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MAPK14文献资料
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miR-638慢病毒载体的构建及其对MAPK14的靶向调控作用
目的 构建miR-638慢病毒过表达载体,探讨其对MAPK 14基因的靶向调控作用.方法 分别构建pSicoR-miR-638及pMIR-Report-MAPK14过表达载体,应用双荧光素酶报告基因活性、Western blot及实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法验证miR-638与MAPK14的靶向调控关系.结果 经PCR、酶切及测序结果证明成功构建了pSicoR-miR-638及pMIR-Report-MAPK 14重组质粒,并通过实验证实miR-638过表达明能显抑制MAPK14的蛋白及mRNA表达(P＜0.05);抑制miR-638的表达,则MAPK14蛋白及mRNA的表达水平明显上调(P＜0.05).结论 成功构建pSicoR-miR-638慢病毒载体,并证实其可通过靶向作用于MAPK 14-3' UTR的特异序列而直接抑制MAPK 14基因的表达.
