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三色荧光文献资料
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鼠疫耶尔森氏菌三色荧光定量PCR检测方法的建立
目的 建立一种三色荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法.方法 根据鼠疫耶尔森氏菌pPCP1质粒上的pk基因、编码F1抗原在pMT1质粒上的caf1基因以及菌体染色体上的3a基因序列,设计特异性的引物和不同荧光标记的Taqman荧光探针,优化反应体系和扩增条件,考察该方法检测的敏感度、特异性、重复性和稳定性,终建立三色荧光定量PCR检测方法.结果 本研究所建立的方法对鼠疫耶尔森氏菌DNA的扩增效率高,低检出限为1×102 copies/ml,特异性高,重复性的变异系数在合理范围内,稳定性好.结论 建立了一种同时检测鼠疫耶尔森氏菌pla、caf1和3a基因的三色荧光定量PCR方法,该方法敏感度和特异性高,能够实现快速检测的目的.
