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尖锐湿疣挖空细胞的原位杂交与电镜观察
目的:探讨尖锐湿疣挖空细胞的性质和形态变化,为病理诊断提供信息.方法:采用东山区人民医院尖锐湿疣活检50例.每例分别取材作透射电镜、原位杂交组化和HE染色光镜观察,将电镜所见的结果与原位杂交组化所得信息进行对比分析.结果:发现所有挖空细胞核内均有HPV-DNA存在,电镜下核内均含有多少不等染色质间颗粒,其中3例含有病毒颗粒.核皱缩,染色质边集,深染,核仁消失.在HE切片上,挖空细胞单个、灶状或成片分布,核呈星形或毛虫样的形态特征.结论:挖空细胞具有HPV感染引起表皮细胞凋亡形态特征,据此特征即可确定尖锐湿疣的病理诊断.
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大鼠下丘脑室旁核对神经免疫调节的基因调控研究
下丘脑室旁核(paraventricular nucleus o f hypothalamus,PVN)是神经免疫调节的整合性中枢,为了探讨PVN 内肽能神经元对免疫调节的基因调控,本研究采用SD大鼠100只,随机分为免疫增强、免疫抑制及其对照组各25只,分别用皮下注射牛血清白蛋白(BSA)或腹腔注射环磷酰胺建立免疫增强和免疫抑制动物模型,观察血清IgG及IL-2动态变化,以了解免疫应答过程.在免疫反应开始增强(E1组)/或开始抑制(I1组)及免疫反应达高峰( E2组)/或抑制低(I2组)时灌注取脑,冰冻切片(30μm),以地高辛标记的AVP cDNA寡核苷酸为探针作原位杂交组化反应,碱性磷酸酶底物NBT/BCI P显色,杂交信号经Mias图像分析系统分析.结果:1)各组大鼠PVN全长均可见AVP mRNA阳性细胞,以尾段及外侧的大细胞为主,小细胞较少.杂交信号不均匀地分布于核周体内.2)AVP mRNA阳性物在PVN内所占的平均面积在各实验组与对照组(C组)之间及各实验组之间的差异均具有显著性(P＜0.05),杂交信号的平均面积与免疫反应强度成正比,即免疫反应达高峰时,杂交信号所占的面积大,抑制低时所占面积小.各组的平均面积(μm2)分别为E1组＝2427.27±25.88, CE1组＝2123.46±59.55;E2组＝2685.50±61.47,C E2组＝2162.06±62.28;I1组＝1986.76±46.13,CI 1组＝2135.25±60.45;I2组＝1783.61±35.32,IC 2组＝2160.58±58.47;3)PVN内AVP mRNA杂交信号的平均灰度在各实验组与对照组之间及各实验组之间均有显著性差异(P＜0.05),杂交信号的平均灰度与免疫反应的强度成反比.各组的平均灰度分别为E1组＝137.74±1.4 7,CE1组＝146.75±1.90;E2组＝125.09±2.70,CE 2组＝149.76±2.59;I1组＝151.99±1.32,CI1组＝14 5.68±1.54;I2组＝162.62±1.88,IC2组＝150.89± 2.35.AVP mRNA杂交信号的阳性反应平均面积和杂交信号的平均灰度均能反应 AVP mRNA的含量.本实验结果揭示:随着免疫反应的逐渐增强,PVN内参与免疫反应的AVP神经元的转录水平逐渐增高.说明大鼠PVN内AVP神经元在基因水平参与对机体免疫功能的调控.
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尖锐湿疣的原位杂交组化和免疫组化对比研究
目的寻找尖锐湿疣的一种较确切的病理诊断方法.方法对48例尖锐湿疣(CA)档案蜡块作连续切片,分别作HE、原位杂交组化HPV-DNA和免疫组化HPV-Ag(HPV衣壳抗原)染色,在光镜下对比观察,统计分析.结果 30例免疫组化阳性病例,进行原位杂交组化和重复免疫组化染色均为阳性;18例免疫组化阴性病例,原位杂交组化13例(72.2%)阳性,重复免疫组化染色5例(27.2%)阳性;在连续切片上,显示原位杂交组化比免疫组化的阳性细胞明显增多.结论 HPV原位杂交组化特异性好,灵敏度高,方法与免疫组化相似,可以在临床病理科推广应用.
