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C57乳鼠文献资料
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呼吸道合胞病毒的分离鉴定及其致病力的初步评价
目的 分离鉴定临床呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV),评价其致病力,为疫苗评价及致病机制的研究提供实验材料.方法 收集临床呼吸道感染重症患儿的鼻咽分泌物样本进行RT-PCR初步鉴定,通过病毒培养,空斑纯化,电镜观察及病毒滴度测定,筛选出1株呼吸道合胞病毒候选株,经全基因组测序后命名为BJ016.选用14日龄C57乳鼠,每组26只,采用BJ016为实验组,PBS为对照组,分别对小鼠滴鼻感染,30 μl/只.连续14日监测2组小鼠体质量变化及死亡率,肺组织的病毒载量、湿干比,HE染色观察肺病理变化并计数炎性细胞总量,同时采用CBA测定血清中细胞因子的变化.结果 100份临床呼吸道感染重症患儿鼻咽分泌物样本中,RT-PCR鉴定为RSV A亚型阳性共21例,经病毒分离培养、空斑纯化、电镜观察及RT-PCR鉴定后得到16株RSV临床分离株,通过TCID50测定病毒滴度筛选出1株滴度为1065 TCID50/ml的候选株,基因组序列分析显示其为NA1基因型,命名为BJ016.BJ016感染14日龄C57乳鼠后造成肺损伤,在第5日达到发病高峰时测定病载、湿干比、病理检测并计数炎性细胞,实验组较对照组具有明显统计学差异,血清中MCP-1、IL-6、G-CSF及MIP-1α均显著性升高.结论 成功分离出 1株能致死14日龄C57乳鼠的RSV病毒株并初步评价了其致病力,为疫苗评价及RSV致病机制的研究提供了良好的实验材料.
