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鸡胚脊髓背角感觉神经元诱向因子的初步分离及鉴定
为探讨脊髓背角内影响SG神经元存活和生长的因素,取 500只Hamburger 40期鸡胚脊髓背角组织匀浆,离心后提取上清液,用SDS-PAGE电泳初步分离脊髓背角内的蛋白质.以简易细胞钓蛋白带(PBFC)技术找寻有神经细胞贴附的蛋白带并求相对迁移率(Rf).将有神经细胞贴附的各Rf范围凝胶剪下并将胶内各蛋白带电转移至硝酸纤维膜上,用NGF、BDNF、NT-3、GDNF兔抗血清于硝酸纤维膜上分别进行Western杂交.PBF C结果显示: 在电泳胶Rf 0.10～0.19、0.30～0.35、0.50～0.55、0.60～0.67、0.90～0.94 处发现有多少不等的神经元附着.而Western杂交结果表明,在上述各Rf范围均有强弱不等的多条阳性杂交带.分别为NGF、BDNF、GDNF者;NGF、BDNF、NT-3者;NGF、BDNF、NT-3者 ;NGF、NT-3者、BDNF、NT-3者.提示:40期鸡胚脊髓背角提取液各Rf蛋白带的促神经元存活作用,至少涉及NGF、BDNF、NT-3、GDNF中的两种或三种.
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不同发育期鸡胚脊髓背角提取液的神经营养活性初探
为了探讨在发育过程中鸡胚脊髓背角提取液的神经营养活性作用,分别取Hamburger 30期和40期鸡胚的脊髓背角组织制成条件持养液,以Hanks平衡盐溶液代替背角提取液设置对照组.实验组分别培养了两时相的脊神经节及其神经元.培养48 h时测量各组每个脊神经节神经元的神经突起平均长度及神经元存活数.结果:两时相实验组的神经元存活数量均明显大于对照组(P＜0.05);而神经突起长度仅40期组者大于对照组(P＜0.05).另外,40期组脊神经节神经元的神经突起长度及神经元存活数量也明显高于30期者.提示,两时相脊髓背角内均存在某些初级感觉神经元诱向因子.但在不同的发育阶段脊髓背角的神经营养活性却有变化.
