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前列腺癌miRNA表达谱及miR-96在氧化应激信号通路中的作用
[目的]检测miRNA在前列腺癌与正常前列腺组织的表达差异,并探讨表达异常的miRNA在前列腺癌发病中的作用.[方法]前列腺癌和正常前列腺组织样品(100 mg),Trizol法提取RNA,应用聚合酶链反应(PCR)芯片检测miRNA的表达;同时以250 μmol/L的过氧化氢(H2O2)刺激前列腺癌PC-3细胞4h,继续正常培养12h.检测不同时间点细胞内活性氧(ROS)水平,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-96在各组细胞中的表达.[结果]与正常前列腺组织相比,前列腺癌组织中miR-144、miR-216a上调5.9倍,miR-96上调30.4倍,miR-488、miR-873下调到4.9%,差异有统计学意义(P<0.05).PC-3细胞内ROS为RWPE-l细胞的5.2倍(P<0.05),miR-96在PC-3细胞中的表达为RWPE-1细胞的15.4倍(P<0.05).H2O2刺激PC-3细胞1、4h后,胞内ROS为对照组的4.3、6.4倍(P均<0.05),miR-96表达水平为对照组的10.2、18.9倍(P均<0.05);10、16h组胞内ROS为对照组的2.5倍、1.2倍,miR-96表达水平为对照组的2.7、1.9倍(P均>0.05).[结论]在前列腺癌组织中发现了若干有表达差异的miRNA;miR-96参与前列腺癌细胞的氧化应激信号途径,可能是防治前列腺癌的重要分子靶点.
关键词: 前列腺癌 miRNA PCR芯片 氧化应激 miR-96