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肾素血管紧张素-醛甾酮系统文献资料
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醛固酮对肝星状细胞激活蛋白- 1通路调控的体外研究
目的探讨醛固酮(Aldo)对肝星状细胞(HSC)激活蛋白-1(AP-1)信号转导通路的影响.方法采用HSC T6细胞株,分别予Aldo 1μmol/L处理10、30、60、120、180 min,蛋白质印迹法检测磷酸化P42/44蛋白的表达.另外,观察细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂-U0126,抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)(均先预处理60 min,再予Aldo刺激)和肿瘤坏死因子α(TNF α)对磷酸化P42/44蛋白表达的影响.Aldo在干预30、60、120、240 min后,电泳迁移率变更分析(EMSA)检测AP1 DNA结合活性的变化;予U0126和NAC干预后,EMSA检测AP-1 DNA结合活性;逆转录聚合酶链反应检测α1-1型前胶原基因的表达.结果 Aldo可诱导磷酸化P42/44的表达,并呈时间依赖性,10 min达到峰值,之后逐渐减低.U0126可抑制磷酸化P42/44的表达.Aldo可增强HSC的AP-1的DNA结合活性.U0126可以显著抑制Aldo诱导的AP-1的活化,NAC部分抑制Aldo诱导的AP-1的活化.Aldo可诱导α 1-1型前胶原mRNA的表达.U0126和NAC可显著抑制Aldo诱导的α 1-1型前胶原mRNA表达增强.结论 Aldo可经ERK通路诱导HSC AP-1结合活性增强.Aldo可经AP-1通路调控α 1-1型前胶原基因的表达.
关键词： 肾素血管紧张素-醛甾酮系统 醛固酮 肝纤维化 激活蛋白-1
