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Cx43对乳腺癌细胞侵袭和迁移及细胞间隙通讯的影响
目的：探讨 Cx43对乳腺癌侵袭、迁移以及细胞间隙通讯功能的影响。方法：用脂质体转染法将 Cx43质粒、Cx43 siRNA 及阴性对照转染入人乳腺癌细胞株 MDA - MB -231。细胞黏附实验、Transwell 试验检测细胞黏附、侵袭和迁移能力。分子生物学方法检测 MMP -2、MMP -9、BRMS -1的表达。荧光染料传输实验检测不同 Cx43表达的细胞间隙通讯的功能。结果：细胞黏附实验结果表明相较于野生型细胞，Cx43 siRNA 组黏附能力（0.43±0.07）降低（t =20.801，P =0.002），Cx43质粒组黏附能力（1.63±0.26）增高（t =5.917，P =0.027）。Transwell 实验表明相较野生组，Cx43质粒组侵出小室的细胞数增加（侵袭：1.25±0.04，t =16.339，P =0.004；迁移：1.33±0.02，t =22.770，P =0.002），而 Cx43 siRNA 组侵出小室的细胞数减少（迁移：0.84±0.04，t =11.139，P =0.008；侵袭：0.79±0.04，t =5.743，P =0.029）。分子生物学检测发现 Cx43质粒组 MMP -2、MMP -9表达增高，BRMS -1表达降低，而 Cx43 siRNA 组 MMP -2、MMP -9表达降低，BRMS -1表达增高。染料传输实验证实相较野生组传输能力，Cx43质粒组传输作用增强；Cx43 siRNA 组细胞间的传输作用减弱。结论：Cx43对乳腺癌细胞侵袭及迁移能力存在正调控。这一调控能力可能通过 GJIC 实现。
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Cx43蛋白在宫颈癌细胞中的表达及其对细胞通讯功能的影响
目的探讨细胞间隙连接蛋白Cx43在人子宫颈癌细胞系HeLa中表达, 及其对细胞间隙连接通讯的影响. 方法应用流式细胞仪以及Lucifer Yellow划痕标记荧光传输技术,研究维甲酸作用对HeLa细胞Cx43蛋白表达,以及细胞生长状态和间隙连接通讯功能的调节作用. 结果 HeLa细胞经维甲酸处理后, 流式细胞仪分析, Cx43蛋白荧光强度明显增强, Cx43蛋白表达阳性细胞计数率由1.9%上升至26.3%;HeLa细胞生长明显受抑 ;细胞间隙连接通讯功能得到恢复. 结论维甲酸可通过上调Cx43蛋白在H eLa细胞中的表达,使细胞间隙连接通讯功能得到恢复,实现对宫颈癌细胞恶性表型的逆转作用.
关键词： 间隙连接 子宫肿瘤 细胞间隙连接通讯 流式细 胞仪分析 划痕标记荧光传输技术 -
表皮生长因子通过间隙连接蛋白信号转导调节间隙连接通讯
细胞间隙连接通讯(GJIC)是细胞获取外界能量、信息的一种细胞间直接的通讯方式,其连接通道是一种亲水性的膜通道,允许细胞间分子量小于1KDa的离子、分子的交换和代谢.细胞膜通道的装配蛋白称细胞间隙连接蛋白(connexin,CX),通道的形成和启闭(gating process)受细胞内外的PH值、膜电压、膜脂及膜的流动性、Ca2+浓度、CX磷酸化等的调节.
