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EGS文献资料
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丙肝病毒核心基因克隆载体pGEM-HCV/core的构建
目的 构建丙肝病毒核心基因克隆载体pGEM-HCV/core,为进一步研究外部引导序列(external guide sequence, EGS)引导核糖核酸酶P在RNA水平阻断丙肝病毒核心基因的表达做好前期基础.方法 将含HCV全长基因的pBRTM/HCV1-301l质粒于大肠杆菌JMl09内扩增;提取pBRTM/HCV1-301l质粒;从pBRTM/HCV1-301l质粒中PCR扩增出HCV核心基因片段并将其插入pGEM-3Z克隆载体;以得到重组的pGEM-HCV/core克隆载体;后EcoR I and Hind III双酶切鉴定HCV核心基因克隆载体.结果 pGEM-HCV/core克隆载体经双酶切、凝胶电泳证明插入片段与HCV 核心基因片段大小相符;经测序证明其插入序列与HCV core基因序列一致.结论 成功构建了HCV 核心基因的克隆载体pGEM-HCV/core.
