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抗人SSX2分子单克隆抗体的制备及初步应用
目的制备抗滑膜肉瘤X断点2(Synovial sarcoma,X breakpoint 2,SSX2)分子的单克隆抗体,探讨SSX2的组织分布及其与肿瘤的关系.方法应用淋巴细胞杂交瘤技术制备小鼠源性抗人SSX2 mAb.应用间接ELISA测定腹水效价,间接免疫荧光胞内染色检测抗体与肿瘤细胞系的反应性.用酶免疫组织化学技术,对SSX2分子在人正常睾丸组织和直肠癌组织的分布进行了鉴定.结果获得1株分泌抗SSX2 mAb的杂交瘤细胞株LX-SSX2,间接ELISA测定腹水效价达1×10-5,为IgG1(κ)亚类,能识别K562胞内天然及变性SSX2分子.在酶免疫组织化学技术应用中获得较满意效果,SSX2分子表达于睾丸精原细胞的细胞核内,并在直肠癌标本中检出到SSX2的表达.结论LX-SSX2 mAb有很好的特异性,为进一步研究SSX2分子的分布及其与肿瘤的关系奠定了基础.
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膀胱癌肿瘤/睾丸抗原相关基因的表达
目的:检测多种肿瘤/睾丸抗原相关基因在膀胱癌中的表达状况.方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对33例膀胱癌患者癌组织和癌旁正常膀胱组织进行MAGEA1,SSX2,NY-ESO-1,MAGEC1,MAGEE1和HAGE的mRNA表达检测.随机抽取每种CTA基因的3例阳性RT-PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定.结果:33例膀胱癌标本中MAGEA1,SSX2,NY-ESO-1, MAGEC1,MAGEE1和HAGE的表达频率分别为21.2%(7/33),39.4%(13/33),69.7%(23/33),42.4%(14/33),36.4%(12/33)和24.2%(8/33).正常膀胱组织中6种CTA基本无表达.肿瘤组织中6种基因至少有1种表达的频率是75.8%(25/33),两种或两种以上同时表达几率是69.7%(23/33).测序结果表明RT-PCR产物确为CTA目的基因序列.结论:CTA在膀胱癌主动免疫治疗中是一种合适的、有前景的攻击靶点.同时,多种CTA的联合表达为多效价CTA疫苗在膀胱癌免疫治疗中的应用提供了理论基础.
