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江西口岸首例输入性卵形疟原虫wallikeri亚种感染的PCR鉴定及序列分析
目的 对江西口岸1例输入性疟疾病例的血样本进行检测、确认.方法 利用普通PCR检测全血样本中疟原虫18S r RNA基因, 将得到的测序结果在NCBI数据库进行比对, 并结合吉姆萨染色镜检、胶体金快速检测和荧光定量PCR加以验证.结果 血涂片镜检并未发现疟原虫, 但胶体金快速检测结果为阳性.普通PCR扩增到18S r RNA基因特异性片段, 卵形疟原虫特异性引物扩增到阳性条带, 而恶性疟、间日疟和三日疟原虫特异性引物没有扩增到目的条带.用卵形疟不同亚型引物特异性扩增发现卵形疟原虫wallikeri亚种阳性, 序列与卵形疟原虫wallikeri亚种 (Gen Bank号:KF219564.1和KF696359.1) 18S r RNA同源性达99％.荧光定量PCR检测亦确认为卵形疟阳性.结论该病例确认为江西口岸首例输入性卵形疟wallikeri亚种感染.
关键词： 疟疾 输入性 卵形疟 wallikeri亚种 -
天门市1例输入性卵形疟病例报告
报道1例卵形疟原虫感染病例,并分析其流行病学意义,为临床诊治提供参考资料.用疟原虫快速诊断试剂盒(RDT)检测病人血样,用姬氏染色显微镜检查外周血卵形疟原虫滋养体,用巢式PCR对虫种分型,上述3种方法检测结果均为卵形疟原虫,结合患者病史及出入境史终确诊为输入性卵形疟原虫感染.卵形疟既有再燃又有复发,分析其流行病学资料对防治本病具有重要意义.
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云南省卵形疟原虫的实验室诊断研究
目的 通过实验室综合诊断一例卵形疟原虫感染,为云南省鉴别当地罕见疟原虫虫种提供借鉴. 方法 对一例尼日利亚务工回国疟疾病例采血,制作厚、薄血涂片,经Giemsa染色后在油镜下观察薄血膜疟原虫形态,鉴定虫种.针对P.v、P.f、P.m、P.o4种疟原虫的18S rRNA基因进行巢式PCR扩增并测序,在GenBank分别与P.f的M19172和P.o的KC866363、HQ697267、KF192072、KF192073、KJ871672、AF145337、KC633223、L48987参比虫株进行Blast比对,应用MEGA5.1软件进行DNA序列同源性比较并绘制系统进化树. 结果 显微镜下可观察到成熟度各异的卵形疟原虫滋养体和裂殖体,薄血膜中被寄生的红细胞大小正常或稍胀大,变形,边缘呈伞矢状或锯齿状,并有凹凸、拖尾、毛刺等卵形疟特征性形态,经巢式PCR扩增出约800 bp的卵形疟特异性基因片段,经Blast比对与GenBank中已知卵形疟部分参比虫株18S rRNA的同源性为89％～91％. 结论 经镜检、巢式PCR、测序及同源性分析,基本证实该例自尼日利亚务工回国的疟疾病例为卵形疟原虫感染.
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山东省2例输入性卵形疟病例报告
本文报告了2例国外输入卵形疟病例.两患者均为非洲几内亚务工返乡人员,回国后数月因发热、乏力而就医.入院血膜镜检见多期卵形疟疟原虫,环状体较粗大,大滋养体期、配子体期颗粒较粗；受染红细胞明显变形,呈多种不规则形状,具备卵形疟原虫特点.PCR基因产物约800 bp,与卵形疟相符.对两患者应用蒿甲醚肌注和伯氨喹口服规范治疗,分别于7d、10 d痊愈出院.
