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vP1蛋门文献资料
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EV71型vP1蛋白表达、纯化及免疫原性的初步评价
目的 运用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达新肠道病毒EV71 vP1蛋白(EV71 vP1),并对EV71 vP1蛋白的免疫原性进行初步评价.方法 利用RT-PCR技术获得EV71 vP1基因,将基因序列克隆到载体pFastBac HT A,通过转座反应,与Bacmid DNA重组,重组后转染Sf9昆虫细胞.采用透射电镜观察法、SDS-PAGE、Western-blot方法 对vP1蛋白进行验证,利用ELISA、微量中和抗体方法 对蛋白的免疫原性进行初步评价.结果 EV71 vP1蛋白相对分子量约为33 KD,表达量约10 mg/L;ELISA抗体效价为1:900;中和抗体效价1:800.结论 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功的表达了EV71 vP1蛋白,并对其免疫原性做了初步评价,为今后EV71 vP1亚单位疫苗的研究提供参考.
关键词： EV71 vP1蛋门 Bac-to-Bac表达系统 中和抗体实验 免疫原性
