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人胚肾近端小管上皮细胞文献资料
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川芎嗪对TGF-β1诱导人胚肾近端小管上皮细胞转分化影响的实验研究
目的 利用原代培养的人胚肾近端小管上皮细胞作为研究对象,探讨川芎嗪(TMP)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肾近端小管上皮细胞转分化的影响.方法 采用胶原酶消化后系列网筛过滤,再用密度梯度离心分离纯化细胞的方法,进行人胚肾近端小管上皮细胞的原代培养.原代培养的人胚肾近端小管上皮细胞传至第2代后分为5组,空白对照组、10 ng/mL TGF-β1刺激组、5 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组、10 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组及20 ng/mLTMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组.刺激48 h后,采用倒置相差显微镜、透射电子显微镜、酶化学染色和免疫细胞化学方法检测细胞的转分化情况.结果 TGF-β1刺激人胚肾近端小管上皮细胞后细胞拉长呈梭形,细胞间隙加大;电子显微镜下细胞失去极性,微绒毛减少直至消失;碱性磷酸酶染色阴性;细胞角蛋白18(CK-18)表达减弱,波形蛋白(Vimentin)表达增强,并表达α平滑肌肌动蛋白抗体(α-SMA).各浓度TMP+10 ng/mL TGF-β1刺激组细胞的上述变化均有不同程度的减弱,减弱程度与TMP浓度呈正比.结论 TMP能以浓度依赖方式阻止TGF-β1诱导的人胚肾近端小管上皮细胞的转分化.
关键词： 细胞转分化 转化生长因子β1 川芎嗪 人胚肾近端小管上皮细胞 肾间质纤维化