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2013年广州市越秀区输入性疟疾疫情分析
目的：分析2013年广州市越秀区输入性疟疾疫情，为进一步加强输入性疟疾防治工作提供科学依据。对2013年广州市越秀区输入性疟疾疫情报告数据进行描述性分析。结果2013年广州市越秀区输入性疟疾64例，其中恶性疟55例（85.94%），间日疟7例（10.94%），首次发现卵形疟2例（3.12%）；病例中男女比例为5.4：1，患者平均年龄为（36.06±8.65）岁，病例主要来源：非洲外籍来华经商25例（39.06%），病例外出主要为境外劳务输出25例（39.06%）；全年均有病例报告，按照主要输入源地区非洲旱季（10～次年3月）30例，雨季（4～9月）34例，季节性分布不明显。患者发病24 h内确诊的仅12例，占18.75%，经药物治疗后治愈63例，死亡1例。结论应加强境外疟疾流行区回国人员的筛查和健康教育，提高基层单位诊治能力，避免死亡病例发生和继发性传播风险。
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一宗输入性卵形疟个案调查分析与实验室诊断
目的 调查深圳市首例境外输入性卵形疟患者的发病和诊疗过程,为科学防治卵形疟提供借鉴. 方法 收集患者的临床和流行病学资料,采集外周血作涂片镜检疟原虫,疟疾快速诊断试验(rapid diagnostic test,RDT)检测疟原虫特异性抗原,巢式PCR扩增富色氨酸抗原基因鉴定基因型.结果 患者由非洲几内亚疟疾流行区回国,具有寒战、发热、出汗等临床症状.血涂片查见疟原虫,受感染红细胞呈伞矢状,薛氏点明显,可见滋养体、裂殖体和配子体,形态特点与卵形疟原虫相符;但疟疾RDT抗原检测结果为阴性;基因分型鉴定为卵形疟原虫wallikeri新亚种,采用青蒿琥酯片与磷酸伯氨喹联合用药治愈. 结论 根据患者流行病学史、临床表现以及实验室检测结果判断为一宗输入性卵形疟个案.
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福建省南平市一例输入性卵形疟的诊断
对1例误诊为间日疟的输入性病例进行复核,收集患者流行病学资料和血样,进行镜检、快速疟疾诊断试纸条检测(RDT)和巢式PCR检测,证实该输入性疟疾患者为南平市首例卵形疟病例.
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温州首例输入性卵形疟病例的诊断分析
温州首次发现1例输入性卵形疟病例,该患者曾在非洲刚果人民共和国务工2年.回国后3个月余后,出现发热等症状,经外周血涂片镜检和PCR检测诊断为卵形疟.随后给予“氯喹+伯氨喹”8日疗法治疗后,症状好转.
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浙江省1例输入性卵形疟的实验室检测分析
利用病原学和分子生物学方法,对浙江省1例输入性卵形疟原虫感染者(源自赤道几内亚)血样进行实验室确诊检测.取患者服用抗疟药物前血样50μl,涂制薄、厚血片,自然干燥、甲醇固定、吉氏染色,于光学显微镜下查找疟原虫.提取患者血样基因组DNA,实时荧光PCR检测其是否含有卵形疟、间日疟、恶性疟或三日疟原虫特异性DNA片段.镜检结果显示,患者血样薄、厚血片均发现卵形疟原虫虫体.荧光定量PCR结果显示,患者血样为卵形疟原虫特异性DNA片段阳性.依据实验室检测结果、流行病学资料和临床表现,确诊该患者为输入性卵形疟原虫感染病例.
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2例输入性卵形疟的实验室检测
目的 比较输入性卵形疟实验室检测方法,分析他们的基因特征.方法 分别用吉氏染色镜检、CareStartTM疟疾快速诊断试剂盒和巢式PCR等3种方法.对2例河南省自刚果(布)务工归来的输入性卵形疟病例进行检测,并比较检测结果.对2例外周血中疟原虫的18S rRNA基因进行测序、基因特征和同源性分析.结果 2例患者均通过吉氏染色镜检观察到典型的卵形疟原虫形态,巢氏PCR均扩增出与卵形疟预期一致的特异性条带,但CareStartTM疟疾快速诊断试剂盒检测结果均为阴性.对2例外周血中疟原虫的18S rRNA基因测序,获得一条长度均为906 bp的序列,GC含量为35.4％,与已知卵形疟18S rRNA的基因序列(GenBank登录号为AB182492)同源性为99％.结论 巢式PCR检测与吉氏染色镜检结果一致,CareStartTM疟疾快速诊断试剂盒检测阴性则不能排除卵形疟原虫感染.
