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氧化应激对宫旁韧带成纤维细胞细胞弹性蛋白及转录因子NF-E2相关因子2表达的影响
目的 用H2O2诱导人宫旁韧带成纤维细胞活性氧簇(ROS)产生,建立氧化应激细胞模型,检测氧化应激对细胞弹性蛋白(elastin)及转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)表达的影响.方法 根据H2O2造模结果,选取导致细胞ROS产生的小和大有效浓度的H2O2,即0.2 mmol/L H2O2和0.8 mmol/L H2O2来模拟细胞较低、较高水平的氧化应激,以正常培养的人宫旁韧带成纤维细胞作为对照组.观察不同程度氧化应激对细胞elastin及Nrf2蛋白表达的影响.结果 根据造模结果显示0.2 mmol/L和0.8 mmol/L H2O2可造成细胞较低和较高水平的氧化应激,Western blot检测不同程度氧化应激作用下细胞elastin及Nrf2的表达结果显示低水平氧化应激组elastin的表达与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),高氧化应激组elastin的表达较对照组下降,差异有统计学意义(P＜0.01);而低、高氧化应激组中Nrf2表达均下降,且高氧化应激组下降更明显(P＜0.01).结论 氧化应激可导致细胞Nrf2表达下降,且一定程度的氧化应激可抑制细胞elastinde表达,为后期探讨氧化应激在盆腔器官脱垂发病中的作用机制提供实验基础和新的思路.
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弹性蛋白及基质金属蛋白酶-9在眼袋脂肪及眶隔组织的表达及临床意义
目的:通过研究弹性蛋白(elastin)及基质金属蛋白酶(MMP-9)在眼袋脂肪及眶隔组织的表达,探讨眼袋的发病机制. 方法:选取我科近2年就诊的行眼袋抚平术及重睑成形术的患者各30例,分为眼袋组及重睑组,将行眼袋矫正手术及重睑手术去除的眶脂肪冰冻保存,部分眶隔组织蜡块包埋,分别应用酶联免疫吸附法及免疫组化检查弹性蛋白的表达及含量. 结果:眶脂肪组织Elastin含量在眼袋组明显低于重睑组(t = 11.75,P < 0.01),而MMP-9含量在眼袋组明显高于重睑组(t = -9.21,P < 0.01);Elastin和MMP-9均有表达,阳性反应物呈深棕色及浅棕色,主要表达于细胞膜,部分表达于细胞浆,每1 000个细胞阳性表达数Elastin在重睑组高于眼袋组(t = 10.25,P < 0.01),MMP-9在重睑组低于眼袋组(t = -31.11,P < 0.01). 结论:眼袋眶隔及脂肪组织内的MMP-9含量明显增加,Elastin含量明显下降,表明眼袋的发病机制主要与眶隔组织松弛、弹性下降有关.
