首页 > 文献资料
-
携反义二型基质金属蛋白酶基因的重组腺病毒的构建
目的构建携带反义二型基质金属蛋白酶(MMP2)基因的重组腺病毒.方法从新鲜肝癌组织中提取总RNA,用RT-PCR法合成MMP2 cDNA序列中5′端转录起始位点附近长约500 bp的基因片段,将此片段反义克隆到腺病毒载体(AdEasy)系统的多克隆位点,经转染293细胞生成携带反义MMP2基因的重组腺病毒Ad-MMP2As.结果成功构建并包装携带反义MMP2基因片段的重组腺病毒Ad-MMP2AS,病毒滴度达1×108/ml.结论构建的重组腺病毒Ad-MMP2As可望能有效地将反义MMP2基因片段导入人肝癌细胞株,为进一步研究肝癌浸润和转移机理以及探讨抑制肝癌浸润和转移的方法提供实验基础.
-
携反义基质金属蛋白酶-2的重组腺病毒对肝癌生长的影响
目的探讨携带反义二型基质金属蛋白酶(MMP2)基因的重组腺病毒(Ad-MMP2AS)对人肝癌细胞株(Bel-7402)体外侵袭性和人肝癌动物模型生长的抑制作用.方法用已构建的Ad-MMP2AS感染人肝癌细胞株(Bel-7402),用侵袭小室模型检测Ad-MMP2AS对Bel-7402细胞降解人工基底膜的抑制作用;用Western Blot和明胶酶谱检测Ad-MMP2AS对Bel-7402细胞分泌MMP2的影响;用感染了Ad-MMP2AS的Bel-7402细胞接种于裸鼠皮下,使其在裸鼠体内成瘤,以观察其成瘤能力;用Ad-MMP2AS瘤内注射,以观察它对肝癌生长的抑制作用.结果 Ad-MMP2AS感染的Bel-7402细胞分泌MMP2被抑制、穿过人工基底膜Matrigel的Bel-7402细胞数下降52%、感染Ad-MMP2AS的Bel-7402细胞的成瘤量下降4.3倍,Ad-MMP2AS瘤内注射后瘤体生长减少63%.结论 Ad-MMP2AS能明显抑制肝癌的生长,对肝癌有治疗潜力.