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一例输入性恶性疟和卵形疟混合感染病例调查
目的 调查黄岩区一例输入性恶性疟和卵形疟混合感染病例,为疟疾防控提供参考.方法 收集病例诊治和流行病学调查资料,采集病例抗凝血作镜检和巢式PCR检测.结果 该病例在赤道几内亚务工期间有疟疾发作史和治疗史,在回国后第1天即出现寒战、 发热、 头痛等疟疾典型临床症状,镜检确诊为恶性疟;给予青蒿琥酯针剂和双氢青蒿素哌喹片治疗后,症状消失.此后在距上次发作的第110天又再次发病,疟疾快速诊断试纸(RDT)检测阴性,镜检误诊为间日疟;后经浙江省疾病预防控制中心巢式PCR检测,判定前后两次发病分别为恶性疟原虫和卵形疟原虫感染.结论 该病例是一例输入性恶性疟和卵形疟混合感染病例,今后应加强疟疾类型的鉴别诊断能力,防止漏诊误诊.
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1例输血传播卵形疟报告及追踪分析
疟疾是经按蚊叮咬或输入疟原虫携带者的血液而感染疟原虫所引起的虫媒传染病.寄生于人体的疟原虫共有4种,即间日疟原虫、三日疟原虫、恶性疟原虫和卵形疟原虫.其中卵形疟原虫引起的疟疾少见,在我国本土已多年无报告病例,在输入性感染病例中亦属罕见[1].2015年5月12日,北海市疾控中心报告1例卵形疟感染病例,经证实,这是一起经输血感染疟疾的疫情.现报告如下.
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两种检测方法在间日疟和卵形疟诊断中的应用分析
目的 分析疟原虫镜检和巢式PCR检测间日疟和卵形疟效果.方法 收集2012～2016年输入性间日疟和卵形疟病例血样,巢式PCR检测疟原虫ssRNA基因,并与显微镜检结果进行比对.结果 显微镜检和巢式PCR检测71份血样,间日疟、卵形疟、混合感染分别占74.6％、25.4％、0％和63.4％、29.6％、7％,符合率为81.7％;亚洲23份血样,镜检与巢式PCR均为间日疟,符合率为100％,巢式PCR检测非洲血样48份,间日疟、卵形疟和混合感染分别占45.8％、43.8％和10.4％,镜检与巢式PCR符合率为72.9％;巢式PCR检测26份卵形疟,经典curtisi、变种waIIikeri和混合感染分别占80.8％、11.5％和7.7％,检出变种waIIikeri总数占卵形疟19.2％.结论 巢式PCR检测疟原虫虫种鉴别优于传统镜检法,可提高疟疾病例诊断水平.
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福建省2008-2016年输入性三日疟和卵形疟流行特征
目的 分析福建省输入性三日疟和卵形疟的流行特征,为制定防制对策提供依据.方法 2008 2016年,福建省疾病预防控制中心疟疾实验室诊断各类疟疾535例,用PCR基因诊断法确诊输入性三日疟和卵形疟共57例,收集其个案调查资料,回顾性分析其流行特征.结果 2008-2016年确诊的57例三日疟和卵形疟中,三日疟15例,病例虽少,但每年可见;卵形疟42例,除2016年外病例数呈上升趋势.二者主要以非洲输入为主(55例),尤其西非;除非洲外,仅从东南亚缅甸输入三日疟和卵形疟各1例.结论 福建省输入性三日疟和卵形疟的增多,外出人口前往不同类型的疟疾流行区会变化,应引起重视.应掌握被忽视的三日疟和卵形疟的流行分布趋势,针对性地加强宣传教育,提高实验诊断能力.
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天门市1例输入性卵形疟报道
报道天门市第一人民医院收治的1例疟疾病例,用疟疾快速诊断试剂盒检测及疟原虫显微镜检查均提示为卵形疟原虫,血样送至湖北省疾病预防控制中心实验室,经巢式PCR分型为卵形疟,根据患者的出入境及病史终确诊为输入性卵形疟原虫病例,并对该病例的发病特点、诊疗经过及临床特征进行了分析,旨在提供疟疾的临床资料,以期减少输入性疟疾的发生.
