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沙门菌侵袭蛋白A文献资料
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重组沙门菌侵袭蛋白A的原核表达与纯化
目的在大肠杆菌中表达重组沙门菌侵袭蛋白A,并对表达产物进行分离和纯化.方法提取沙门菌基因组模板,PCR扩增侵袭因子 invA 基因目的片段,插入表达质粒载体pET-30c(+)中,构建pET-invA重组子,经双酶切和测序证实后,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白表达,镍琼脂糖凝胶亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测鉴定表达蛋白.结果成功构建了沙门菌pET-invA大肠杆菌表达重组子,实现了该蛋白在大肠杆菌中的高效表达,分离纯化的表达产物纯度达到电泳纯.结论沙门菌侵袭蛋白A的成功表达和分离纯化,为该蛋白的免疫学性能研究、相应抗体的制备以及沙门菌快速检测方法的建立奠定了基础.
