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肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体结合特性的对比研究
目的研究肝细胞肝癌与癌旁肝组织胰岛素受体密度与亲和力的差异.方法采用体外受体结合实验,通过S catchard分析,计算两种细胞膜的大结合容量(Bmax)与平衡解离常数(Kd值).结果肝癌细胞膜胰岛素受体Bmax为1.94±0.64pmol/mg蛋白,Kd值为2.12±0.62nmol/L;癌旁肝组织细胞膜胰岛素受体Bmax为1.42±0.57pmol/mg蛋白 ,Kd值为2.21±0.78nmol/L.肝癌细胞膜胰岛素受体Bmax显著高于癌旁组织细胞膜( P＜0.05),而肝细胞肝癌与癌旁肝组织细胞膜的胰岛素受体亲和力无显著性差异(P ＞0.05).结论肝细胞肝癌较癌旁肝组织表达胰岛素受体增高,而受体亲和力无明显差异.
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胰岛素-MTX受体的结合特性
目的通过体外受体结合实验评价胰岛素-MTX(甲氨喋呤)的受体结合特性,探讨胰岛素作为受体介导靶向治疗肝癌载体的可行性.方法将MTX与胰岛素共价连接,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化,高效液相层析鉴定.通过受体结合实验,测定胰岛素、胰岛素-MTX的IC50及Ki值,比较两者IC50及Ki值的差异,以评价MTX与胰岛素共价连接后的偶联物的受体结合特性.结果胰岛素-MTX能同125I-胰岛素竞争性与肝癌细胞膜结合.胰岛素的IC50为5.01±1.24nmol/L,Ki值为4.85±1.12nmol/L;胰岛素-MTX的IC50为93.82±19.32nmol/L,Ki值为91.88±16.86nmol/L.结论胰岛素与MTX共价偶联后,仍具有与胰岛素受体结合的生物学活性.
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H22肝癌细胞与正常小鼠肝细胞胰岛素受体表达的对比
本实验采用氯胺T法进行了胰岛素的125I标记。通过体外受体饱和结合实验及竞争结合实验观察了H22肝癌细胞与正常小鼠肝细胞胰岛素受体的结合特性，并进行Scatchard分析，计算出两种细胞的大结合容量(Bmax)与平衡解离常数（Kd）。H22肝癌细胞胰岛素受体Bmax为每个细胞5.61±1.10 amol， Kd为1.81±0.56 nmol/L；正常小鼠肝细胞胰岛素受体Bmax为每个细胞3.22±0.81 amol，Kd为2.10±0.91 nmol/L。H22肝癌细胞胰岛素受体Bmax显著高于正常肝细胞（P<0.05），而两种细胞胰岛素受体与125I-胰岛素的亲和力无显著性差异（P>0.05）。
