~75岁,平均年龄64.9岁,其中男性56例,女性19例.胸腔积液均经常规苏木素-伊红(HE)染色及免疫组织化学染色辅助诊断.而终由2位病理主治医师阅片而确诊.病理类型:腺癌69例,鳞癌6例.对照组选取30例结核性胸腔积液(良性胸腔积液)作为对照.实验组与对照组患者留取胸腔积液前均未进行任何治疗.
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原苏木素B对膀胱癌细胞BTT和T24的增殖抑制作用
苏木为豆科云实属植物苏木(Caesalpinia sappan L)的干燥心材,具有行血祛瘀,消肿止痛的功能。近年来的研究结果表明,苏木提取物对多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用[1-3]。原苏木素B是苏木中主要成分之一[4,5],也是中国药典中苏木药材的质量标准检测指标[6],目前尚未见到关于原苏木素B的抑癌作用报道,本文以小鼠膀胱癌细胞BTT和人膀胱癌细胞T24肿瘤细胞为靶细胞,观察离体条件下原苏木素B对靶细胞不同时间的抑制活性,以探讨原苏木素B的抗肿瘤生物活性。
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原苏木素B对肿瘤细胞BTT T24 Hela及SW480的抑制作用研究
苏木(Lignum Sappan)为豆科云实属植物苏木(Cae-salpinia sappan L)的干燥心材,收载于《中华人民共和国药典》2010版一部,具有行血祛瘀、消肿止痛的功能。近年来研究结果表明,苏木提取物对多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用[1,2]。原苏木素B是苏木中主要成分之一[3],也是中国药典药材质量标准中的检测指标[4],目前尚未见到关于原苏木素B的抑癌作用报道,本研究以多种肿瘤细胞为靶细胞,观察离体条件下原苏木素B在不同浓度下对靶细胞的抑制活性,以探讨原苏木素B的抗肿瘤生物活性。
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儿童肾母细胞瘤中CD99的表达及其临床意义
本文通过免疫组织化学染色方法检测CD99在肾母细胞瘤(WT)中的表达情况,探讨CD99在肾母细胞瘤的诊断和鉴别诊断中的应用价值,并进一步探讨肾母细胞瘤的发生机制及起源问题.1资料与方法1.1临床资料:收集山西省儿童医院泌尿外科2005年5月至2012年8月经治肾母细胞瘤病例32例,所有患者均不伴有综合征和其他泌尿生殖道畸形,其中肿瘤组织和瘤旁正常肾组织各取一块,其中瘤旁组织标本取自远离肿瘤组织约0.5~1.0 cm处有正常肾脏结构的组织.另取正常肾组织10例作为对照,标本来自因外伤切除的有正常组织结构的肾组织,每块组织大小约为1.5 cm×1.5 cm×0.5 cm,均用4%中性甲醛固定,分别进行苏木素-伊红(HE)染色和SP法免疫组织化学染色.