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肺癌不同组织类型灰度值的比较研究
近年来,我国肺癌的发病率和死亡率均呈明显上升的趋势.研究发现,细胞周期失控是细胞增殖失控而导致癌变的重要原因.而细胞周期蛋白D1 (cyclinD1)是近年来提出的重要的原癌基因,在细胞周期的调控中起关键作用.为了探讨细胞周期蛋白D1基因与肺癌的关系,本文进行了肺癌不同组织类型灰度值的比较研究.1材料与方法1.1研究对象收集肺癌住院病人并经手术后病理证实的肺癌石蜡包埋组织108例.本实验组男75例、女33例,其中包括鳞癌59例、腺癌33例、小细胞未分化癌16例.
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甲状腺肿瘤cyclin E蛋白与PCNA免疫组化的定量研究
近年来,随着人们对细胞周期的研究深入,人们逐渐认识到细胞周期的调控异常与细胞癌变密切相关,细胞周期蛋白(cyclin)及其依赖性激酶(CDKs)形成的复合物是细胞周期的核心调控装置[1],在cyclin家族中,cyclin E是其中较重要的一种[2],其含量异常不仅将导致细胞周期的调控失常,也与肿瘤细胞的增殖、发展相关.Wang以Western Blot法研究38例结直肠癌,发现35例癌组织的cyclin E水平显著高于癌旁粘膜,并同时平行应用增殖细胞核抗原(PCNA)测定增殖指数,发现41%的病例中增殖指数也同时增高,提示cyclin E可作为结直肠癌组织的又一细胞增殖指标.我们利用免疫组化和图像定量分析研究cyclin E在甲状腺"正常"与良恶性病变中的表达情况,并同时平行检测PCNA的表达,将两者对比分析,旨在探讨cyclin E与PCNA在甲状腺肿瘤中的相关性及cyclin E的异常表达.
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CDK4在子宫内膜癌组织中的表达及意义
CDK4是细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases,Cdks)家族的成员之一,是细胞周期G1期的正调控因子.哺乳动物细胞增生及分化的调节大部分发生于细胞周期G0/G1期和/或G1/S期的转变时期,CDK4作为G1期重要的调控因子,已发现它在多种肿瘤中出现表达异常[1].
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V79和V798细胞周期及其调控因子的差异比较
为了解V79和V79-8两种细胞周期及调控因子的差异,用[3H]胸腺嘧啶核苷参入法检测两种细胞,发现V79细胞无可检测到的G2期;V79-8细胞则同时缺乏可检测到的G1和G2期.流式细胞光度术显示,V79G1期细胞明显多于V79-8,表明两者在G1期调控上存在差异.比较两者G1期周期调控因子的mRNA表达水平发现,V79-8cyclin D1,cyclin D3和Id表达水平明显高于V79,这可能直接导致了两者G1的差异.
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RhoA/ROCKI信号通路在紫杉醇诱导宫颈癌细胞周期阻滞中的作用
目的 探讨RhoA/ROCKI信号通路在紫杉醇诱导宫颈癌细胞周期阻滞中的作用及其分子机制.方法 MTT法确定能引起细胞生长显著性抑制小浓度(1μmol/L)的紫杉醇.流式细胞仪检测细胞周期和RhoA 蛋白表达,Western blotting检测ROCKI、细胞周期蛋白(cyclins)及周期依赖性激酶(CDKs)的表达.结果 紫杉醇处理C33A细胞后,G2/M细胞数和RhoA/ROCKI蛋白表达显著性增加,并呈时间依赖性;而cyclin B1、A、D1和CDK1蛋白表达显著性降低.上述现象被RhoA抑制剂C3转移酶全部反转;却被ROCKI蛋白抑制剂Y-27632部分反转,但与对照相比差异仍显著.紫杉醇或RhoA/ROCKI抑制剂对CDK2的表达无显著性影响.结论 紫杉醇诱导了宫颈鳞癌C33A细胞的G2/M期阻滞,其机制与RhoA活性增强后抑制特异的cyclins和CDKs有关,而下游通路中ROCKI活性仅起到部分作用.
