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  • 人源轮状病毒vp7基因的克隆与转基因植物研究

    作者:李晋涛;吴玉章;费蕾;邹丽云;唐艳;牟芝蓉;耿淼

    目的克隆人源轮状病毒外壳蛋白vp7基因,以制备转基因植物疫苗.方法用RT-PCR方法制备vp7基因,以植物高效表达质粒PBI121为载体,构建重组DNA质粒.重组体用载体上的通用引物为测序引物,鉴定克隆的正确性.再将鉴定过的重组质粒用农杆菌介导法转染马铃薯外植体,分别用PCR、Western blot法鉴定阳性转化植株中vp7基因的表达.结果成功地将vp7转入马铃薯植株中,并且在转化植株中检测出了vp7的表达.结论成功地构建了重组PBI121/hvp7质粒,获得表达外源基因vp7的转基因马铃薯.

  • 轮状病毒VP7 DNA免疫研究

    作者:刘勇;袁力勇;庄俊英;李春宏;冮宏映;马雁冰;孙茂盛;戴长柏

    目的研究促使基因分泌或膜锚定表达的基因修饰对轮状病毒VP7 DNA疫苗所诱导抗体水平的影响.方法把携带野生型(VP7wt)、分泌型(VP7s)和膜锚定型(VP7tm)3种VP7基因的重组pcDNA3质粒分别免疫小鼠,用大肠杆菌表达的重组VP7抗原检测VP7特异的抗体反应,统计分析.结果 3种DNA疫苗均能诱导轮状病毒VP7特异的IgG抗体反应,但其抗体水平之间无显著性差异.结论把轮状病毒VP7基因导入分泌或膜锚定表达途径不能增强其DNA疫苗抗体应答.

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