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人RPP蛋白文献资料
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人RPP蛋白与HCV RNA体外相互作用的测定
目的检测人RPP蛋白与HCV RNA体外的相互作用.方法将人RPP各基因分别克隆至pET28a载体,在大肠杆菌中(BL21)表达的目标蛋白经蛋白纯化仪纯化获得人RPP蛋白;通过体外转录制备32P标记的HCV RNA片段作为探针,利用紫外交联试验研究各种人RPP 蛋白与HCV RNA的体外相互作用.结果 成功表达纯化了8种人RPP蛋白,紫外交联试验结果显示:Rpp20、Rpp21、Rpp29和Rpp304种蛋白可分别与HCV RNA片段结合,Rpp21和Rpp29结合力较强,Rpp20和Rpp30结合力则相对较弱,而其余几种RPP蛋白(包括Rpp14、Rpp25、Rpp40和Pop5)不能与HCV RNA发生结合.结论 人RPP蛋白可与HCV RNA片段在体外直接结合,推测这些RPP蛋白在人RNase P切割HCV RNA的过程中起重要作用.
关键词: 丙型肝炎病毒 人RPP蛋白 RNA-蛋白质相互作用 体外