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HERV-K gag基因文献资料
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重组质粒pGEM-HERV-K gag的构建与鉴定
目的:构建pGEM-HERV-K gag重组质粒.方法:分离人外周血单核细胞,提取总RNA,逆转录得到cDNA,PCR扩增目的基因后回收并纯化目的基因,TA基因克隆方法构建重组质粒,并采用酶切和PCR进行鉴定.结果:以PBMC的cD-NA为模板,PCR扩增获得446 bp的HERV-K gag目的基因,克隆到pGEM-T载体构建pGEM-HERV-K gag重组质粒,酶切及PCR结果证实重组质粒构建成功.结论:成功构建pGEM-HERV-K gag质粒,此方法可用于比较病人与健康人的gag基因的序列.
关键词: HERV-K gag基因 TA克隆 外周血单核细胞