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  • 人胚胎干细胞来源红系细胞膜蛋白表达的研究

    作者:李晴;邹庆;毛斌;黄淑;赖默温;潘旭;孙文翠;陈谊金;刘嘉馨;马峰

    目的 探讨人胚胎干细胞(hESCs)来源红系细胞在发育过程中其膜蛋白,包括膜表型分子、膜骨架蛋白和跨膜蛋白的表达情况.方法 hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾(mAGM-S3)基质细胞共培养产生造血干祖细胞(CD34+ CD45+)和GPA+细胞,挑取共培养12 d的细胞,同时磁珠分选人脐血中的CD34+细胞,在多种特定细胞因子SCF、IL-6、IL-3、FLT3-L、TPO、EPO等诱导下,分别进行集落培养12-14 d产生红系爆发式集落形成单位(BFU-E),运用流式细胞术(FACs)、qRT-PCR和免疫荧光染色等方法检测并比较hESCs和人脐血CD34+细胞2种来源的红系细胞膜蛋白的表达情况,并以后者作为对照组.结果 hESCs来源BFU-E的膜蛋白的表达趋势与对照组相近:其膜骨架蛋白和跨膜蛋白的基因,如SPTA、SPTB、ANK1、EPB41等基因转录水平都在逐渐增强,而一些膜蛋白如黏附分子CD49d、CD29、CD71等的表达逐渐降低,CD47基本不表达;带3蛋白(Band 3)表达量较高且与成体型血红蛋白β-globin的表达呈正相关.结论 在hESCs向红系诱导生成过程中,一些膜表型分子表达在逐渐降低,而膜蛋白表达逐渐增强.

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