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  • 重组腺相关病毒-NT4p53(C22)Ant对肝癌荷瘤小鼠的治疗作用

    作者:周琦;纪宗正

    目的 研究NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒(rAAV)对肝癌荷瘤小鼠的治疗作用.方法 构建NT4p53(C22)Ant,将其亚克隆于重组腺相关病毒载体中,经293细胞包装、扩增构成具有感染性的rAAV-NT4p53(C22)Ant,将小鼠源的H22肿瘤细胞接种于ICR小鼠皮下,成瘤后根据瘤体质量、抑制率、动物生存时间及病理组织学结果,评价rAAV-NT4p53(C22)Ant治疗肝癌细胞(H22)的移植瘤作用.结果 一次性肿瘤局部注射NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒100 μl/次(2x1011 pfu/ml)接种于ICR荷瘤小鼠皮下的H22肝癌细胞,12只小鼠7只瘤块消失,1只死亡,瘤体的质量明显减小,生存时间大于70d;而对照组中,7只小鼠均死亡,死亡率100%,生存时间约为30 d,较治疗组明显缩短.治疗组肿瘤抑制率大于90%,较未治疗和注射空病毒对照组有显著性差异,组织学观察rAAV-NT4p53(C22)Ant治疗组较对照组肿瘤细胞明显减少.结论 NT4p53(C22)Ant重组腺相关病毒可以有效地杀伤小鼠体内的H22肝癌细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长,生存期延长.

  • NT4p53(C22)Ant重组腺伴病毒对人Miapaca-Ⅱ胰腺癌细胞的杀伤作用

    作者:周琦;纪宗正

    目的: 研究NT4p53(C22)Ant重组腺伴病毒对人Miapaca-Ⅱ胰腺癌细胞杀伤作用. 方法: 构建NT4p53(C22)Ant,将其亚克隆于腺伴病毒载体中,经293细胞包装、扩增构成具有感染性的重组腺伴病毒AAV-NT4p53(C22)Ant,转染人胰腺癌Miapaca-Ⅱ细胞,经光镜下观察、MTT比色试验、PI染色实验及乳酸脱氢酶释放检测(LDH),观察AAV-NT4p53(C22)Ant对细胞的杀伤作用. 结果: 光镜下可见随AAV-NT4p53(C22)Ant感染Miapaca-Ⅱ细胞时间延长,肿瘤细胞数目明显减少;MTT实验检测发现细胞存活率明显降低(P<0.05);流式细胞检测凋亡细胞数目较对照组及空病毒组增加(P<0.05);LDH检测培养基中LDH只有轻度增加(P>0.05). 结论: 重组腺伴病毒NT4p53(C22)Ant对胰腺癌细胞有杀伤作用,并且是通过引起细胞凋亡而实现的.

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