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PLIN1基因沉默文献资料
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沉默PLIN1基因与异丙肾上腺素对3T3-L1脂肪细胞脂解的机制探究
目的 研究沉默PLIN1基因与异丙肾上腺素(ISO) 联合作用对3T3 - L1脂肪细胞脂解的影响及机制探讨.方法sh - PLIN1干扰载体成功转染后,以浓度为10μM的ISO处理3T3 - L1脂肪细胞.采用油红O进行脂滴染色,观察脂滴形态; 采用酶学方法 测定甘油三酯(TG) 和甘油含量,了解细胞脂解情况; 采用Western - Blot法检测脂肪细胞中围脂滴蛋白A(PLIN1A) 、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL) 、激素敏感性脂肪酶(HSL) 和其磷酸化蛋白(p - HSL) 的表达水平; 双抗体夹心ABC - ELISA法检测细胞中环磷酸腺苷(cAMP) 和蛋白激酶A(PKA) 的浓度.结果 与空白组比较,ISO + sh - PLIN1组和ISO组脂滴变小,TG含量降低,甘油含量升高,有统计学意义(P ＜ 0.01) .同时, ISO + sh - PLIN1组和sh - PLIN1组中ATGL表达量均升高,有统计学意义(P ＜ 0.05) .ISO + sh - PLIN1转染组和ISO组中HSL、p - HSL、cAMP及PKA的表达量均上调(P ＜ 0.05) .结论ISO促进脂解作用可能是cAMP/PKA通路介导,增加HSL和p - HSL的表达量来实现,而cAMP/PKA信号通路不能介导沉默PLIN1的促脂解作用.
关键词： 异丙肾上腺素(ISO) PLIN1基因沉默 3T3-L1脂肪细胞 脂解
