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人牙囊干细胞文献资料
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体外共培养人牙髓干细胞对人牙囊干细胞增殖、成骨分化的作用
目的 通过体外建立人牙囊干细胞(human dental follicle stem cells,HDFSCs)和人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,HDPSCs)共培养体系,研究HDPSCs对HDFSCs增殖、成骨分化的作用.方法 ①利用改良的组织块-消化联合法、免疫组化方法、流式细胞术以及多向诱导方法对HDFSCs和HDPSCs进行分离、培养、鉴定;②采用0.4μm孔径的Transwell小室构建HDFSCs和HDPSCs体外共培养体系;③CCK-8测定HDFSCs增殖活性的变化;④与HDPSCs体外共培养1周,qRT-PCR检测HDFSCs几个标志性成骨基因:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、人类相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)以及Ⅰ型胶原(collagen type 1,Col-1)的表达情况.结果 ①成功分离、培养、鉴定HDFSCs和HDPSCs;②从第4天开始,共培养组HDFSCs的增殖活力明显高于对照组(P＜0.05);③与对照组相比,共培养组ALP、Runx2、OPN、BSP、C0l-1的相对表达量均明显增高(P＜0.05).结论 与HDPSCs共培养能增强HDFSCs增殖活力及成骨分化.
