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textilinin-1巴斯德毕赤酵母文献资料
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纤溶酶抑制剂textilinin-1在毕氏酵母的表达及应用
目的:研究真核表达的textilinin-1蛋白纯化品对纤溶酶抑制作用。方法根据textilinin-1的天然氨基酸序列,按照毕氏酵母偏好密码子进行优化,合成 textilinin-1基因,重组到pPICZα载体上,并转化至 Pichia p.X-33菌种中,实现高效分泌表达,并进行重组 textilinin-1活力单位的定义及小鼠断尾试验。结果通过高密度发酵及两步柱层析纯化,终从10 L发酵液中得到6 g纯度达97.0%以上的重组textilinin-1。活性研究表明,重组 textilinin-1对纤溶酶的活性具有抑制作用,并对 tPA 所致的小鼠出血倾向有一定的抑制作用。结论重组 textilinin-1可抑制纤溶酶活性,并对纤溶性出血小鼠模型有止血作用,具有开发为止血药的潜力。
关键词: textilinin-1巴斯德毕赤酵母 克隆和表达 偏好密码子 止血药