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pSMART文献资料
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基于α-病毒复制酶的高效小鼠P815肿瘤疫苗的构建和表达
目的克隆小鼠肥大细胞瘤P815细胞株的肿瘤特异P1A基因于含α-病毒复制酶的真核表达载体pSMART中,以制备P815肿瘤DNA疫苗.方法RT-PCR方法扩增P1A基因,以含α-病毒复制酶的哺乳细胞高效表达质粒pSMART为载体,构建重组肿瘤DNA疫苗.重组体经酶切和测序后,再用脂质体转化293人胚肾细胞,ECL western-blot法和免疫组化法鉴定转化细胞中P1A基因的表达.结果正确构建了P1A/pSMART重组质粒,并且在转化此质粒的293细胞中检测出了P1A的表达.结论成功构建了重组P1A/pSMART肿瘤DNA疫苗,可以进行下一步的肿瘤动物模型的疫苗接种及疗效观察.
