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  • 间断高浓度葡萄糖对胰岛β细胞的损伤机制研究

    作者:邱平;赵铁耘;李秀钧;刘述益;李小玉

    目的 探讨间断高浓度葡萄糖对培养的胰岛β细胞(HIT-T15细胞)的损伤机制.方法 实验分为对照组(葡萄糖 5.5 mmol/L)、持续高浓度葡萄糖组 (葡萄糖16.7 mmol/L) 、间断高浓度葡萄糖组(葡萄糖1 6.7 mmol/L培养2 h后更换为5.5 mmol/L的葡萄糖3 h,每天重复共3次,夜间9 h维持在5.5 mm ol/L的培养基中)、抗氧化剂(NAC 1.0 mmol/L)+持续高糖组和NAC+间断高糖组.放免法测定胰岛素分泌水平;罗丹明123染色线粒体,激光共聚焦显微镜测量线粒体膜电位(MMP) ;荧光素酶方法检测细胞内ATP含量;硫代巴比妥酸法测量脂质过氧化物丙二醛(MDA) 水平 ;流式细胞仪测定活性氧簇(ROS)的水平.结果 高糖刺激后胰岛素分泌量在间断高糖组[(3.13±1.11) μIU/mL]和持续高糖组[(5.18±0.95) μIU/mL]分别较对照组[(9.33±0.62) μIU/mL]均明显减少(P<0.05);MDA水平、 ROS水平明 显升高(P均<0.05),并且间断高糖组较持续高糖组产生更多的ROS(P<0.05); 间断高糖组和持续高糖组细胞内ATP含量、MMP水平明显降低(P<0.05或P<0.01).结论 间断高浓度葡萄糖与持续高糖均使培养的β细胞线粒体氧化应激水平增高,且间断高糖组较持续高糖组产生更严重的氧化应激,从而使β细胞分泌胰岛素功能 受损,其机制可能是由于氧化应激使线粒体的膜电位下降,细胞ATP含量减少所致.

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