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  • 基于RhD蛋白Aptamer筛选技术的随机ssDNA次级文库制备条件的优化

    作者:张印则;周丹;吴凡;苏宇清;梁延连;李大成;徐华;周华友

    目的 优化筛选RhD蛋白DNA-aptamer的ssDNA次级文库制备条件.方法 对影响dsDNA扩增的主要参数(退火温度、循环数、模板用量、引物用量等)进行优化,在确定dsDNA扩增条件已优化的基础上,进而优化上、下游引物用量比例及扩增循环数,确定不对称PCR制备ssDNA的佳条件.结果 不对称PCR扩增的佳条件为:上游引物终浓度为1 pmol/μL,上、下游引物浓度比例为20∶1,退火温度为59℃,循环数为30-35.结论 制备条件优化后,经过不对称PCR扩增可获得浓度高、纯度好的ssDNA次级文库.

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