首页 > 文献资料
-
高龄肝脏与低龄肝脏生理差异的实验性研究
目的 探讨生理情况下高龄肝脏与低龄肝脏的区别,寻找可以区分高龄肝脏与低龄肝脏的指标.方法 取6周龄SD大鼠和9月龄以上退役SD大鼠各5只,采用超声弹性成像检测肝脏硬度、全自动生化检测仪检测血清学指标、H&E染色观察肝脏形态结构、Sirius Red染色及Masson染色检测胶原纤维的沉积、免疫组化SP法检测TGF-β1、p16INK4a、SMP-30蛋白的表达.结果 高龄组和低龄组之间血清学指标、胶原纤维沉积及TGF-β蛋白、p16INK4a蛋白的表达无差异;超声弹性成像检测低龄组Vs值为(1.21 ±0.09) m/s,高龄组为(1.32±0.05) m/s (P=0.033);SMP-30蛋白低龄组IOD值为138244.988±51286.257,高龄组为116240.170±35017.936 (P=0.007).结论 高龄大鼠与低龄大鼠肝脏的硬度及SMP-30蛋白的表达存在差异,随着年龄的增加肝脏硬度增大,SMP-30蛋白表达下降.肝脏硬度与SMP-30蛋白可作为区分高龄肝脏与低龄肝脏的指标.
-
肝癌相关抗原SMP-30基因工程菌培养条件的优化
目的:对重组人肝癌相关抗原SMP-30基因工程菌的培养条件进行研究,确定佳培养方案以提高基因工程蛋白表达产量.方法:通过SDS-PAGE蛋白质电泳和电泳图谱扫描来分析诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导时间长短、培养温度和培养基成分对基因工程菌TB1表达肝癌相关抗原SMP-30的影响.结果:当工程菌培养条件合适,即在吸光度值A600为0.5左右时加入IPTG至终浓度0.5 mmol/L,30℃培养7 h,其表达的SMP-30融合蛋白可占细体总蛋白量的46.1%.将工程菌培养温度从37℃降到30℃时,表达蛋白质的可溶性部分可提高10%～15%.结论:通过对重组人肝癌相关抗原SMP-30基因工程菌的培养条件进行优化,获得较满意的应用工程菌表达肝癌相关抗原SMP-30的培养条件,为基因工程下游技术奠定了基础.
-
人肝癌相关抗原SMP-30在肝癌中的表达及意义
目的:通过免疫组化方法检测人肝癌(HCC)中衰老标记蛋白-30(SMP-30)的表达,探讨其在HCC发生、发展中的作用及临床意义.方法:制备48例人HCC及相应的癌旁组织、6例正常人肝组织和1例正常人肾组织的石蜡切片.采用免疫组化SABC法,检测SMP-30在HCC和癌旁组织中的表达,结合临床资料进行统计分析.结果:初步发现HCC癌旁组织的SMP-30表达高于HCC组织(P＜0.05).SMP-30的表达与HCC患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分级、肝硬化背景、HBsAg和AFP检测情况未见相关性(P＞0.05).结论:SMP-30与HCC的发生、发展有关,其过度表达可能是HCC的早期性、保护性事件.
-
大鼠栓塞肺组织中代谢相关酶类的表达变化
目的 研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中部分代谢相关酶类的表达变化.方法 建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1、8、24、48 h提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCR的方法研究3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、儿苯酚胺氧位甲基转移酶(COMT)、衰老标记蛋白-30(SMP-30)、3-α-羟类固醇脱氢酶(SDH)和延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH)在mRNA水平的表达变化;采用Western-blot方法进一步验证GAP-DH和COMT在蛋白水平的表达变化.结果 大鼠急性肺栓塞后在不同的时间点,GAPDH、COMT、SMP-30、SDH和FAH的mRNA水平均逐渐减低,GAPDH和COMT在蛋白水平的表达也出现逐渐减低现象.结论 大鼠急性肺栓塞后肺组织内大多数上述代谢相关蛋白均出现表达减低的现象.研究这些酶类的生物学功能和表达变化,将为我们阐明急性肺栓塞病理生理变化的分子机制奠定基础.
