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HPA-1a抗体MAIPA定量检测标准体系的建立
目的 建立针对人类血小板抗原HPA-1a抗体的血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定定量检测(MAI-PA)的标准体系.方法 用MAIPA方法检测不同稀释度的标准HPA-1a抗血清,优化该方法的佳实验条件,绘制线性标准曲线,并对该方法的敏感度、特异性、准确度和精密度进行了分析.结果 经优化,确定MAIPA定量检测方法的佳实验条件如下:铺板抗体羊抗鼠IgG单抗:3μg/mL,血小板每孔2×107个,检测抗体小鼠抗人CD61单抗:20 μg/mL,酶标羊抗人IgG∶稀释度1∶10 000.该方法的线性检测范围是0-4IU.该方法低检测限至少为0.3IU,批内变异系数为1.3％-3.6％,批间变异系数为4.0％-5.6％.特异性检测:用抗-A、抗-B、抗-H、抗-I、抗-P1、抗-Lewisa等试剂以及含其他抗体的抗血清进行试验,均无明显阳性.结论 本研究建立的针对HPA-1a抗体的MAIPA定量检测的标准方法具有较高的敏感度、特异性、准确度和精密度,对于临床相关疾病的诊断和血小板安全输注具有重要的应用价值.