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周期蛋白E在73例食管鳞状细胞癌中的表达
细胞周期正常与否与细胞生长、分化、衰老及恶变密切相关,因此对细胞周期调节因子的研究倍受学者们关注[1-4].细胞周期蛋白E(cyclin E)是调控细胞周期的重要因子,它们在食管癌发生发展及浸润过程中的表达报道尚少.我们取食管正常黏膜、炎性增生黏膜及鳞癌标本共计103例,进行cyclin E检测,为研究食管癌的发生、发展提供资料.
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软组织平滑肌肉瘤中细胞周期蛋白D1基因扩增分析及蛋白表达检测
我们采用差异聚合酶链反应(differential PCR,DPCR)检测软组织平滑肌肉瘤(LMS)中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)基因CCND1的扩增情况,并应用免疫组织化学方法检测cyclin D1表达,以期了解二者的关系.
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细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白质依赖激酶4在去甲二氢愈创木酸抑制恶性胶质瘤细胞增殖中的作用
近年来发现去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid, NDGA)能阻止多种肿瘤的发生和抑制其细胞的增殖[1-3],但机制不清.我们检测了NDGA对SHG-44细胞细胞周期蛋白D1(cyclin D1)基因的蛋白表达及细胞周期蛋白质依赖激酶4 (cyclin-dependent kinase 4,CDK4)活性的影响,旨在探讨NDGA抑制SHG-44细胞增殖的分子机制.
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细胞周期蛋白D1和bcl-2蛋白在鼻咽区非霍奇金淋巴瘤中的表达及其与细胞增殖和凋亡的关系
我们选择了细胞周期蛋白(cyclin)D1蛋白和bcl-2蛋白及增殖和凋亡指数,分别从淋巴瘤的增殖和凋亡两方面进行观察,以探讨该指标在鼻咽区非霍奇金淋巴瘤中的表达水平及其意义.
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p53及p21蛋白在胆囊癌及肝外胆管癌的表达
p21WAF1(p21)是细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinases, CDKs)抑制蛋白,为野生型p53基因下游激活产物.p53突变及p21蛋白异常表达在肿瘤的发生发展中起重要作用,见于多种人类恶性肿瘤[1,2].我们应用免疫组织化学的方法检测胆囊癌及肝外胆管癌组织中p53及p21的表达情况,探讨p53及p21蛋白表达的意义以及与临床病理指标的关系.
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细胞周期蛋白D1、p21WAF1蛋白和增殖细胞核抗原在乳腺癌的表达及与淋巴结转移和预后的关系
我们在以往研究[1]的基础上,检测了乳腺癌组织中细胞周期蛋白(cyclin)D1、p21WAF1蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达以及有cyclin D1过表达乳腺癌淋巴结转移灶中cyclin D1的表达,以探讨其特别是cyclin D1在乳腺癌发生发展中的作用及其与淋巴结转移关系和预后意义.
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套细胞淋巴瘤组织细胞周期蛋白D1免疫组织化学染色方法的优化及其在病理诊断中的意义
目前,利用常规染色方法,大部分实验室使用的细胞周期蛋白(cyclin) D1抗体虽然能在许多肿瘤(如乳腺癌)中准确地标记出相应的蛋白,但套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)肿瘤细胞的显色多位于胞质和胞膜,而事实上cyclin D1应位于核内.为了解决MCL诊断中的难题,我们参考倪灿荣介绍的方法[1,2],对美国 Neomarker公司生产的cyclin D1抗体的染色方法进行了探索,发现在不同的情况下有不同的着染方式,进而摸索出了一套稳定且简单易行, 针对MCL肿瘤细胞的cyclin D1免疫组织化学染色方法.使其在MCL的诊断和鉴别诊断中发挥出应有的作用.
