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  • 玻璃化冷冻法在未成熟卵子冷冻技术中的应用

    作者:李娜;苗聪秀;关素萍;苗卉;李锐;杨红梅

    目的:探讨玻璃化冷冻法在未成熟卵子冷冻方面的应用价值.方法:选取GV期卵母细胞744枚,随机分为5组,A组(128枚),GV期卵子直接进行未成熟卵母细胞体外培养(IVM);B组(220枚),GV期卵子直接行玻璃化冷冻;C组(155枚),GV期卵子直接行IVM,待培养至MⅡ期,再行玻璃化冷冻;D组(112枚),GV期卵子去除冠-丘细胞,行玻璃化冷冻;E组(129枚),GV期卵子保留除冠-丘细胞行玻璃化冷冻.比较各组卵母细胞的存活率、成熟率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:与A组相比,B组和C组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率均降低(P<0.05);B组与C组间存活率、成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差异(P>0.05).E组的成熟卵子率较D组提高(P<0.05),但两组在解冻卵子存活率、受精率、2细胞数和>2细胞数方面无差异(P>0.05).结论:未成熟卵子的玻璃化冷冻保留冠-丘细胞可显著提高冻融效果.

  • 人类未成熟卵子冷冻的研究

    作者:孔刚;刘丽英;程昭霞

    目的 评估不同冷冻方法对人类未成熟卵子复苏和发育潜能的影响.方法 选取2009年6月~2013年12月在该院生殖中心就诊的297例卵胞浆内单精子注射(ICSI)患者捐赠的不成熟卵子438枚,其中30枚卵子冷冻前发育至MⅡ期,设为对照组;其余408枚随机分为慢速冷冻组及玻璃化冷冻组.复苏的卵子经体外成熟培养(IVM)后采用ICSI方式授精.比较各组解冻复苏率、体外培养成熟率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果 GⅤ期卵子解冻复苏率(89.4%)高于MⅠ期卵子(74.0%),而复苏后GⅤ期卵子体外培养成熟率(21.4%)低于MⅠ期卵子(55.4%);慢速冷冻组MⅠ期卵子解冻复苏率(67.9%)低于玻璃化冷冻组(79.1%);慢速冷冻组GⅤ期卵子复苏率及复苏卵子体外成熟率与玻璃化冷冻组比较,差异无统计学意义(P>0.05);慢速冷冻组解冻复苏的MⅠ期卵子体外成熟后,受精率(51.7%)、卵裂率(80.6%)、囊胚形成率E(20.0%)及囊胚形成率o(3.0%)与玻璃化冷冻组(64.8%、70.2%、15.0%、3.1%)比较,差异均无统计学意义(P>0.05),均低于对照组(86.7%、96.2%、52.0%、43.3%).结论 未成熟卵子去颗粒细胞3h内如能发育至MⅡ期,受精后胚胎具有正常的发育潜能.慢速冷冻和玻璃化冷冻均适用于保存未成熟卵子,而前者胚胎贮存在封闭的麦管内,因此会更安全一些.在冷冻过程中,GⅤ期卵子对低温及冷冻保护剂的耐受能力高于MⅠ期卵子.

  • 冷冻对人类成熟及未成熟卵发展潜能的影响

    作者:卢兴宏;黄艳仪;龙小林;杜红姿;黄青

    目的:探索冷冻卵子的成熟时期.方法:将153个生发泡期(GV期)人类卵子分为3组,对照组:体外培养至成熟(MⅡ期),行单精子胞浆内注射(ICSI),MⅡ期冷冻组:体外成熟至MⅡ,然后将MⅡ期卵子进行冷冻,解冻后将存活的卵子行ICSI;GV期冷冻组:将GV期卵子进行冷冻,解冻后体外培养至MⅡ,然后再行ICSI.用慢速冷冻快速解冻的方法对成熟的和未成熟的卵子进行冷冻和解冻,观察体外成熟情况、解冻后的存活情况、受精情况及胚胎发育情况.结果:体外成熟率:GV期冷冻组51.2%,对照组为70.0%,有显著差异;受精率:3组分别为68.0%、33.3%、42.1%,有显著差异.对照组的发展潜能要显著优于试验组;GV期冷冻组的存活率、受精率优于MⅡ期冷冻组.结论:冷冻会对卵子的发育潜能有1定的损伤,在GV期进行冷冻可降低这种伤害.

  • 不同浓度氧气对人未成熟卵子体外成熟和早期胚胎发育的影响

    作者:罗阳;彭芳;杜红姿;李磊

    目的 收集辅助生殖治疗中废弃的人类未成熟卵子,研究其在不同浓度氧气培养条件下的卵子成熟率和受精及其后续早期胚胎发育的影响.方法 将收集的未成熟卵子随机分组为低浓度和高浓度氧气条件进行体外成熟培养,将成熟卵子进行卵胞质内单精子显微注射并行体外培养,研究卵子的体外成熟率、受精率以及胚胎卵裂率和优质胚胎率.结果 对于GV期来源卵子,低氧培养条件下的卵子体外成熟率和受精率要显著高于高氧组(P<0.05),两组间的胚胎卵裂率和优质胚胎率比较差异无统计学意义(P>0.05);MI期来源卵子在低氧培养条件下的卵子体外成熟率要显著高于高氧组(P<0.05),两组间的受精率、胚胎卵裂率和优质胚胎率差异无统计学意义(P>0.05).结论 低浓度氧气对于人类未成熟卵子的体外成熟有促进作用,能提高GV期卵子的体外成熟后的受精率;对于体外成熟培养卵子来源的胚胎卵裂和优质胚胎率没有影响.

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