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MHC-I类相关分子A文献资料
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MG132对乳腺癌细胞株MICA蛋白稳定性及NK杀伤活性作用
目的 探讨蛋白酶体抑制剂MG132对乳腺癌细胞株MHC-I类相关分子A (MHC class I-related molecules A, MICA) 蛋白稳定性及NK杀伤活性作用.方法 乳腺癌细胞株MICA全基因检测.构建乳腺癌细胞株MICA等位基因真核表达载体, 转染293T细胞.流式细胞术及Western blot检测乳腺癌细胞株MICA表达.MTT检测MG132对乳腺癌细胞生长抑制.LDH检测NK细胞杀伤活性.结果 MDA-MB-231基因序列为MICA*019/A5, MDA-MB-435S基因序列为MICA*010/A5, 仅在蛋白N端 (膜外区) 第29位氨基酸有差异:MICA*019/A5在该位点为Arg (精氨酸), 而MICA*010/A5在该位点为Pro (脯氨酸), Arg或Pro位点在蛋白结构的一个beta折叠上, 而且是处于偏中间的位置.MG132对转染的293T细胞增殖均有明显抑制作用.MG132处理转染的293T细胞后, MDA-MB-435S MICA基因来源的293T细胞MICA表达降低, 并随作用时间影响更明显, 对NK杀伤敏感下降.MDA-MB-231 MICA基因来源的293T细胞MICA表达无明显改变, 对NK杀伤活性敏感性不受影响.结论 NK杀伤敏感性与乳腺癌细胞MICA表达密切相关, MG132影响MDA-MB-435S MICA稳定性, 所以影响NK杀伤敏感性, MDA-MB-231不受影响.
关键词： MG132 乳腺癌细胞株 MHC-I类相关分子A 自然杀伤细胞