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p15、细胞周期蛋白D1和转移生长因子β1在非小细胞肺癌中的表达及其意义
一、材料与方法1. 材料:实验材料取自内蒙古医学院病理教研室在1996~1998年间的病理组织存档蜡块,共165份.按照1980年WHO肺癌分类标准进行组织学分类,并均经病理证实.其中鳞癌80例,腺癌49例,不典型增生19例,鳞状上皮化生17例;在129例非小细胞肺癌中,同一病例手术切取标本存档蜡块不仅有肺癌组织蜡块也有淋巴结组织蜡块;其中淋巴结组织经HE染色证实有淋巴结转移的35例,无淋巴结转移的28例.其余66例中,或同一病例手术切取标本存档蜡块仅有肺癌组织而无淋巴结组织,或同一病例标本存档蜡块中虽有淋巴结组织,但经HE染色证实为纤维化淋巴结组织.
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细胞周期蛋白D1表达、聚合酶链反应及荧光原位杂交检测t(11;14)(q13;q32)易位在套细胞淋巴瘤诊断中的应用
细胞遗传学和分子遗传学的研究证实,70%~80% 套细胞淋巴瘤(MCL)中可以检测到t(11;14)(q13;q32) [1-3],易位使位于11q13上的bcl-1癌基因(也称为PRAD1,parathyroid adenomatosis,甲状旁腺腺瘤病或CCND1)处于14q32上IgH基因增强子的调控下,从而被激活,使其编码的细胞周期蛋白(cyclin) D1过度表达.这种易位在其他小B细胞淋巴瘤中极其罕见,所以通过免疫学和分子遗传学方法检测cyclin D1表达和t(11;14)(q13;q32)可作为区别MCL和其他小B细胞性淋巴瘤的重要手段.我们采用免疫组织化学检测cyclin D1蛋白表达,用聚合酶链反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)分别检测t(11;14)(q13;q32),以比较三种方法的敏感性和优劣点,探讨如何合理应用组织学、免疫组织化学和分子遗传学方法为日常病理诊断MCL提供帮助.
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幽门螺杆菌对AGS细胞p53、p21WAF1/CIP1和p27KIP1基因转录的影响
细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物(Cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKIs)负调控CDKs活性,主要有p16INK4a和p15INK4b及p21WAF1/CIP1和p27KIP1等两类.p53基因亦可调控细胞周期及凋亡,异常的细胞凋亡与消化道等肿瘤密切相关.本文采用MP-RT-PCR检测了cagA+/CagA+和cagA-/CagA- Hp菌株感染前后AGS细胞p53、p21WAF1/CIP1和p27KIP1转录水平的改变,以期了解Hp诱导细胞癌变和细胞周期阻滞的关系及可能的机制.
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HCMV IE2蛋白调控功能研究新进展
人巨细胞病毒( human cytomegalovirus , HCMV)属于β疱疹病毒亚科,是人类疱疹病毒中大的一组病毒。在人群中,HCMV感染相当普遍,大多数感染呈临床隐性感染或潜伏感染;但在新生儿、免疫抑制或免疫功能低下的人群中则可引起临床显性感染,出现明显症状,甚至发生致死性疾病。而在孕妇,则可发生垂直传播,导致死胎、畸形以及婴幼儿神经系统发育障碍、智力低下等。 HCMV基因组全长超过240 kb的双链DNA,整个基因组含有250个开放阅读框( ORF )。在病毒感染过程中, HCMV基因的表达表现一定的时序性,可分为早早期( IE )、早期( E)和晚期( L)基因。病毒穿入细胞后, IE基因被宿主细胞因子激活并早表达,编码两种重要的调控蛋白 IE1( IE72)和 IE2( IE86)。其中 IE2( IE86)蛋白是从 HCMV 基因组的开放阅读框UL122上翻译过来的,是一种重要的反式激活因子并在HCMV感染中发挥了重要作用。已有研究表明,IE2( IE86)能反式激活细胞周期蛋白cyclinE启动子,并能延缓宿主细胞进入S期[1-2]。近年有资料证实,IE2( IE86)调节许多与控制细胞周期相关的因子。 IE2( IE86)是一种重要的病毒蛋白质,而缺少IE2( IE86)的HCMV子代突变体不能进行复制。下面主要就IE2( IE86)蛋白对病毒蛋白表达调控的作用作一综述。
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Cyclin D1表达与肿瘤关系的研究进展
近年研究表明细胞周期紊乱与细胞癌变已不再是两个分割的细胞事件.在细胞发生恶性转化过程中,除了癌基因/抑癌基因的正负调节失控外,细胞周期调控因子也是参与癌变过程的调节位点.已知的细胞周期蛋白(cyclins)至少有11种:cycli以、B1-2、C、D1-3、E、F、G及H.其中与肿瘤关系密切的是D型cyclin.Cyclin D1作为细胞周期调节因子之一,其过度表达是多种人类原发性肿瘤的特征,对肿瘤的诊断及预后具有重要意义.
