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慢病毒介导的HTRA1突变基因感染对人脑血管平滑肌细胞生物学特性影响
目的 探讨HTRA1基因及HTRA 1突变基因[1091 T>C(点突变)]慢病毒表达载体感染对人脑血管平滑肌细胞(HBVSMC)增殖、迁移及凋亡等生物学特性的影响. 方法 构建野生型HTRA 1基因及突变型HTRA 1基因慢病毒表达载体,并将其感染经培养和鉴定的HBVSMC,以空载体感染HBVSMC为对照组.采用CCK-8法连续5d检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞的迁移,流式细胞术检测细胞凋亡. 结果 与对照组相比,野生型HTRA 1基因慢病毒组细胞增殖无明显变化,至第3天起突变型HTRA 1基因慢病毒组细胞增殖减缓,差异具有统计学意义(P<0.05).对照组、野生型HTRA1基因慢病毒组、突变型HTRA1基因慢病毒组细胞迁移率分别为0.474±0.079、0.612±0.037、0.283±0.064,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组细胞凋亡率(3.68%±0.23%)相比,野生型HTRA 1基因慢病毒组细胞凋亡率(3.13%±0.07%)降低,差异有统计学意义(P<0.05);突变型HTRA1基因慢病毒组细胞凋亡率(3.70%±0.20%)增多不明显,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 突变型HTRA1基因感染HBVSMC后引起该细胞增殖能力和迁移活性减弱,但对细胞凋亡无影响.
关键词: 人脑血管平滑肌细胞 HtrA丝氨酸蛋白酶1 慢病毒表达载体