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重组定点突变巴曲酶文献资料
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地高辛标记探针检测重组定点突变巴曲酶蛋白宿主DNA残留量的研究
目的 建立检测重组定点突变巴曲酶原液中外源性DNA残留量的方法.方法 从重组定点突变巴曲酶酵母工程菌提取基因组DNA作为模板,制备地高辛标记探针.此探针与样品进行点样杂交,并进行显色反应.结果 3批重组定点突变巴曲酶原液中,每人份剂量的宿主DNA残留量均＜10 ng.结论 该方法检测灵敏度较好,特异性较强,可用于重组定点突变巴曲酶的检测.
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重组定点突变巴曲酶酶学性质研究
目的 对重组定点突变巴曲酶的酶学性质进行研究,为开发成临床用药奠定基础.方法 测定不同的温度、pH缓冲液和金属离子等条件对重组定点突变巴曲酶活性的影响.结果 重组定点突变巴曲酶的适pH值在6.5～7.5之间.该酶在50℃以下活力保持90%以上,但当温度超过60℃时,该酶已完全失活.Ca2+和Na+离子对酶的稳定性无明显影响,而Mg2+、K+、Mn2+离子则表现为激活作用,Zn2+、Cu2+、Fe2+、Co+离子则表现为明显的抑制作用.结论 重组定点突变巴曲酶在中性条件下比较稳定,它不耐高温,金属离子对其活性有一定的影响.