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KLF5转录因子对于人类癌症的重要作用及影响
KLF5,又称为BTEB2[1]和IKLF,属于KLF家族。 KLF5在不同组织不同层次中有着广泛的表达。作为一个基本的转录因子,KLF5调控很多重要靶基因如 cyclinD1,细胞周期蛋白 B, PDGFA以及FGF-BP。 KLF5在细胞周期调控,细胞凋亡,迁移和分化中具有必不可少的作用。大量证据表明,遗传变异的SP/KLF( Kruppel样因子)转录因子参与各种人类疾病的发展,包括癌症和心血管疾病。 KLF家族几个成员,如KLF2,KLF4,KLF5, KLF6,KLF8,已证实在各种癌症中发挥着至关重要的作用。近年来,对于 KLF5的研究已经有了显著发展。本文主要阐述KLF5与人类癌症的关系,并提出今后的研究方向。
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Skp2和p27kip1在浆液性卵巢肿瘤组织中的表达与临床意义
p27基因是近年来发现的一种抑癌基因,目前认为其编码的产物p27kip1蛋白为一种细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂,可以通过多种方式参与细胞周期调控,阻止细胞从G1期到S期的转变,终抑制细胞分裂、增殖,促进细胞分化、凋亡.Skp2作为泛素蛋白酶体途径的底物识别序列,因能泛素化降解p27kip1而与肿瘤关系密切.二者的异常表达与肿瘤组织发生发展以及生物学行为有着密切的关系,是判断肿瘤恶性程度、转移与预后的重要参考指标.
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肝硬化大鼠肝部分切除后肝细胞生长周期的调控
目的:本实验通过检测肝硬变大鼠肝部分切除术动物模型肝组织内细胞周期蛋白(Cyclin)A、B和D的表达以及癌基因调节蛋白的变化,研究Cyclin及其癌基因调节蛋白在肝细胞再生中的作用.方法:采用CCL4制作大鼠肝硬模型,切除大鼠肝脏的左叶和中叶.采用免疫组化和原位杂交的方法,观察大鼠肝脏Cyclin A和Cyclin D及相关因子变化.结果:术后肝细胞Cyclin A和D mRNA的表达和分布基本相似,主要在胞质和胞核内.在中央静脉等静脉血管的周围,其阳性表达量高且表达出现时间早,在术后6 h已有明显的表达出现.在肝细胞再生过程中,Cyclin A和DmRNA的表达明显,呈局灶样分布.Cyclin B和Rb蛋白主要分布在细胞核和胞质内,在术后6-24 h,Cyclin B和Rb在肝细胞有较强的阳性表达.P27的表达在术后24 h开始出现,术后1 wk点显著,RB蛋白也呈现较强的阳性表达.结论:肝细胞再生机制可能是通过多种途径共同作用的结果.