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酶β1亚基文献资料
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ATP1B1真核表达质粒的构建及其对胃腺癌SGC-7901细胞的作用
目的 构建 Na+,K+-ATP 酶β1亚基(ATP1B1)真核表达质粒,为利用 ATP1B1 进行肿瘤基因治疗莫定基础.方法 以白细胞文库为模板扩增 ATP1B1 cDNA,定向插入到 pEGFP-C3 真核表达质粒中,构建pEGFP-ATP1B1 重组质粒;经酶切分析和测序鉴定后,通过脂质体介导转染胃腺癌 SGC-7901 细胞,利用 real-timePCR 检测转染后 SGC-7901 细胞的 ATP1B1基因表达,并进行其ATP酶活性检测,MTT 法测定转染后 SGC-7901细胞的增殖活性.结果 重组质粒经鉴定证实含有ATP1B1 cDNA 序列,转染pEGFP-ATP1B1的SGC-7901 细胞ATP1B1基因表达增高达129.2%,ATP 酶活性增强为(2.95±0.210)%,细胞生长增殖显著受抑.结论 成功构建了 ATP1B1 真核表达质粒,为进一步利用ATP1B1研究恶性肿瘤基因治疗莫定基础.
