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应用MALDI-TOF MS 技术快速鉴定布鲁菌
目的 利用MicroflexTMLT 型MALDI-TOF质谱仪建立布鲁菌蛋白质量指纹图谱数据库,并评估其在布鲁菌临床分离株鉴定中的应用价值.方法 2013年10月该院微生物实验室分离到1株疑似布鲁菌,经VITEK?2 Compact全自动微生物分析系统及16S rDNA 基因测序确认为马耳他布鲁菌,按照厂家推荐方法自建了布鲁菌蛋白质量指纹图谱数据库.对2015年4月及2016年6月该实验室分离到的2株疑似布鲁菌进行革兰染色、柯氏染色及氧化酶、触酶、快速尿素酶等生化反应试验.使用MicroflexTMLT型质谱仪收集这2株及外院3株布鲁菌疑似菌株的质量图谱,比对分析图谱时在MALDI Biotyper数据库基础上添加自建数据库,同时使用16S rDNA基因测序法鉴定上述细菌.结果 按照自建库推荐操作流程成功获得了基于BRUxh1的自建布鲁菌质量指纹图谱数据库. 2015年4月及2016年6月分离到的布鲁菌疑似菌株,涂片染色镜检均为革兰阴性短小球杆菌,氧化酶阳性,触酶阳性,尿素酶阳性(5 min内).这5株疑似菌株的质谱鉴定结果均为布鲁菌(质谱评分分别为2.407 、2.475 、2.436 、2.466 、2.397) ,16S rDNA 基因测序确认这5株细菌为布鲁菌.其中来自外院的2株细菌于外院VITEK?2 Compact系统鉴定时均错误地鉴定为吉氏玫瑰单胞菌.结论 联合MALDI Biotyper数据库与自建布鲁菌数据库对临床分离株进行质量图谱比对分析,可以实现对布鲁菌属细菌的准确鉴定,该方法快速、灵敏,对布鲁菌病的临床快速诊断具有较高的应用价值.
关键词： 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 自建库 布鲁菌 鉴定 -
ILASⅡ系统工作经验两点谈
举例介绍通过修改ILASⅡ数据库属性可以改变数据库所属分系统,从而共享各分系统的功能以及建立ILASⅡ自建库网络查询的方法和步骤.