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1例输入性卵形疟原虫实验室检测
目的 对1例输人性疑似疟疾患者的血样进行实验室确诊.方法 首先制备血涂片,吉姆萨染色后镜检疟原虫;其次对血样进行RDT检测;后利用疟原虫属特异性(通用型)和4种疟原虫种特异性的巢式PCR和多重PCR检测方法,对该血样进行分子生物学检测及分型.结合分子生物学检测结果,再对血片进行镜检复核.结果 初次镜检结果为间日疟原虫,RDT结果为阴性.巢式PCR检测结果,仅扩增出预期大小约800 bp的卵形疟条带;多重PCR(Pf/Pv)检测无特异性条带产生.重新对薄血膜复核镜检,改判为卵形疟原虫.结论 综合巢式PCR、多重PCR、RDT和镜检等检测结果,确诊该患者为卵形疟原虫感染.
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广州市越秀区首例输入性卵形疟疾病例报告
本文报告1例国外输入性卵形疟病例,患者为非洲东南部马拉维务工人员,回国后数月因发热、发冷、头痛而就医,入院血膜镜检见多期“间日疟原虫”,环状体粗大,大滋养体期,裂殖体期颗粒较粗,受染红细胞明显变形,呈伞状、齿轮状等多种不规则形状,经广东省寄生虫病预防控制所血液疟原虫基因检测(PCR法)鉴定为卵形疟,并进行网络直报订正,对患者使用规范化治疗后病愈出院.
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2011-2017年武汉市输入性非恶性疟流行特征分析
目的 分析武汉市境外输入性非恶性疟的流行特征,探讨其流行规律,为今后武汉市非恶性疟的诊断与防控提供依据.方法 收集2011-2017年武汉市网络报告的输入性非恶性疟疫情数据资料,并进行统计分析.结果 2011-2017年武汉市报告输入性非恶性疟92例,其中间日疟46例,卵形疟31例,三日疟7例,混合感染8例,均为实验室确诊病例.输入病例以男性青壮年为主,其中男性占97.83％,年龄的P50为36岁;职业以干部职员和农民工为主,干部职员占52.17％,农民工占29.35％.发病时间无明显季节性,从回国发病到确诊入院耗时P50为5d.输入性非恶性疟病例中来自撒哈拉以北的国家和地区占16.30％,来自撒哈拉以南的占52.17％,来自东南亚国家占31.52％,三种非恶性疟感染类型在这三个地区的分布差异有统计学意义(x2=60.999,P＜0.001),且非洲撒哈拉以北以输入性间日疟为主,撒哈拉以南以输入性卵形疟和三日疟为主,差异统计学意义(x2 =25.949,P＜0.001 ＜0.017).结论 近年来该市输入性非恶性疟诊断时效性较差,首诊医生应根据疟疾输入地以及患者发病特征及早开具疟原虫镜检单,提高对输入性疟疾的早发现、早诊断和早治疗的水平.
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一例加蓬输入性卵形疟病例的报道
报道1例输入性卵形疟病例.患者在加蓬经营木材,因发热及肾功能不好,回国做进一步检查.血检环状体胞浆致密、粗大,核较大,具备卵形疟的形态特点,经PCR检测,基因条带与卵形疟相吻,确定为卵形疟,经双氢青蒿素哌喹片治疗痊愈.
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江西省南昌市一例输入性卵形疟病例报告
本文报道了1例非洲输入性卵形疟的诊断、调查、治疗过程.患者为非洲尼日利亚务工返乡人员,回国后1周因发热、头疼等症状就医.血膜镜检见多期卵形疟原虫,环状体核较大,裂殖体、配子体期棕黄色疟色素较粗大;受染红细胞明显变形,呈多种不规则形态,具备卵形疟原虫特点.巢氏PCR基因检测产物约800 bp大小,与卵形疟相符.对患者用氯喹加伯氨喹8日疗法正规治疗后好转出院.
